РЕГЛАМЕНТАЦИЯ ТЕМПЕРАТУРНЫХ РЕЖИМОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА ПЛАНАРИЯХ

РЕГЛАМЕНТАЦИЯ ТЕМПЕРАТУРНЫХ РЕЖИМОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА ПЛАНАРИЯХ Майоров С.А. Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, РФ e-mail: dikyagux@mail.ru Пресноводные планарии являются классической моделью для изучения стволовых клеток (Baguna, 2012; Hubert et all, 2015). Стволовые клетки планарии называются необластами. Однако, ряд авторов отмечает, что многие работы с регенерирующими планариями оказываются невоспроизводимыми или противоречивыми друг другу (Тирас и др. 2012 – 2015; Liboff, 2013, 2014; Maffei, 2014). В работе предпринята попытка объяснения плохой воспроизводимости результатов экспериментов отсутствием должного контроля за температурным режимом. Отметим, что суточные колебания температуры в лабораторном помещении в некоторые дни могут достигать 6 - 8 градусов, а разностью температур между сосудами с планариями, расположенными в разных местах одной комнаты зависит от конвекционных потоков, формы сосуда и может превышать 3 - 5 градусов. Работа выполнена на планариях Girardia tigrina (Platyhelminthes, Triclada) – бесполой лабораторной расе. Регенерацию вызывали ампутацией головной части тела планарий на уровне «глаз». Регистрация процесса регенерации при 17, 20 и 28оС осуществлялась с использованием метода прижизненной компьютерной морфометрии. Показано, что убыль общей площади проекции регенерирующей планарии носит экспоненциальный характер для всех трех температурных режимов. При этом характерные времена уменьшения биомассы составили 16, 34 и 125 суток соответственно для 28, 20 и 17оС. Миграция необластов в бластему в течении первой недели при 17оС происходила медленнее, чем при 20оС и 28оС. После первой недели регенерации при 20оС миграция необластов в бластему замедлялась, а при 28оС после 15 дня количество необластов в бластеме не только стабилизировалось, но и начало уменьшаться. Это означает, что в процессе регенерации организм планарии стремится поддерживать пропорции тела, в частности, отношение площади проекции бластемы к общей площади. Отметим, что в диапазоне от 28оС до 17оС график Аррениуса линеен, а перелом, свидетельствующий о резком торможении метаболизма, по-видимому, происходит при более низких температурах в диапазоне 15оС - 16оС. Полученные результаты позволяют оценить и режимы кормления экспериментальных планарий. На основании полученных результатов и экспериментально проверенной еженедельной периодичности питания для планарий при комнатной температуре построена балансная кривая, определяющая периодичность кормления, при которой размеры планарий остаются без изменений. Значения периодичности кормления, расположенные под балансной кривой, будут способствовать росту планарий, а значения над кривой уменьшению их размеров. Таким образом, соблюдение температурного режима при содержании животных и в ходе эксперимента способно оптимизировать и унифицировать получаемые результаты, а также ускорить время подготовки и проведения экспериментов при высоких температурах. Минимизация ошибок, связанных с влиянием годовых и суточных колебаний температуры достигается термостатированием помещения с планариями.

Рецензии:

Авторизуйтесь, чтобы добавить рецензию

- у работы пока нет рецензий -

Отзывы:

Авторизуйтесь, чтобы оставить отзыв