МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАНЕВОГО ЗАЖИВЛЕНИЯ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ NO-СОДЕРЖАЩИХ ГАЗОВЫХ ПОТОКОВ И ДОНОРА NO.

Введение Возникновение послеоперационных осложнений, которые могут переходить в острую или хроническую форму без адекватной терапии, описывают более чем у трети больных, перенесших хирургическое вмешательство[1]. По данным ВОЗ на 2016 год, частота возникновения острых и подострых реабилитационных отклонений значительно увеличилась[2]. Поэтому актуален поиск наиболее эффективных и доступных стимуляторов регенерации тканей, в частности – веществ-индукторов заживления ран. В 1997 году обнаружено, что плазмохимический поток очищенного атмосферного воздуха, содержащий NO (оксид азота II), стимулирует заживление кожных ран. Это стало предпосылкой разработки и развития методов лечения острых и хронических воспалительных процессов при помощи экзогенной NO-терапии[3]. NO - один из универсальных физиологических регуляторов в норме и при патологии играет важную роль на всех этапах раневого заживления. Снижение концентраций эндогенного NO приводит к нарушению регенерации. Поэтому применение экзогенного NO является перспективным направлением для послеоперационной реабилитации. Данные, отражающие зависимость: доза – эффект, практически отсутствуют, недостаточны цитоморфометрические описания тканей при NO-терапии. В рамках этой работы мы анализируем терапевтическое влияние доноров экзогенного NO на модели неинфицированной, полнослойной, плоскостной кожной раны. Материалы и методы Газовый поток NO частиц генерировался плазмогенератором «Плазон», разработанный в МГТУ имени Н.Э. Баумана. При дуговом электрическом разряде на создается низкотемпературная плазма, генерируя поток частиц NO из атмосферного азота и кислорода. В работе использована модель полнослойной плоской кожной раны[3]. Самцы крыс линии Wistar (n=96), выведенные в филиале «Андреевка» ФГБУН "НЦБМТ" ФМБА России, содержались в стандартных условиях Центрального вивария «ФГАОУ ВО Первого МГМУ им. И. М. Сеченова Минздрава России». Животных анестезировали раствором Золетил® 100 (Virbac, Франция) внутримышечно, 6мг/кг массы тела. После подготовки межлопаточной области иссекали полнослойный участок кожи диаметром 8-10 мм до подлежащей, собственной фасции. В разрез вводили тефлоновое кольцо. На кольцах закреплялась перфорированная пленка для защиты раны от высыхания и загрязнения. Каждому животному, из двух групп крыс линии Вистар с контрольными (К) и экспериментальными (Э) подгруппами, иссекали ткань между лопатками для моделирования полнослойной раны. Разделение на две группы обусловлено разным воздействием на Э подгруппы – ДНКЖ и NO-СГП соответственно. В течение трех суток крысы обеих групп обрабатывались NO-донорами. В каждом эксперименте было по 3 Э и по 1 К подгруппе. Крысы выводились из эксперимента на 4-е, 7-е, 14-е, 21-е сутки. На 3-е, 4-е сутки отбирался раневой экссудат для изготовления мазков. Мазки окрашивали по Романовскому-Гимзе («БиоВитрум», Россия). Подсчет количества нейтрофилов и макрофагов в мазках производили в 10 полях зрения при увеличении 400х. На 7-е, 14-е, 21-е сутки измеряли площади затягивающихся ран. Для изучения процесса ранозаживления на разных этапах использовались классические гистологические методы. Кожа с раной была иссечена и помещена в фиксатор Буэна при +4°С. Далее были сделаны срезы 4 мкм толщиной. Для общеморфологического исследования была проведена окраска срезов гематоксилин-эозином. Также срезы, окрашенные пикросириусом красным, исследовали в режиме поляризационной микроскопии. Помимо конфокального анализа препаратов, провели иммуногистохимическое исследование срезов, для этого были использованы антитела против виментина. Полученные гистологические препараты были проанализированы с помощью полуколичественного и количественного анализа. Выводы Показатели раневого заживления (снижения воспалительных и усиления регенеративных процессов) доказали благоприятное терапевтическое воздействие доноров NO в ранозаживлении на 7-21 сутки.