ФАКТОРЫ СМЕРТНОСТИ И ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ЖИЗНИ РУКОКРЫЛЫХ НА ЗИМОВКАХ

Ольга Протасова

ФАКТОРЫ СМЕРТНОСТИ И ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ЖИЗНИ РУКОКРЫЛЫХ НА ЗИМОВКАХ

Летучие мыши являются одними из наиболее успешных и разнообразных млекопитающих на Земле. Летучие мыши имеют существенное значение для поддержания здоровья экосистем, поскольку они играют роль опылителей растений, участвуют в распространении семян, охотятся на насекомых, включая вредителей леса и сельского хозяйства. Многие виды летучих мышей занесены в Красную книгу Международного союза охраны природы, и почти половина из них находится под угрозой. Для оценки и предотвращения дальнейшего сокращения их численности проводились исследования биологии летучих мышей, их экологии и поведения, а таким аспектом, как заболевания, в значительной степени пренебрегали. Большинство исследований ограничивается идентификацией обнаруженных микроорганизмов, а исследования в отношении инфекционных заболеваний и причин смерти летучих мышей немногочисленны В России изучение причин заболеваемости и смертности рукокрылых никогда и нигде не проводилось. В связи с этим целью нашей работы было изучение смертности рукокрылых на зимовках. Таким образом, объектом изучения стала смертность летучих мышей. Изучение данной проблемы позволит разработать и принять меры, принятие которых способно замедлить и предотвратить сокращение численности летучих мышей. Методы исследования: учет численности летучих мышей на зимовках, сбор трупов животных, учет животных, зараженных грибком или имеющих травмы, очистка трупов животных и их идентификация.

Биология

Диссертации

Вуз: Пензенский государственный педагогический университет имени В.Г. Белинского (ПГПУ им. ВГ. Белинского)

ID: 5f3820cecd3d3e0001ba423f

UUID: fa1247a0-c14d-0138-1ae2-0242ac180006

Язык: Русский

Опубликовано: больше 3 лет назад

Просмотры: 30

43.38

Ольга Протасова

Комментировать 15

Рецензировать 0

Скачать - 2,5 МБ

Поделиться работой

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Пензенский педагогический институт им. В.Г. Белинского Факультет физико-математических и естественных наук Направление подготовки Магистерская программа Кафедра "Зоология и экология" 06.04.01 «Биология» «Экология» МАГИСТЕРСКАЯ ДИССЕРТАЦИЯ на тему: «ФАКТОРЫ СМЕРТНОСТИ И ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ЖИЗНИ РУКОКРЫЛЫХ НА ЗИМОВКАХ» Студент _____________________________ Протасова Ольга Валерьевна (подпись, дата) Научный руководитель ____________________________ Смирнов Д.Г. (подпись, дата) Нормоконтролѐр ______________________________ Быстракова Н.В. (подпись, дата) директор ФГБУ «Государственный Рецензент природный заповедник ____________ Добролюбов А.Н. (подпись, дата) «Приволжская лесостепь» Работа допущена к защите (протокол заседания кафедры от ____________ № ___) Заведующий кафедрой ___________________ Титов С.В. (подпись) Работа защищена с отметкой ____________(протокол заседания ГЭК от __________№ __) Секретарь ГЭК ___________________ (подпись) Пенза 2018 Быстракова Н.В.

ОГЛАВЛЕНИЕ Стр. ВВЕДЕНИЕ. . . . . . . . . . . 3 . . . 5 1.1. Результаты бактериологического исследования . . . 8 1.2. Результаты вирусологического исследования . . . . 10 1.3. Результаты паразитологического исследования . . . 11 1.4. Причины смерти и динамика заболеваний летучих мышей . 12 ГЛАВА 1. СМЕРТНОСТЬ ЛЕТУЧИХ МЫШЕЙ В ЕВРОПЕ И ВЫЗЫВАЮЩИЕ ЕЁ ПРИЧИНЫ . . . 1.4.1. Синдром Белого Носа у летучих мышей . . . . 15 . . . 21 ИСКУССТВЕННЫХ ПОДЗЕМЕЛИЙ САМАРСКОЙ ЛУКИ . . 24 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ . . . ГЛАВА 3. МИКРОКЛИМАТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ГЛАВА 4. ЧИСЛЕННОСТЬ РУКОКРЫЛЫХ И ИХ ПОКАЗАТЕЛИ СМЕРТНОСТИ В МЕСТАХ МАССОВЫХ ЗИМОВОК . . . 29 4.1. Видовой состав и численность . . . 29 4.2. Показатели смертности летучих мышей на зимовках . . 32 4.3. Причины смертности летучих мышей на зимовках . . . 45 4.4. Причины высокой продолжительности жизни рукокрылых . 48 ВЫВОДЫ . . . . . . . . . . . . . . 51 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ . . . . . . . . 53 ПРИЛОЖЕНИЕ. . . . . . . . 60 . . 2

ВВЕДЕНИЕ Летучие мыши являются одними из наиболее успешных и разнообразных млекопитающих на Земле. Около 1230 видов рукокрылых встречаются на всех континентах, кроме Антарктиды, и занимают множество разнообразных экологических ниш (Schipper et al., 2008). Летучие мыши имеют существенное значение для поддержания здоровья экосистем, поскольку они играют роль опылителей растений, участвуют в распространении семян, охотятся на насекомых, включая вредителей леса и сельского хозяйства (Kun et al., 2011). Многие виды летучих мышей занесены в Красную книгу Международного союза охраны природы, и почти половина из них находится под угрозой (Mickleburgh et al., 2002). Для оценки и предотвращения дальнейшего сокращения их численности проводились исследования биологии летучих мышей, их экологии и поведения, а таким аспектом, как заболевания, в значительной степени пренебрегали (Wibbelt, Moore, et al., 2010). В последние два десятилетия значению рукокрылых, как потенциальных переносчиков значимых вирусных заболеваний, особенно зоонозов, уделяется все больше внимания. К тому же, обширные исследования бешенства летучих мышей, которое изучается уже более полувека, выявили большое количество микробных агентов (Wibbelt et al., 2009), включая тех, что вызывают возникновение важных зоонозных вирусов, обнаруженных у летучих мышей по всему миру (Halpin et al., 2000; Chua et al., 2002; Leroy et al.,2005; Li et al., 2005; Wong et al., 2007; Towner et al., 2009; Kuzmin et al., 2011). Тем не идентификацией менее, большинство обнаруженных исследований микроорганизмов, а ограничивается исследования в отношении инфекционных заболеваний и причин смерти летучих мышей 3

немногочисленны (Simpson, 2000; Daffner, 2001, Duignan et al.,2003; Hajkova, Pikula, 2007). В Европе исследования в основном сосредоточены на лиссавирусах (Harris et al., 2006; Muller et al., 2007) и коронавирусах (Gloza-Rausch et al., 2008; Rihtaric et al., 2010) европейских летучих мышей, но в Германии и Великобритании на найденных мертвых летучих мышах были обнаружены первые признаки патогенных бактерий (Simpson, 2000; Daffner, 2001; Evans et al., 2009; Muhldorfer et al., 2010; Muhldorfer, 2011) и новых вирусов (Wibbelt et al., 2007; Sonntag et al., 2009). В России изучение причин заболеваемости и смертности рукокрылых никогда и нигде не проводилось. В связи с этим целью нашей работы было изучение смертности рукокрылых на зимовках, а также выявление возможных ее причин и продолжительности жизни. Исходя из поставленной цели решали следующие задачи: 1. Выявить видовую принадлежность и численность рукокрылых, зимующих в искусственных подземельях Самарской Луки; 2. Составить электронную базу по находкам погибших рукокрылых на местах зимовок в штольнях Самарской Луки; 3. Установить уровень смертности разных видов рукокрылых на зимовках; 4. Определить вероятные причины, приводящие к гибели рукокрылых на зимовках; 5. Сформировать гипотезы, продолжительностью жизни рукокрылых. 4 связанные с большой

ГЛАВА 1 СМЕРТНОСТЬ ЛЕТУЧИХ МЫШЕЙ В ЕВРОПЕ И ВЫЗЫВАЮЩИЕ ЕЁ ПРИЧИНЫ В период с 2002 по 2009 год были исследованы в общей сложности 486 погибших летучих мышей из 19 европейских видов гладконосов (т.е. семейства Vespertilionidae) (Muhldorfer et al., 2011). Трупы летучих мышей предоставлены исследователями рукокрылых и реабилитационными центрами и 6 различных географических регионов в Германии: Берлина и его пригородов (n = 223), Баварии (n = 165), Бранденбурга (n = 38), Нижней Саксонии (n = 36), Тюрингии (п = 21 ), а также земли Баден-Вюртемберг (n = 3). Если летучие мыши умерли во время наблюдений или должны были быть умерщвлены по соображениям защиты животных, трупы немедленно сохранялись при температуре –20°C и отправлялись в Институт Лейбница по изучению зоопарков и дикой природы в Берлине для диагностических исследований. Из всех гистопатологически исследованных тушек около 90% были пригодны для бактериологического исследования. В меньшей степени (43%), исследования проводились в Институте Роберта Коха. Кроме того, образец мозга каждого животного был представлен в Институт Фридриха Леффлера для диагностики бешенства. Проводилось полное вскрытие каждой летучей мыши, все макроскопические находки, включая заражение эктопаразитами, были зафиксированы. Для гистопатологической экспертизы, небольшие кусочки ткани разных органов (легких, печени, сердца, почек, надпочечников, селезенки, кишечника, поджелудочной железы, головного мозга, языка, гортани, слюнных желез и грудных мышц) и ткани с явными патологическими изменениями фиксировали в 4% забуференном формалине, обрабатывали с использованием стандартных методов и заливали жидким 5

парафином. Секции были обрезаны по 2–5 мкм и окрашены по стандартной методике гематоксилин-эозином. Кроме того, специальные гистологические методы окраски были использованы в зависимости от микроскопических результатов, т.е. для обнаружения бактерий (окрашивание по Грамму и Гимзе), грибов (PAS-метод или окрашивание метенаминсеребром по методу Гомори-Грокотт), железа (окрашивание берлинской лазурью), минерализации (окрашивание Фон Косса), соединительной и коллагеновой тканей (трехцветное окрашивание) (Muhldorfer et al., 2011). Для бактериологического исследования образцы легких, печени, сердца и почек, а также тканей с заметными патологическими изменениями (например, ткани увеличенной селезенки) 430 летучих мышей наносились на Колумбийский агар (с добавлением 5% овечьей крови), шоколадный агар, агар Гасснера и агар МакКонки и инкубировались при 37°C (на шоколадном агаре с 5% CO2) в течение 24–48 ч. При необходимости для выделения иерсинии (Yersinia), сальмонеллы (Salmonella) и анаэробных бактерий были использованы специальные среды и условия. Первичная идентификация бактериальных штаммов была основана на морфологии колоний, гемолизе, окрашивании по Грамму и с помощью других методов. Окончательную идентификацию видов бактерий соответствующей коммерческой проводили тестовой системы с использованием Api (bioMe'rieux, Германия). При необходимости, для подтверждения результатов Api были проведены дополнительные стандартные биохимические тесты (Bisping, Amtsberg, 1988; Brenner et al., 2005). В случае неоднозначных результатов биохимических исследований, для окончательной идентификации проводили анализ генов 16S рРНК (Muhldorfer et al., 2011). Изоляты Сальмонеллы были охарактеризованы в Национальной справочной лаборатории по анализу и тестированию зоонозов в Федеральном институте оценки рисков (Берлин, Германия). 6

Для вирусологического исследования гомогенизированные ткани легких, печени, сердца, почках, селезенки, мозга и слюнных желез 210 летучих мышей были объединены для каждого животного индивидуально и использовались для РНК/ДНК-экстракции и последующего молекулярного исследования с помощью общих ПЦР анализов для обнаружения флави(Sanchez-Seco et al., 2005), ханта- (Klempa, 2006), корона- (de Souza Luna et al., 2007), А-вирусов гриппа (Spackman et al, 2002). Кроме того, были использованы ПЦР анализы, специфичные для 8 описанных ранее герпесвирусов европейских гладконосых летучих мышей (Wibbelt et al., 2007). Все исследованные летучие мыши принадлежали к 7 различным родам (т.е. Pipistrellus, Nyctalus, Myotis, Eptesicus, Plecotus, Vespertilio и Barbastella) и 19 европейским видам гладконосых летучих мышей. Три вида летучих мышей: малый нетопырь (P. pipistrellus, n = 138), рыжая вечерница (N. noctula, n = 92), и поздний кожан (Е. serotinus, n = 53) составляли около 60% всех трупов летучих мышей, исследованных в этой работе, в то время как P. pygmaeus, Nyctalus leisleri, Myotis brandtii, M. bechsteinii, M. dasycneme, Plecotus austriacus и Barbastella barbastellus были представлены в небольшом количестве, от 1 до 4 особей. В целом, установлена причина смерти для 70% исследованных летучих мышей (n = 304). Две трети смертей были обусловлены травмой (n = 145) или болезнью (n = 144), а почти 4% мышей умерли от других неинфекционных причин, таких как отек легких, обезвоживание и гипогликемия. В 30% (n = 129) не найдены существенные патологические изменения. У половины (50,9%) особей среди 145 травмированных летучих мышей отмечены дополнительные слабые (n = 42), средние (n = 28) и тяжелые (n = 4) воспалительные изменения органов, у 23% выявили бактериальные (n = 19) и/или паразитарные инфекции (n = 13). Из 144 летучих мышей, считающихся умершими от болезней, смертельные бактериальные (n = 54), вирусные (n = 7

5) и паразитарные инфекции (n = 2) наблюдались у 42% особей. Кроме того, у новорождѐнной рыжей вечерницы была отмечена аспирация амниотической жидкости, а молодой малый нетопырь был усыплен из-за серьѐзной деформации костей предплечья. У остальных летучих мышей (n = 81) выявлены средние и тяжелые патологические изменения неизвестной этиологии или неподтвержденной бактериальной или вирусной причины. Количество заболеваний в выборке летучих мышей постепенно уменьшается по мере взросления. Новорожденные и молодые особи обоих полов были значительно сильнее подвержены заболеваниям, чем взрослые. Также обнаружена существенная тенденция в смертности от болезни между самцами и самками, заключающаяся в том, что среди взрослых самок показатели заболеваемости более высокие (52.5%), чем среди самцов (36.4%). Не было обнаружено значительной связи между определѐнной причиной смерти (т. е. заболеванием или травмой) и тяжестью эндопаразитической инфекции. Сезонное распределение смертей от заболеваний описывается тримодольной (трѐхвершинной) диаграммой с пиками весной (в апреле), летом (в июне–августе) и зимой (в декабре). Доля травмированных особей также заметно увеличивается в течение летних месяцев, вплоть до периода «роения», но достаточно невысока в остальное время. 1.1. Результаты бактериологического исследования Около 90% (n = 430) образцов от летучих мышей исследовали на наличие бактериальных инфекций. Было идентифицировано 42 рода и более чем 53 вида бактерий. Преобладали такие бактерии, как Enterococcus faecalis (14.7%, n = 63), Hafnia alvei (11.2%, n = 48), Serratia liquefaciens (10%, n = 43), и Pasteurella multocida (7.7%, n = 29). В 37% (n = 157) у летучих мышей вообще не наблюдалось бактериального заражения. 8

У 17% исследованных летучих мышей сравнительный бактериологический и гистопатологический анализ выявил 22 вида бактерий, несомненно, связанных с повреждениями и/или общим заражением. Преобладающими бактериями, связанными с болезнями являлись представители семейства Pasteurellaceae (прежде всего P. multocida), энтеробактерии (различные виды бактерий) и Streptococcaceae (прежде всего, Enterococcus spp.). Больше половины (54,8%, N = 40) бактериальных инфекций наблюдалось у летучих мышей с травмами. Анализ показал слабую зависимость бактериального заражения от пола и возраста. Женские (21,9%) и взрослые (21,6%) особи показали чуть более высокую подверженность бактериальным заболеваниям по сравнению с мужскими (18,3%) и принадлежащими другим возрастным (15,6%) группам особями. Однако на бактериологические анализы заметно может заметно повлиять посмертное заселение животных бактериями, замораживание и хранение тушек летучих мышей, невозможность обнаружения определенных бактерий обычными методами культивирования, в результате чего некоторые виды бактерий, возможно, были не обнаружены. Обнаружена сильная взаимосвязь между кошачьим хищничеством и распространением бактериальной инфекции у летучих мышей, так как почти половина летучих мышей (44%), пойманных кошками, были заражены бактериальными заболеваниями. Различные бактерии могут передаваться через укусы кошек (Talan et al.,1999), следовательно, летучие мыши, на которых нападали кошки, вероятно, умерли от бактериального заражения, даже если у них не было опасных для жизни травм. Эта связь была доказана на примере заражениях европейских видов летучих мышей P. multocida (Simpson, 2000; Daffner, 2001; Muhldorfer et al.,2011). С другой стороны, летучие мыши, уже ослабленные болезнью, могут легче становиться жертвами хищников, таких как кошки. Следовательно, рукокрылые могут выступать в качестве переносчиков зоонотических патогенов, а домашние 9

кошки могут передать их человеку. Такие случаи межвидовой передачи заболевания от летучих мышей домашним животным уже были зарегистрированы (Li et al., 2005; Dacheux et al., 2009). 1.2. Результаты вирусологического исследования Тестирование на зоонозные вирусы, патогенные для человека, не показало положительных результатов для вируса гриппа А, корона -, флавии хантавирусов. Ингибирование ПЦР реакции не было зарегистрировано. Из 486 летучих мышей, прошедших исследование на заражение бешенством, у 2 поздних кожанов (E. serotinus) тесты подтвердили наличие лиссавирусов. Идентификация с использованием моноклональных антител и секвенирования показала, что это лиссавирус европейских летучих мышей 1го типа (EBLV–1). Специфический для герпесвирусов летучих мышей ПЦР-анализ показал, что 63 из 210 летучих мышей инфицированы 7 из 8 описанных ранее герпесвирусов. Наблюдалась высокая распространенность гамма-герпесвируса летучих мышей 6 типа (BatGHV6, 65% (24/37)) у малого нетопыря, гаммагерпесвируса 5 типа (BatGHV5, 42,1%) у нетопыря Натузиуса и гаммагерпесвируса 4 типа (BatGHV4, 33,8%) у рыжей вечерницы. Коинфекция с другими герпесвирусами рукокрылых была выявлена у 4 рыжих вечерниц (7,4%), инфицированных гамма-герпесвирусами 3 и 4 типов (BatGHV3 и BatGHV4), и у 1 рыжей вечерницы (1,5%), инфицированной гаммагерпесвирусами 4 и 5 типов (BatGHV4 и BatGHV5). BatGHV5 был обнаружен не только у его изначального хозяина нетопыря Натузиуса, но и у 3 других видов летучих мышей, т.е. у рыжей вечерницы, большой ночницы и усатой ночницы. Хотя распространѐнность BatGHV3 (13,0%) и BatGHV4 (33,8%) сильно варьировала в пределах перелѐтного вида, разницы между полами в 10

распространѐнности вирусов у рыжей вечерницы не наблюдалось. Были найдены две молодые рыжие вечерницы, зараженные BatGHV4. 1.3. Результаты паразитологического исследования Эктопаразиты (клещи, блохи и клещи) были отмечены у 14% (n = 62) летучих мышей. Однако следует принимать во внимание возможные различия в численности эктопаразитов, собранных с трупов животных по сравнению с количеством эктопаразитов на живых особях. Самки летучих мышей (17,1%) были несколько больше заражены паразитами, чем самцы(14,7%), причем в разных возрастных группах распространенность эктопаразитов был практически одинаковой. Выявлены существенные видоспецифичные различия в заражении эктопаразитами. У большинства видов летучих мышей выявлена низкая распространенность эктопаразитов (диапазон 5,3– 11,8%), а почти 43% (n = 20) рыжих вечерниц были сильно заражены клещами и/или блохами. Микроскопический анализ тканей органов выявил у 29% (n = 124) исследуемых летучих мышей эндопаразитическую инфекцию, включая различных простейших паразитов (семейства Eimeriidae и Sarcocystidae) и гельминтов (трематод, цестод и нематод). Гельминты были обнаружены преимущественно в желудочно-кишечном тракте летучих мышей, а у некоторых животных наблюдались гранулематозные поражения органов, вызванные миграцией личинок разных видов нематод. Распространенность эндопаразитической инфекции среди исследованных летучих мышей существенно увеличивается по мере взросления, однако скорость распространения среди особей первого года жизни выше (8,5%), чем среди особей других возрастных групп (4,5%). Незначительные различия наблюдались между полами. Среди самок эндопаразиты распространены выше (30,4%), чем среди самцов (24,4%). Что касается конкретных видовых различий, среди крупных летучих мышей, 11

таких как рыжая вечерница, поздний кожан и двухцветный кожан выявлена более высокая распространенность эндопаразитов по сравнению с особями средних или мелких видов семейства Гладконосые. 1.4. Причины смерти и динамика заболеваний летучих мышей Травмы и болезни являются наиболее частыми причинами смерти летучих мышей в Германии, в отличие от предыдущих исследований (Simpson, 2000; Daffner, 2001; Duignan et al., 2003), где смертность, связанная с болезнями, обычно играет лишь второстепенную роль. Молодые летучие мыши и взрослые самки оказались значительно более подвержены болезням. Данное предположение подтверждается отчетливым увеличением смертности от заболеваний летучих мышей этих категорий с июня по август, что соответствует периоду беременности и родам у видов рукокрылых Центральной Европы. Подобные сезонные модели также были описаны для паразитарных (Christe et al., 2000; Zahn, Rupp, 2004; Lucan, 2006; Christe et al., 2007) и вирусных инфекций (Gloza-Rausch et al., 2008; Plowright et al., 2008; George et al., 2011). Увеличение случаев смертей в связи с травмами с июля по октябрь совпадает с 4 моделями поведенческой активности европейских видов летучих мышей (то есть, отлучением от матери, спариванием, накоплением жира перед зимней спячкой и миграциями) (Ciechanowsky et al., 2010). Следовательно, данная активность может приводить мышей к смертельным травмам. Дополнительные сезонные пики отражают смертность от заболеваний в начале зимовки летучих мышей умеренных широт и после зимней спячки. В настоящее время накоплено недостаточно знаний в области иммунологии летучих мышей. Для других видов млекопитающих известно, что спячка снижает иммунитет. Таким образом, возрастает риск инфицирования для зимующих летучих мышей (Bouma et al., 2010). В начале зимовки большие скопления летучих мышей из разных колоний могут стать причиной распространения инфекции. Смертность от заболеваний после 12

зимовки предположительно увеличивается из-за снижения иммунитета в связи с длительным голоданием во время зимовки. Бешенство летучих мышей является единственным зоонозом в Европе, который передаѐтся этими животными и, как известно, вызывает заболевание у человека (Johnson et al., 2010). В отличие от других млекопитающих, у которых лиссавирусы в конечном итоге вызывают смерть, у летучих мышей они могут привести к развитию иммунитета (George et al., 2011). Обнаружение лиссавируса европейских летучих мышей 1-го типа (EBLV–1) подтверждает результаты предыдущих исследований, согласно которым этот вирус распространяется среди поздних кожанов (Muller et al., 2007). В Германии причинами бешенства являются также лиссавирус европейских летучих мышей 2-го типа (EBLV–2), распространѐнный среди водяной ночницы и прудовой ночницы, и Bokeloh Bat Lyssavirus (BBLV) (Freuling et al.,2008; Freuling et al., 2011), недавно обнаруженный у ночницы Наттерера (Kuzmin, Rupprecht, 2007). Несомненное отсутствие EBLV–2 и BBLV в исследованных образцах, вероятно, связано с тем, что лиссавирусные инфекции имеют очень низкий уровень распространѐнности в популяции летучих мышей (Muller et al., 2007), и с тем, что размер выборки сильно ограничен, особенно в отношении соответствующих видов. Среди различных насекомоядных видов летучих мышей в Германии широко распространены герпесвирусы. Многие герпесвирусы, описанные ранее, были в небольших количествах обнаружены более чем у одного вида летучих мышей. В данном исследовании наблюдалась высокая видоспецифичность в распространении герпесвирусов среди летучих мышей. Это свидетельствует о том, что определенный тип герпесвирусов европейских летучих мышей связан преимущественно с одним видом. Герпесвирусы млекопитающих обладают видовой специфичностью. Однако перекрытие ареалов и тесные контакты между видами могут привести к межвидовой передаче вируса. Это помогает объяснить наблюдаемое 13

преодоление видового барьера, как, например, при исследовании BatGHV5 (Wibbelt et al., 2007). Согласно результатам данного исследования, некоторые виды летучих мышей (т.е. рыжая вечерница, малый нетопырь и нетопырь Натузиуса) более восприимчивы к герпесвирусам. У рыжей вечерницы были обнаружены 3 различных гаммагерпесвируса (BatGHV3, 4, 5). Заражение паразитами в дикой природе часто происходит без клинических проявлений. Однако тяжелая инфекция может снизить жизнеспособность организма или его репродуктивные возможности (Hart, 1992). Большинство данных о динамике заражения летучих мышей поступило из паразитологических исследований, опирающихся на единичные и сезонных колебания в распространенности эктопаразитов (ter Hofstede, Fenton, 2005; Zahn, Rupp, 2004; Lucan, 2006; Christe, et al., 2007;). Плотность популяции и стили поведения кажутся важными факторами, объясняющими степень индивидуального и видоспецифического заражения паразитами летучих мышей (Zahn, Rupp, 2004; Lucan, 2006; Christe, et al., 2007). Высокая зараженность паразитами самок различных видов европейских гладконосов, скорее всего, связана с их физиологией и с отличиями в поведении во время ночевок (Christe et al., 2000; Lucan, 2006). Также обнаружены видоспецифические сезонные колебания в инвазии эктопаразитами. Зараженность рыжей вечерницы и водяной вечерницы эктопаразитами весной и осенью более высокая по сравнению с сезоном размножения (Zahn, Rupp, 2004). Летучие мыши, такие как рыжая вечерница (43%) и водяная ночница (25%), гнездившиеся преимущественно в деревьях или скворечниках, заражены эктопаразитами сильнее, по сравнению с другими изученными видами (диапазон 5–12%). Высокая зараженность эктопаразитами, как правило, были описана у летучих мышей, предпочитающих закрытые насесты, например, норы (ter Hofstede, Fenton, 2005; Patterson et al., 2007). Предполагается, что структурные характеристики и микроклимат таких 14

ночевок оказывают влияние на выживаемость эктопаразитов и вызывают повторное заражение летучих мышей. В отличие от этих результатов, распространенность эндопаразитов среди европейских гладконосых летучих мышей, предположительно коррелирует с размером тела вида (Muhldorfer et al., 2011). Видоспецифичные различия в питании и пищевых предпочтениях могут влиять на распространѐнность эндопаразитов среди насекомоядных летучих мышей (Johnson et al., 2010), так как более крупные летучие мыши питаются насекомыми более широкого диапазона размеров (Aguirre et al., 2003; Feldhamer et al., 2009). Это предположение подтверждается гораздо более высокими показателями зараженности эндопаразитами взрослых летучих мышей по сравнению с новорождѐнными и молодыми, питающимися молоком. 1.4.1. Синдром Белого Носа у летучих мышей Одной из распространѐнных причин смерти летучих мышей является так называемый Синдром Белого Носа, впервые задокументированный в Нью-Йорке зимой 2006–2007. Эта недавно появившаяся в Северной Америке грибковая болезнь летучих мышей за 4 года привела к их беспрецедентной гибели на северо-востоке США (Wibbelt, Kurth, et al., 2010). От СБН погибли около 7 млн. летучих мышей. Больные и мертвые летучие мыши были найдены в окрестностях пещер и шахт. В некоторых местах зимовок погибло от 90 до 100% населения (https://www.whitenosesyndrome.org). Название заболевания происходит от внешнего вида пораженных летучих мышей, которые имеют белый грибок, растущий на их мордочках, ушах и крыльях. Изначально грибок, вызывающий заболевание, был классифицирован как Geomyces destructans. Однако дальнейшие исследования последовательности его ДНК привели к реклассификации. Ученые выяснили, что Geomyces destructans следует перенести из семейства Myxotrichaceae в 15

семейство Pseudeurotiaceae. Кроме того, они также обнаружили, что Geomyces, Gymnostellatospora и Pseudogymnoascus являются отдельными родами семейства Pseudeurotiaceae. Таким образом, на данный момент грибок, вызывающий заболевание, называется Pseudogymnoascus destructans. Зимующие летучие мыши, зараженные СБН, характеризуются всеми следующими признаками или некоторыми из них: • Белый грибковый налѐт на носу, ушах и мембранах крыльев; • Истощение жировых запасов из-за частых пробуждений во время зимовок задолго до положенного времени; • Нарушение иммунитета во время спячки; • Повреждения или рубцевания крыльев; • Необычное поведение (www.batcon.org). Причины смерти мышей до сих пор не доказаны, но вероятно, что грибок P. destructans раздражает мышей, вызывая их пробуждение во время спячки и сжигание накопленных запасов энергии. Поскольку в это время отсутствуют насекомые для питания летучих мышей, они погибают от голодания. P. destructans, будучи универсальным заражать любые мышей, определѐнных условиях, патогеном, а может виды летучих зимующих при микроклиматических экологические и эволюционные различия зимующих животных не являются барьером. Психрофильный (холодолюбивый) гриб, P. destructans (рис. 1), был неоднократно взят от летучих мышей, которые обладали 16 Рис. 1. Электронная микрофотография конидий P. destructans.

признаками СБН, включая колонизацию кожи грибковыми гифами, вызывающими характерные эпидермальные эрозии и язвы, которые могут прогрессировать и поражать соединительные ткани (Wibbelt, Kurth, et al, 2010). Оптимальная температура для его роста 5–10 ° C, при температуре выше 24° C грибок не развивается (Puechmaille et al., 2011). Как предполагают исследователи, цикл развития грибка длится около 180–200 дней, о чем свидетельствует массовая гибель летучих мышей в начале весны, через 205 дней после ухода в спячку. Спячка летучих мышей, характеризующаяся длительными циклами глубокого оцепенения и периодическими пробуждениями, является выгодной стратегией для максимизации выживаемости в суровых погодных условиях, при нехватке продовольствия и воды. Во время спячки иммунная функция и метаболизм резко снижаются, что сопровождается падением температуры тела. В дополнение к физиологическим изменениям, у различных видов летучих мышей выработались разнообразные стратегии поведения для максимизации выживания во время спячки. Например, выбор влажных зон для спячки (обычно с относительной влажностью 60–100%) или зимовка плотными группами для экономии энергии и уменьшения потери влаги. Такое поведение увеличивает вероятность и скорость заражения грибком, создает благоприятные условия для прорастания конидий и дальнейшего развития гиф P. destructans. Риск заражения возрастает при контакте с людьми, которые могут быть переносчиками паразита. Всѐ это делает спящую летучую мышь наиболее подходящим для P. destructans хозяином, который обеспечивает питательные вещества и идеальные условия для развития, при этом практически не оказывая сопротивления. Начиная с обнаружения в феврале 2006 в популярной туристической пещере около Олбани (Нью-Йорк, США) СБН распространился более чем на 1,300 км в Коннектикут, Массачусетс, Нью-Хэмпшир, Нью-Джерси, 17

Пенсильванию, Теннесси, Вермонт, Вирджинию и Западную Вирджинию в Соединенных Штатах и области Онтарио и Квебека в Канаде (рис. 2). Дальнейшее распространение болезни также оказалось неизбежным. И к 2017 году территория распространения заболевания значительно увеличилась. В 2017 году P. destructans был обнаружен в штате Вашингтон, примерно за 2 тысячи километров от места его предыдущих находок. Рис. 2. Распространение СБН в Северной Америке на 2017 год. До того как СБН был описан в Северной Америке, есть сообщения начала 1980-х о неоднократном наблюдении белого грибка на мордочках летучих мышей в Германии. Это вызвало предположение, что источник распространения болезни – Европа. Однако эти летучие мыши не имели всех характеристик СБН, например, не было смертельных случаев. Кроме того, гриб не был идентифицирован (Wibbelt, Kurth, et al., 2010). Следует заметить, что другие грибки были идентифицированы на летучих мышах в различных странах Европы, и наблюдение мышей с "белым носом" не обязательно означает, что они поражены P. destructans. В связи с 18

СБН в Северной Америке, европейские исследователи зимой 2008–2009 гг. начали наблюдения за грибковыми инфекциями зимующих летучих мышей в Европе, сходными с СБН. Патоген, вызывающий СБН, Р. destructans, был зафиксирован у летучих мышей в ряде Европейских стран: Франции, Австрии, Бельгии, Чешской Республике, Дании, Эстонии, Нидерландах, Польше, Румынии, Словакии (Puechmaille et al., 2010; Martinkova et al. 2010; Wibbelt, Kurth, et al., 2010), Швейцарии, Турции, Украине, Венгрии, Германии (Turner, Reeder, 2009). Для оценки распространения СБН а Палеарктике между 2012 и 2014, были взяты пробы от 481 летучих мышей (15 видов) из 20 мест в Словении, Чехии, Латвии и России. Зараженные летучие мыши разных видов были найдены на всех участках, включая Западно-Сибирскую равнину России (рис.3). У обыкновенного длиннокрыла (Miniopterus schreibersii) и южного подковоноса (Rhinolophus euryale) P. destructans был найден впервые. На исследуемой территории Палеарктики степень грибкового заражения отличались на разных территориях. Различные виды также подвергались заражению неодинаково. Массовой гибели летучих мышей от этого заболевания не наблюдалось, хотя распространѐнность зверьков с СБН Рис. 3. Грибок P. destructans на зимующей M. dasycneme. Фото сделано на месте зимовки около Екатеринбурга (Pikula, 2014). достигает в Палеарктике Тяжесть грибкового 100%. заражения увеличивается с продвижением на север и запад, а также в районах, где 19

на месте зимовки преобладают филогенетически близкородственные виды. Самые высокие показатели количества и тяжести заражений P. destructans наблюдались в Чехии, самые низкие – в Словении. Относительно наличия гриба в Европе существует 3 версии. Первая версия заключается в том, что P. destructans только недавно появился в Европе, и летучие мыши сейчас под угрозой заражения. Таким образом, нужно принять меры по их защите, минимизировать распространение заболевания. Согласно второй версии, грибок находится в Европе в течение длительного времени. Так как массовой гибели летучих мышей в Европе не наблюдается, скорее всего, они обладают иммунитетом к СБН. Причины его формирования могут быть как генетическими, как и биохимическими. Раскрытие механизмов этого иммунитета будет способствовать пониманию болезни и поможет в разработке способа защиты от нее. Согласно третьей версии, P. destructans не является основной причиной смерти, а действует на летучих мышей с уже ослабленным другим патогеном иммунитетом (Puechmaille et al , 2010). 20

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Сбор материала проводился в национальном парке «Самарская Лука». Область проведения исследования состояла из 8 штолен: Попова, Верблюд, Бурлак, СХТ-1, СХТ-2, СХТ-3, СХТ-4, СХТ-5, расположенных в окрестностях посѐлка Ширяево Ставропольского района Самарской области (рис.4). Учет летучих мышей и сбор материала проводили по всей площади подземелий в ноябре–декабре 2014–2017 годов. Рис. 4. Карта Самарской Луки и схема расположения гор Бурлак, Попова (включая штольни СХТ) и Верблюд. Общая протяженность всех пещер составляет около 30 километров. Каждая пещера была посещена нами не менее 4 раз. Таким образом, за 4 сезона исследования пройдено в общей сложности около 120 километров. У найденных в 2015 и 2017 годах животных учитывалось время смерти. Старые, истлевшие трупы относили к концу зимовок 2014 и 2016 годов (рис. 21

5), а свежие, хорошо сохранившиеся – к началу зимовок 2015 и 2017 годов соответственно (рис. 6). Рис. 5. Трупы летучей мыши и полевки, умерших в конце зимовки 2014 г. Рис. 6. Труп бурого ушана, умершего в начале зимовки 2015 г. В 2015 году в залах, где были найдены мертвые животные, измерялась температура воздуха и пола, а также влажность воздуха. Это сделано для выявления зависимости между смертностью животных и микроклиматом подземелий. Под смертностью мы понимаем отношение погибших летучих мышей каждого вида к общему числу учтенных живых и мертвых животных данного вида. Выявление зависимости величины смертности от микроклиматических параметров проводилось в программе Statistica for Windows 6.0 по алгоритму множественной линейной регрессии. Трупы летучих мышей собирали не только с пола, но также из углублений в стенах и потолке. Поиск и сбор осуществлялся группами, 22

состоящими из 2–3 человек. Подробно осматривали все поверхности штолен на протяжении всего маршрута учетов. В тех случаях, когда труп сохранился плохо, для определения видовой принадлежности аккуратно извлекали или отделяли череп от тушки и помещали в герметичный пакет для транспортировки и идентификации в лабораторных условиях. Для очистки от оставшихся тканей череп помещали в металлическую банку с водой и вываривали, затем тщательно очищали. Информация о найденных с 2004 года мертвых летучих мышах заносилась в электронную базу данных с указанием даты нахождения погибшего животного и его состояния, а также информации о видовой принадлежности и месте нахождения. Работа проводилась с использованием программы Microsoft Excel (рис.7). В марте с целью выявления зараженности грибком P. destructans, вызывающим Синдром Белого Носа, проводился дополнительный осмотр зимующих рукокрылых. Рис. 7. Первая страница электронной базы данных по находкам погибших животных на местах зимовок в искусственных подземельях Самарской Луки с использованием программы Microsoft Excel. 23

ГЛАВА 3 МИКРОКЛИМАТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ИСКУССТВЕННЫХ ПОДЗЕМЕЛИЙ САМАРСКОЙ ЛУКИ Выбор мест зимовки рукокрылыми обусловлен спецификой микроклимата подземелья. Во всех исследованных штольнях отличались показатели относительной влажности и температуры воздуха. Одним из важнейших условий благополучной зимовки является относительная влажность воздуха в убежище. В большинстве обследованных нами подземелий, она была высокой и изменялась в средних и глубоких участках штолен от 60% до 97%. Низкая влажность воздуха отмечена зимой в некоторых залах крупных подземелий, а также во всех залах мелких штолен. Растительность и рельеф местности также играют важную роль, поскольку летучие мыши нуждаются в защищѐнном входе в убежище. Самые небольшие по площади штольни: СХТ-2, СХТ-3, СХТ-5, отличаются от других подземелий низкими значениями температуры и влажности. Температура воздуха в СХТ-2 колеблется в пределах 2°С, максимальная достигает 3.2°С, а относительная влажность не поднимается выше 70%. Температура воздуха в СХТ-3 несколько выше, в глубине пещеры она достигает 4°С, а максимальная влажность составила 86.6%. СХТ-5 близка по температурным показателям к СХТ-3, температура воздуха в ней колеблется около 4°С, но относительная влажность не превышает 76%. Штольня СХТ-4 отличалась от остальных подземелий самыми высокими показателями влажности, которая не опускалась ниже 80%. Температура воздуха в близких ко входу залах колебалась в интервале 2.5°С, но по мере продвижения вглубь подземелья становилась ближе к 4°С. Большая по площади штольня СХТ-1, имеет несколько отличные микроклиматические условия. В привходовых залах температура не 24

поднимается выше 2°С, при продвижении вглубь пещеры и в центральных залах температура воздуха колеблется в интервале от 2°С до 4°С, и в самых удалѐнных от входа залах была зафиксирована максимальная температура 7.7°С. Относительная влажность воздуха на протяжении всей пещеры возрастала от 74.5% до 89%. Самые крупные по площади штольни гор Верблюд, Бурлак и Попова имеют большое количество залов с различными микроклиматическими условиями. В штольне горы Верблюд, в залах близких ко входам, температура воздуха опускалась ниже 0°С, по мере продвижения к центру и в глубь подземелья температурные показатели принимали значения от –1.5°С до 3.5°С, и в самых дальних залах температура достигала 6°С. Относительная влажность воздуха изменялась в интервале от 63% у входа до 95% в глубине пещеры. Штольня горы Бурлак отличается невысокими показателями температуры воздуха, в большинстве залов она колеблется в интервале от 2°С до 4.5°С, в привходовых же она опускалась до –2°С, и только самые удаленные от входов залы имеют температуру воздуха выше 5°С. Колебания относительной влажности воздуха также значительны. У входа минимальное значение влажности составило 46%, в центральных залах она колебались от 75% до 88%, и ни в одном из залов не зафиксирована влажность, превышающая 90%. Штольня горы Попова характеризуется самой большой площадью. С целью выяснения условий зимовки штольня условно была разделена нами на 3 примерно равные по площади зоны – А, В и С (рис. 8). В основу такого деления были положены два критерия – удаленность от входа и разница в микроклиматических показателях. Так, зона А – это привходовая часть штольни, поэтому в течение зимы она наиболее сильно подвержена воздействию изменяющихся погодных условий. Температура воздуха в этой зоне изменяется пределах от –6.3°С до 2.6°С, а относительная 25

влажность от 49% до 95%. Зона В – средняя часть, где действия внешних факторов не так сильно ощутимы, как в зоне А. В некоторых ее залах (расположенных против входов) в очень холодные зимы температура опускается ниже нуля, вплоть до –3.7°С, а так же местами чувствуется тяга воздуха. Относительная влажность изменяется в пределах от 63% до 92% (в завалах). Наконец, зона С, самая удаленная от входа область подземелья, была разделена еще на два участка. Первый (С1) расположен в юговосточной части подземелья, где по периметру местами встречаются крупные обрушения стен и сводов, а температура воздуха колеблется от 1.6°С до 5.9°С. Второй участок (С2) юго-западный. Температура воздуха здесь в среднем несколько ниже и находится в пределах от 1.6°С до 3.6°С, но как и на участке C1 постоянна на протяжении всего зимнего периода. Относительная влажность воздуха на обоих участках не опускается ниже 75%, а максимальная влажность составила 97%. А Б Рис. 8. План-схема штольни Попова и распределение показателей относительной влажности (А) и температуры (Б) воздуха по пространству подземелья. А, В, С1, С2 – зоны подземелья; 1–8 – номера входов в подземелье. 26

Рукокрылые предпочитают использовать пещерные системы, в которых существует определѐнный поток воздуха, проходящий через всю систему или ее часть, и где, следовательно, имеется разнообразие температурных условий. Такие системы называются динамическими. На зимовке у каждого вида также существуют свои температурные предпочтения. В таких системах как тупиковые туннели или горизонтальные ходы, где преобладают конвекционные потоки воздуха, размер, конфигурация и строение поверхности подземелья в значительной степени могут оказывать влияние на внутреннюю температуру. Летом, когда внешняя температура выше температуры в подземелье, тѐплый воздух, поступающий в него, охлаждается, становится плотнее и опускается вниз (рис. 9). Зимой, наоборот, холодный воздух затекает в пещеру по нижним слоям, а нагретый и менее плотный воздух оказывается наверху. В связи с этим ниши и углубления в потолке могут аккумулировать тѐплый воздух, а холодный воздух может скапливаться на участках, расположенных ниже уровня входного отверстия. Благодаря этому, летучие мыши так часто используют углубления в качестве укрытий во время зимовок. Рис. 9. Схема движения потока воздуха в подземелье. Наибольшее движение воздуха наблюдается в привходовой части подземелья и в центральной. Здесь конвекция «всасывает» тѐплый воздух 27

летом, а зимой – холодный, распределяя его далее по глубине и по высоте пещеры. Рукокрылые могут использовать подземные убежища на всех стадиях своего годового цикла. В северной и средней Европе, где среднегодовые температуры низки, летучие мыши используют эти убежища преимущественно для зимовки (Митчелл-Джонс А. Дж., Бихари З. и др., 2011). 28

ГЛАВА 4 ЧИСЛЕННОСТЬ РУКОКРЫЛЫХ И ИХ ПОКАЗАТЕЛИ СМЕРТНОСТИ В МЕСТАХ МАССОВЫХ ЗИМОВОК 4.1. Видовой состав и численность За 2014 – 2017 годы было учтено около 121 852 особи, относящихся к 7 зимующим в пределах исследованного региона видам рукокрылых: ночница Наттерера, усатая ночница, ночница Брандта, водяная ночница, прудовая ночница, бурый ушан, северный кожанок. Все выше указанные виды относятся к семейству гладконосых летучих мышей (Vespertilionidae). Из общего числа зимующих в штольнях животных в 2014 году было учтено 29 618 особей, в 2015 году –28 812 особей, в 2016 году – 31 563 особи, а в 2017 году – 31 859 особей. По общему количеству учтенных особей на зимовках 2014–2017 гг. лидирующее положение занимает ночница Брандта (табл. 1). Таблица 1. Состав видов и численность зимующих в 2014–17 гг. рукокрылых в штольнях Самарской Луки. Число особей Штольня Ночница Усатая Ночница Водяная Прудовая Бурый Северный Наттерера ночница Брандта ночница ночница ушан кожанок 222 4333 264 577 133 491 369 СХТ-I СХТ-II 1 1 0 0 0 0 1 СХТ-III 24 38 0 20 18 19 15 СХТ-IV 87 258 769 158 189 121 17 СХТ-V 1 6 0 4 1 8 15 Бурлак 135 2126 2850 1404 3633 2153 703 Верблюд 213 213 2397 2560 6493 4392 347 Попова 2019 19434 44114 4145 4927 7786 1648 Всего 2702 26409 50394 8868 15394 14970 3115 Остальные виды представлены значительно меньшим числом особей. В порядке убывания численности после ночницы Брандта следуют усатая 29

ночница, прудовая ночница, бурый ушан, и водяная ночница. Довольно малочисленными видами можно считать северного кожанка и ночницу Наттерера. Самым многочисленным видом на зимовках 2014–2015 гг. в искусственных подземельях Самарской Луки является ночница Брандта (табл. 2). Этому виду значительно уступает усатая ночница. Далее в порядке убывания численности следуют бурый ушан, прудовая ночница и водяная ночница. Малочисленными являются северный кожанок и ночница Наттерера. Таблица 2. Состав видов и численность зимующих в 2014–15г (декабрь) рукокрылых в штольнях Самарской Луки. Число особей Штольня Ночница Усатая Ночница Водяная Прудовая Бурый Северный Наттерера ночница Брандта ночница ночница ушан кожанок 63 1 036 24 108 25 136 106 СХТ-I СХТ-II 0 0 0 0 0 0 1 СХТ-III 6 7 0 5 2 6 4 СХТ-IV 25 83 190 38 42 43 8 СХТ-V 1 1 0 1 0 0 5 Бурлак 35 462 655 288 685 512 210 Верблюд 45 92 591 527 1 501 1245 89 Попова 550 5 818 9 567 1 037 1 248 1 968 527 Всего 725 7 499 11 027 2 004 3 503 3 910 950 Аналогичная ситуация наблюдается на зимовках 2015–2016 гг. в искусственных подземельях Самарской Луки (табл. 3). Самым многочисленным видом также является ночница Брандта. Далее следуют усатая ночница, бурый ушан, прудовая ночница и водяная ночница. Малочисленными являются северный кожанок и ночница Наттерера. В целом, на зимовках 2015–1016 гг. учтено меньше особей, чем на зимовках 2014–2015 гг. Однако незначительное. 30 общее снижение численности

Таблица 3. Состав видов и численность зимующих в 2015–16 (декабрь) рукокрылых в штольнях Самарской Луки. Число особей Усатая Ночница Водяная Прудовая Бурый Северный Штольня Ночница Наттерера ночница Брандта ночница ночница ушан кожанок 54 1043 24 150 36 130 90 СХТ-I СХТ-II 0 0 0 0 0 0 0 СХТ-III 6 16 0 7 6 5 5 СХТ-IV 25 88 249 49 37 38 6 СХТ-V 0 4 0 1 0 3 3 Бурлак 56 422 776 474 902 604 229 Верблюд 46 71 464 699 1 298 1 117 115 Попова 490 4 369 10 264 1 145 985 1 793 418 Всего 677 6 013 11 777 2 525 3 264 3 690 866 На зимовке 2016–2017 гг. количество зимующих ночниц Брандта значительно увеличивается (табл. 4). Этот вид остается по-прежнему лидирующим по количеству особей в штольнях. Далее в порядке сокращения численности следуют усатая ночница, бурый ушан, прудовая ночница и водяная ночница. Самый малочисленный вид – ночница Наттерера. К малочисленным относится также северный кожанок. Таблица 4. Состав видов и численность зимующих в 2016–17 (декабрь) рукокрылых в штольнях Самарской Луки. Число особей Штольня Ночница Усатая Ночница Водяная Прудовая Бурый Северный Наттерера ночница Брандта ночница ночница ушан кожанок 55 1018 96 146 41 93 93 СХТ-I СХТ-II 1 0 0 0 0 0 0 СХТ-III 4 5 0 4 6 2 5 СХТ-IV 13 28 31 41 50 15 2 СХТ-V 0 1 0 2 1 3 4 Бурлак 21 1025 800 381 1097 519 162 Верблюд 58 25 789 559 1851 1 002 80 Попова 476 4 452 11973 1 052 1332 1 772 377 Всего 628 6 554 13689 2 185 4378 3 406 723 31

На зимовке 2017–2018 гг. соотношение видов также почти не меняется (табл. 5). Самый многочисленный вид – ночница Брандта. Далее в порядке уменьшения численности следуют усатая и прудовая ночницы, бурый ушан и водяная ночница. Одним их малочисленный является ночница Наттерера. Наиболее редко на этой зимовке встречается северный кожанок. Количество зимующих животных этого вида на последние 4 года уменьшилось почти вдвое. Таблица 5. Состав видов и численность зимующих в 2017–18 (декабрь) рукокрылых в штольнях Самарской Луки. Число особей Штольня Ночница Усатая Ночница Водяная Прудовая Бурый Северный Наттерера ночница Брандта ночница ночница ушан кожанок 50 1236 120 173 31 132 80 СХТ-I СХТ-II 0 1 0 0 0 0 0 СХТ-III 8 10 0 4 4 6 1 СХТ-IV 24 59 299 30 60 25 1 СХТ-V 0 0 0 0 0 2 3 Бурлак 23 217 619 261 949 518 102 Верблюд 64 25 553 775 1843 1028 63 Попова 503 4795 12310 911 1362 2253 326 Всего 672 6343 13901 2154 4249 3964 576 Однако, несмотря на сокращение численности летучих мышей некоторых видов, за последние 2 года наблюдается общий рост численности зимующих в штольнях рукокрылых. 4.2. Показатели смертности летучих мышей на зимовках За 2014–2017 годы исследования были найдены 162 погибших летучих мыши, принадлежащие к 7 указанным выше видам семейства гладконосые. Из них в штольнях г. Попова собрано 102 трупа, Верблюд – 9, Бурлак –31, СХТ-1 – 20. В 2014 году собрано 80 трупов, в 2015– 60 трупов. В 2017 году было найдено всего 22 трупа. В штольнях СХТ-2, СХТ-3, СХТ-4 и СХТ-5 за 32

эти годы мѐртвых летучих мышей не найдено. В 2014 году не найдено также трупов в подземельях г. Верблюд, в 2017 году – в СХТ-1. Все найденные погибшие летучие мыши внесены в электронную базу данных. В неѐ вошли животные, обнаруженные не только в указанные годы, но также и находки за 2004 и 2005 годы. Оценка уровня смертности показала, что в целом для всего зимующего населения он оказался относительно низким (рис. 10). В 2014 году уровень смертности была чуть выше, чем в 2015. Самый низкий уровень смертности мы наблюдали в 2017 году. Такой низкий показатель, как мы полагаем, не должен оказывать существенного влияния на состояние всего зимующего населения этих животных. Рис. 10. Уровень смертности рукокрылых в 2014, 2015 и 2017 гг. в подземельях «Самарской Луки». Однако уровень смертности у отдельных видов оказался неоднозначным. Анализ уровня смертности у отдельных видов показал, что в 2014 году самые наибольшие значения были характерны для северного кожанка, у которого она близка к 1%, и ночницы Наттерера (рис. 11). Эти виды на 33

зимовках самые малочисленные. Далее в порядке снижения уровня смертности идут бурый ушан, водяная ночница, усатая ночница и прудовая ночница. Самая низкая смертность выявлена у самого многочисленного вида, ночницы Брандта. Рис. 11. Уровень смертности рукокрылых разных видов в 2014 году в подземельях «Самарской Луки». Сходная ситуация наблюдалась и на зимовках в 2015 года (рис. 12). Самый высокий уровень смертности зафиксирован у самого малочисленного вида, северного кожанка, а самый низкий – опять же таки у самого многочисленного вида, ночницы Брандта. По сравнению с 2014 годом, уровень смертности этих видов заметно снизился. В целом, в 2017 году видовые показатели смертности довольно низкие (рис. 13). Самый высокий уровень смертности 0,3% зафиксирован у одного из малочисленных видов – ночницы Наттерера. Самая низкая смертность снова выявлена у самого многочисленного вида, ночницы Брандта. Уровень смертности остальных видов колеблется от 0,08 до 0,19 % 34

Рис. 12. Уровень смертности рукокрылых разных видов в 2015 году в подземельях «Самарской Луки». Рис. 13. Уровень смертности рукокрылых разных видов в 2017 году в подземельях «Самарской Луки». Показатели смертности различаются не только в зависимости от видовой принадлежности животных, но и от места исследования. Это, вероятно, обусловлено тем, что микроклимат отдельных мест зимовок может 35

оказаться благоприятным для одних видов, а может быть угнетающим или даже летальным для других. Уровень смертности видов в 2014 году в разных местах зимовки колеблется от 0 до 4% (рис. 14). Однако случаи, когда он превышает 1%, довольно редки. Самая высокая смертность отмечена у ночницы Брандта в штольне СХТ-1. Этот вид в данной пещере являлся самым малочисленным. Чуть ниже смертность наблюдалась у северного кожанка и водяной ночницы в штольнях Бурлак и СХТ-1, соответственно. У остальных видов она не превышала 1%. В штольне СХТ-1 не найдены погибшими северные кожанки, ночницы прудовая и Наттерера, бурые ушаны, а в штольне Бурлак также ночницы Наттерера. Рис. 14. Уровень смертности рукокрылых разных видов в 2014 году в штольнях г. Попова, Бурлак и СХТ-1. Уровень смертности в 2015 году в целом оказался ниже и колебался от 0 до 1,92% (рис. 15). Наиболее высокая смертность, как и в 2014 г., отмечена в штольне СХТ-1 у ночниц водяной и Брандта, а также еще и у бурого ушана. Чуть ниже уровень смертности был у северного кожанка в штольнях г. Попова, прудовой ночницы в штольнях г. Бурлак и у усатой ночницы в СХТ36

1. Самый низкий уровень смертности рукокрылых характерен для штольни Верблюд. Небольшая смертность здесь зафиксирована только у трѐх видов рукокрылых: водяной ночницы, прудовой ночницы и бурого ушана. Вероятно, микроклимат здесь наиболее благоприятен для всех зимующих животных, особенно для северного кожанка, ночницы Наттерера, усатой ночницы и бурого ушана. Рис. 15. Уровень смертности рукокрылых разных видов в 2015 году в штольнях г. Попова, Бурлак, Верблюд и СХТ-1. В 2017 году не зафиксирована смертность в штольне СХТ-1 (рис.16). Наиболее высокая смертность в этом году отмечена в штольне Верблюд у самого малочисленного зимующего вида северного кожанка. Смертность остальных видов довольно низкая, не превышает 0,4% и в среднем колеблется от 0 до 0,2%. В штольнях г. Попова смертность отмечена у 5 видов, Верблюд – у 4 видов, а Бурлак – лишь у 1 вида. Таким образом, с учетом общей численности зимующего населения, самый низкий уровень смертности зафиксирован в штольне Бурлак. 37

Рис. 16. Уровень смертности рукокрылых разных видов в 2017 году в штольнях г. Попова, Бурлак и Верблюд. Изучение значений уровня смертности на протяжении зимнего периода 2014–2015 показало, что в начале и в конце зимовки он неоднозначный. Так, смертность рукокрылых, оцененная для всех зимующих популяций в пределах исследованного региона, в конце зимнего периода оказалась немного выше, чем в начале (рис. 17). Исключение составляет лишь прудовая ночница. Однако статистические отличия из-за очень малой смертности по отношению к большому числу зимующих особей оказались недостоверными. Следовательно, зимовка как фактор и ее продолжительность не оказывает существенного влияния на выживаемость зимующих популяций исследуемого региона в целом. Однако это нельзя сказать про популяции видов, зимующих в отдельно взятых подземельях. Например, в штольне Попова в конце зимовки 2014–2015 года погибло 20 особей, в начале зимовки 2015–2016 года – 8 летучих мышей, что в целом показывает статистически достоверные различия (2=5.14, при p<0.05). Количество погибших в начале зимовки у большинства видов ниже, чем к 38

концу зимовки. В начале зимовки смертность не отмечена у северного кожанка и ночницы Наттерера, а у прудовой ночницы она не отмечена, как в начале, так и в конце зимовки (рис. 18). Рис. 17. Уровень смертности рукокрылых в подземельях «Самарской Луки» в конце зимовки 2014 года и начале зимовки 2015 года. Рис. 18. Уровень смертности рукокрылых в штольнях г. Попова в конце зимовки 2014 года и начале зимовки 2015 года. 39

Аналогичные ситуации наблюдаются и в штольнях СХТ-1 и Верблюд (рис. 19,20). В штольне СХТ-1 смертность водяной ночницы, бурого ушана, усатой ночницы и ночницы Брандта в конце зимовки значительно превышает смертность в начале зимовки. У северного кожанка, ночницы Наттерера и прудовой ночницы смертность не зафиксирована. В штольнях г. Верблюд исключение составляют прудовая ночница. Смертность у неѐ отмечена только в начале зимовки. Кроме того, отсутствует смертность у усатой ночницы. Рис. 19. Уровень смертности рукокрылых в штольнях СХТ-1 в конце зимовки 2014 года и начале зимовки 2015 года. Однако в штольнях г. Бурлак складывается практически противоположная ситуация (рис. 21). Здесь смертность в начале зимовки выше у северного кожанка, водяной ночницы, ночницы Брандта и бурого ушана. Выявленная ранее тенденция прослеживается только у прудовой ночницы. Нарушения, возможно, вызваны тем, что вблизи этого места зимовки до сих пор ведутся взрывные работы, что вызывает дискомфорт у зверьков. 40

Рис. 20. Уровень смертности рукокрылых в штольнях г. Верблюд в конце зимовки 2014 года и начале зимовки 2015 года. Рис. 21. Уровень смертности рукокрылых в штольнях г. Бурлак в конце зимовки 2014 года и начале зимовки 2015 года. 41

Противоположная ситуация складывается в 2016 и 2017 годах. Уровень смертности (0, 047%) для всех видов в начале зимовки 2017 года практически в 2 раза превышает таковой (0, 022%) в конце зимовки 2016 года. Однако для отдельных видов ситуация неоднозначная. Тенденция большей смертности в конце зимовки сохраняется только для ночницы Наттерера и усатой ночницы, причем увеличение незначительное (рис.22). У прудовой ночницы различий не наблюдается. У водяной ночницы смертность в начале более чем в 2 раза превышает смертность в конце зимовки. А у северного кожанка, бурого ушана и ночницы Брандта смертность зафиксирована только в начале зимовки. Рис. 22. Уровень смертности рукокрылых в подземельях «Самарской Луки» в конце зимовки 2016 года и начале зимовки 2017 года Рассмотрим смертность разных видов рукокрылых в зависимости от места зимовки. В штольнях г. Попова уровень смертности в начале зимовки выше у четырѐх видов: водяной ночницы, бурого ушана, ночницы Брандта и прудовой ночницы (рис. 23). При этом в конце зимовки не зафиксирована смертность у водяной ночницы, бурого ушана, ночницы Брандта. Вовсе не 42

найдены мертвыми северные кожанки. Уровень смертности ночницы Наттерера и усатой ночницы в конце зимовки чуть выше, чем в начале. Рис. 23. Уровень смертности рукокрылых в штольнях г. Попова в конце зимовки 2014 года и начале зимовки 2015 года. В штольнях г. Верблюд у северного кожанка, прудовой ночницы и бурого ушана смертность зафиксирована только в начале зимовки (рис.24). Северный кожанок выделяется среди других видов наиболее высоким уровнем смертности, несмотря на то, что мертвым было найдено только одно животное. Вовсе не найдены мертвыми ночницы Наттерера, усатые ночницы и ночницы Брандта. У водяной ночницы отсутствует смертность в начале зимовки. Таким образом, ранее выявленная тенденция наблюдается только у одного из семи видов рукокрылых. В штольнях горы Бурлак смертность отмечена только у одного вида зимующих рукокрылых водяной ночницы (рис. 25). При этом все обнаруженные трупы оказались свежими, что указывало на смерть в начале зимовки 2017 года. 43

Рис. 24 Уровень смертности рукокрылых в штольнях г. Верблюд в конце зимовки 2016 года и начале зимовки 2017 года. Рис. 25. Уровень смертности рукокрылых в штольнях г. Бурлак в конце зимовки 2016 года и начале зимовки 2017 года 44

4.3. Причины смертности летучих мышей на зимовках Причинами смертности рукокрылых на зимовки может быть целый комплекс факторов. Наиболее вероятная из них – это частое пробуждение во время зимнего периода. Предполагается, что многие летучие мыши умирают в штольнях, когда увеличивается частота пробуждений и возрастает активность, потому что это уменьшает количество жировых запасов. В это время, прогрессирующее ухудшение состояния организма (из-за истощения жировых резервов) может также способствовать увеличению смертности. Это может быть связано с ослаблением зверьков и общим ухудшением физического состояния (например, по причине прогрессирующей болезни). Повышение смертности в начале периодов исследований можно объяснить тем, что некоторые из первых прибывших на зимовки в штольни зверьков уже изначально оказываются физически слабыми по причине, например, болезни или в связи с недостатком накопленных энергетических запасов. Также, вполне возможно, что более высокие энергетические издержки при переходе к спячке коррелируют с температурой окружающей среды и снижают жизнеспособность ослабленных или больных животных. Другой причиной смертности рукокрылых могут быть паразитарные заболевания. Например, некоторые зверьки за время зимней спячки могут быть поражены грибком, который резко снижает иммунитет и приводит к летальному исходу. С целью выявления подобных случаев заражения нами проводился подробный осмотр животных отдельно в начале и в конце зимовки. Во время учетов, проведенных в ноябре, из нескольких тысяч осмотренных животных была обнаружена только одна летучая мышь с признаками грибкового поражения (рис. 26). Внешний осмотр грибка показал, что он не является P. destructans, который вызывает опасный Синдром белого носа, приводящий к смертности рукокрылых на зимовках. Однако, как известно, P. destructans проявляется у спящих животных не в 45

начале, а чаще в конце зимнего периода. К этому времени у неподвижных животных он успевает прорасти, стать заметным и привести к поражению организма. Для его обнаружения нами проведен повторный осмотр зверьков в марте, однако грибков на теле спящих животных обнаружено не было. Так как нами зафиксирован всего лишь единственный случай заражения грибком, констатировать, что мы те можем штаммы грибов, которые встречаются на теле зимующих зверьков, не являются причиной их смерти на зимовках в условиях Самарской Луки. Мы приняли гипотезу, что на уровень смертности Рис. 26. Бурый ушан, пораженный грибком. оказывают влияние микроклиматические характеристики мест зимовки. Выявлялась зависимость между смертностью летучих мышей, зимующих в штольнях г. Попова, и температурой и влажностью в залах. Однако проведѐнный регрессионный анализ не выявил такой зависимости. Коэффициент множественной корреляции не превышает 6% (табл. 6). Наконец, на величину смертности рукокрылых могут оказывать влияние различные травмы, полученные как во время активного периода жизни, так и во время зимовки. Во время зимних учетов нами были неоднократно обнаружены такие особи с сильными повреждениями и травмами тела (рис. 27). Нередко встречались зверьки, зараженные эктопаразитами, например, коллемболами. Сами по себе, эктопаразиты не могут служить причиной 46

гибели, однако они беспокоят летучих мышей, вследствие чего зверьки чаше просыпаются, а соответственно, расходуются их жировые запасы. Таблица 6. Коэффициент множественной корреляции (R), полученный в ходе регрессионного анализа, для разных видов рукокрылых, зимующих в штольнях г. Попова. Вид R Прудовая ночница – Водяная ночница 0,03 Бурый ушан 0,04 Ночница Наттерера 0,04 Ночница Брандта 0,05 Северный кожанок 0,05 Усатая ночница 0,06 Рис. 27. Летучие мыши с повреждениями и травмами. 47

Одной из причин смертности на зимовках рукокрылых Самарской Луки может являться хищничество, например, лисиц. Следы пребывания этих животных неоднократно были обнаружены в пещерах во время зимних учетов. Лисы могут снимать со стен низко расположенных летучих мышей и поедать их в массовом количестве. Кроме того, лисицы подбирают также трупы недавно умерших животных, что может влиять на результаты исследования. На численность рукокрылых могут влиять также обвалы, случающиеся в пещерах. 4.4. Причины высокой продолжительности жизни рукокрылых При общей небольшой смертности на зимовках для рукокрылых характерна большая продолжительность жизни. Руководствуясь теорией выживания видов можно заключить, что рукокрылым свойственна стратегия К-отбора, которую в природе преследуют обычно крупные животные, такие как слон, медведь, тигр. Однако рукокрылые, обладая мелкими размерами, являются исключением из этой закономерности. В среднем продолжительность их жизни приблизительно в 3 раза выше таковой у нелетающих млекопитающих сопоставимого размера и уровня метаболизма (Попов, Ковалев, 2010). Максимальная известная продолжительность жизни летучих мышей по данным кольцевания – 41 год. Долгожитель такого возраста, ночница Брандта, была обнаружена на зимовке в феврале 2003 г. в пещере Казыреевская-2 на Восточном Саяне (Ефанова, 2004). Достаточно высокую продолжительность жизни регистрировали и на зимовках рукокрылых в условиях Среднего Поволжья. Так, на Самарской Луке в 2014 г, была найдена ночница Брандта, окольцованная 28 лет назад. У Бурого ушана максимальная продолжительность, зарегистрированная здесь, составляет 20 лет, у водяной ночницы и ночницы Наттерера – 16 лет. 48

Было выдвинуто 5 гипотез, объясняющих долгожительство летучих мышей. Первая – инфекционно-иммунологическая. Она основана на данных, что иммунитет рукокрылых обладает специфическими особенностями, связанными с врожденным иммунитетом к бешенству и отсутствием способности синтеза аскорбиновой кислоты. Вторая – метаболическая гипотеза. Достаточную продолжительность жизни рукокрылых связывают со способностью на длительное время тормозить уровень метаболизма. Медленное старение летучих мышей можно объяснить тем, что большую часть своей жизни они спят. Соответственно, если животное малоактивно, то и изменения в организме происходят медленно. В-третьих, долгожительству рукокрылых способствует также медленное размножение. Репродуктивная гипотеза заключается в том, что существует обратная связь между плодовитостью животных и средней продолжительностью жизни. Несмотря на малые размеры, для летучих мышей характерно относительно медленное размножение. В год самки рождают одного или двух (редко трѐх) детенышей. Стоит отметить, что самые высокие рекорды долгожительства принадлежат именно самцам (41 год). Это можно объяснить тем, что организм самки в связи с рождением детенышей претерпевает большие изменения, чем организм самца. В-четвертых, большую часть жизни летучие мыши проводят в темноте. Поэтому мы рассмотрели влияние света на процесс старения этих животных и, соответственно, на продолжительность их жизни. Фотобиохимическая, или пероксидная, теория учитывает специфику образа жизни рукокрылых. Фотопериод влияет на содержание в организме мелатонина, который в темноте синтезируется в больших количествах. Этот нейрогормон является сильным антиоксидантом. Он замедляет в клетках процессы перекисного 49

окисления, чем препятствует быстрому старению. Отмечено, что ночные рукокрылые отличаются большей продолжительностью жизни, чем вечерние. Наконец, в-пятых, летучие мыши выделяются среди других млекопитающих не только высокой продолжительностью жизни, но и способностью к активному полѐту. Поведенческая гипотеза связана тем, что полет помогает рукокрылым избегать малоприятных встреч наземными хищниками. Благодаря этому, они могут прожить гораздо дольше, чем наземные млекопитающие сопоставимого размера. 50

ВЫВОДЫ 1. За период исследования учтено 121 852 особи, относящихся к 7 видам рукокрылых. По количеству учтенных особей на зимовках лидирующее положение занимает ночница Брандта, далее в порядке убывания численности следуют усатая ночница, прудовая ночница, бурый ушан и водяная ночница. Относительно малочисленными являются северный кожанок и ночница Наттерера. 2. По результатам находок погибших рукокрылых в искусственных подземельях Самарской Луки была составлена электронная база данных. Кроме видовой принадлежности животного, она содержит информацию о дате и месте обнаружения трупа. В базу вошли данные о находках 231 погибшей летучей мыши. 3. Оценка уровня смертности показала, что для всего зимующего населения в целом он относительно низкий и не превышает 0.3%. Такой низкий показатель не должен оказывать существенного влияния на состояние всего зимующего населения этих животных. 4. Наиболее высокая смертность отмечена у северного кожанка, который характеризуется как малочисленный вид, а самая низкая смертность – у лидирующего по численности, ночницы Брандта. 5. За период исследований самый высокий уровень смертности отмечен в штольнях СХТ-1 и Бурлак. Наиболее низкая смертность зарегистрирована в штольнях Попова и Верблюд. Вовсе не отмечено погибших рукокрылых в штольнях СХТ-2, СХТ-3, СХТ-4 и СХТ-5. 6. Оценка смертности в разные периоды зимовки показала, что в целом смертность в конце зимовки немного выше, чем в еѐ начале. Это объясняется нехваткой жировых запасов, ослаблением и истощением организма к концу зимовки. 51

7. К вероятным причинам смертности в начале зимовки может быть отнесена общая физическая ослабленность животных. Причинами смертности могут являться болезни, паразиты, хищники и различного рода травмы. Одним из факторов смертности могут быть обвалы в пещерах. 8. Были продолжительность млекопитающими выдвинуты гипотезы, жизни рукокрылых сходного размера: объясняющие по сравнению высокую с другими инфекционно-иммунологическая, метаболическая, репродуктивная, фотобиохимическая и поведенческая. Гипотезы основаны на специфических особенностях физиологии и образа жизни летучих мышей. 52

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Ефанова Н. А. Спелеофауна рукокрылых западных отрогов Восточного Саяна и восточных склонов Кузнецкого Алатау: диссертация кандидата биологических наук: 03.00.16/ Н. А. Ефанова.– Красноярск, 2004. – 163 с.; 2. Митчелл-Джонс А. Дж., Бихари З., Мазинг М., Родригес Л. Подземные убежища рукокрылых: охрана и управление// EUROBATS Publication Series. No. 2. Русская версия. Изд. второе.– 2011. – 36 с 3. Попов И. Ю. Обстоятельства долгожительства летучих мышей (в связи с материалами исследования на территории Санкт-Петербурга и Ленинградской области) / И. Ю. Попов, Д. Н. Ковалев // Успехи геронтологии. – 2010. – Т. 23. – № 2. – С. 179 – 185; 4. Aguirre LF., Herrel A., Van Damme R., Matthysen E., 2003. The implications of food hardness for diet in bats// Funct Ecol. № 17. P. 201– 212; 5. Bisping W., Amtsberg G., 1988. Colour Atlas for the Diagnosis of Bacterial Pathogens in Animals// Paul Parey Scientific Publishers. Berlin, Hamburg; 6. Bouma HR., Carey HV., Kroese FGM., 2010. Hibеrnation: the immune systemat rest? // Journal of Leukocyte Biology. № 88. P. 619–624; 7. Brenner DJ, Krieg NR, Staley JT., 2005. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology// 2nd Edition. Springer, New York; 8. Christe P., Arlettaz R., Vogеl P., 2000. Variation of intensity of a parasitic mite (Spinturnix myoti) in relation to the reproductive cycle and immunocompetence of its bat host (Myotis myotis)// Ecol Lett. № 3. P. 207– 212; 53

9. Christe P., Glaizot O., Evanno G., Bruyndonckx N., Devevey G., et al. 2007. Host sex and ectoparasites choice: preference for, and higher survival on female host// J. Anim. Ecol. Vol.76. P. 703–710; 10.Chua KB., Koh CL., Hooi PS., Wee KF., Khong JH., et al. 2002 Isolation of Nipah virus from Malaysian Island flying-foxes// Microbes Infect. № 4. P. 145–151; 11.Ciechanowsky M., Zajac T., Zielinska A., Dunajski R. 2010. Seasonal activity patterns of seven vespertilionid bat species in Polish lowlands// Acta. Theriol. № 55. P. 301–314; 12.Dacheux L., Larrous F., Mailles A., Boisseleau D., Delmas O., et al. 2009 European bat lyssavirus transmission among cats, Europe// Emerg. Infect. Dis. Vol.15. № 2. P. 280–284; 13.Daffner B. 2001. Causes of morbidity and mortality in British bat species and prevalence of selected zoonotic pathogens// Thesis for MSc in Wild Animal Health, University of London; 14.de Souza Luna LK., Heiser V., Regаmey N., Panning M., Drexler JF., et al. 2007. Generic detection of coronaviruses and differentiation at the prototype strain level by reverse transcription PCR and nonfluorescent lowdensity microarray// J. Clin. Microbiol. №45. P. 1049–1052; 15.Duignan P., Horner G., O’Keefe J. 2003. Infectious and emerging diseases of bats, and health status of bats in New Zealand// Surveillance.№ 30. P. 15–18; 16.Evans NJ., Bown K., Timofte D., Simpson VR., Birtles RJ. 2009. Fatal borreliosis in bat caused by relapsing fever spirochete, United Kingdom// Emerg. Infect. Dis. № 15. Vol. 8. P. 1331–1333; 17.Feldhamer GA., Carter TC., Whitaker JO. 2009. Prey consumed by eight species of insectivorous bats from Southern Illinois// Am. Midl. Nat. № 162. P. 43–51; 54

18.Freuling C., Beer M., Conraths FJ., Finke S., Hoffmann B., et al. 2011. Novel lyssavirus in Natterer’s bat, Germany// Emerg. Infect. Dis. Vol. 17. № 8. P. 1519–1522; 19.Freuling C., Grossmann E., Conraths F., Schameitat A., Kliemt J., et al. 2008. First isolation of EBLV–2 in Germany// Vet. Microbiol. № 131. P. 26–34; 20.George DB, Wеbb CT, Farnsworth ML, O’Shea TJ, Bowen RA, et al. 2011 Host and viral ecology determine bat rabies seasonality and maintenance. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. Vol. 108. № 25. P. 10208–10213; 21.Gloza-Rausch F., Ipsen A., Seebens A., Gottsche M., Panning M., et al. 2008. Detection and prevalence patterns of group I coronaviruses in bats, northern Germany// Emerg. Infect. Dis. Vol. 14. № 4. P. 626–631; 22.Hajkova P., Pikula J. 2007. Veterinary treatment of evening bats (Vespertilionidae) in the Czech Rеpublic// Vet. Rec. Vol. 161. № 4. P. 139– 140; 23.Halpin K., Young PL., Field HE., Mackenzie JS. 2000. Isolation of Hendra virus from pteropid bats: a natural reservoir of Hendra virus// J. Gen. Virol. Vol 81. № 8. P. 1927–1932; 24.Harris SL., Brookes SM., Jones G., Hutson AM., Racey PA., et al. 2006. European bat lyssaviruses: distribution, prevalence and implications for conservation// Biol. Conserv. Vol. 131. P. 193–210; 25.Hart BL (1992) Behavioral adaptations to parasites: an ethological approach// J. Parasitol. Vol. 78. № 2. P. 256–265; 26.Johnson N., Vos A., Freuling C., Tordo N., Fooks AR., et al. 2010. Human rabies due to lyssavirus infection of bat origin// Vet. Microbiol. Vol. 142. P. 151–159; 27.Johnson PTJ., Dobson A., Lafferty KD., Marcogliese DJ., Memmott J., et al. 2010. When parasites become prey: ecological and epidemiological 55

significance of eating parasites// Trends Ecol. Evol. Vol. 25. № 6. P. 362– 371; 28.Klempa B., Fichet-Cаlvet E., Lecompte E., Auste B., Aniskin V., et al. 2006. Hantavirus in African wood mouse, Guinea// Emerg. Infect. Dis. Vol 12. № 5. P. 838–840; 29.Kunz T.H., de Torrez E.B., Bauer D., Lobova T., Fleming T.H. 2011. Ecosystem services provided by bats// Ann. N. Y. Acad. Sci. Vol.1223 P. 1–38; 30.Kuzmin I.V., Bоzick B., Guagliardo S.A., Kunkеl R., Shak J.R., et al. 2011. Bats, emerging infectious diseases, and the rabies paradigm revisited// Emerging Health Threats Journal. Vol 4. №1; 31.Kuzmin I.V., Rupprecht C.E. 2007. Bat rabies. In: Jackson A.C., Wunner W., eds. Rabies// 2nd Edition Academic Press, New York. P. 259–307; 32.Leroy E.M., Kumulungui B., Pourrut X., Rouquet P., Hassanin A., et al. 2005. Fruit bats as reservoirs of Ebola virus// Nature. Vol. 438. P. 575–576; 33.Li W., Shi Z., Yu M., Ren W., Smith C., et al. 2005. Bats are natural reservoirs of SARS-like coronaviruses// Science. Vol. 310. P. 676–679; 34.Lucan R.K. 2006. Relationships between the parasitic mite Spinturnix andegavinus (Acari: Spinturnicidae) and its bat host, Myotis daubentonii(Chiroptera: Vespertilionidae): seasonal, sex- and age-related variation in infestation and possible impact of the parasite on the host condition and roosting behavior// Folia Parasitol. Vol. 53. № 2. P. 147–152; 35.Martinkova N.,Bаckor P., Bartonicka T., Blazkova P.,Cerveny J., et al. 2010. Increasing incidence of Geomyces destructans fungus in bats from the Czech Republic and Slovakia// PLoS ONE.Vol. 5; 36.Mickleburgh S.P., Hutson A.M., Racey P.A. 2002. A review of the global conservation status of bats// Oryx Vol. 36 № 1. P. 18–34; 56

37.Muhldorfer K., Schwarz S., Fickel J., Wibbelt G., Speck S. 2011. Genetic diversity of Pasteurellaspecies isolated from European vespertilionid bats// Vet. Microbiol. Vol. 149. P.163–171; 38.Muhldorfer K., Speck S., Wibbelt G. 2011. Diseases in free-ranging bats from Germany// BMC Vet. Res. Vol 7. P. 61; 39.Muhldorfer K., Wibbelt G., Haensel J., Riehm J., Speck S. 2010. Yersiniaspecies isolated from bats, Germany// Emerg. Infec. Dis. Vol. 16. № 3. P. 578–580; 40.Muller T., Johnson N., Freuling C.M., Fooks A.S., Selhorst T., et al. 2007. Epidemiology of bat rabies in Germany// Arch. Virol. № 152. P. 273–288; 41.Patterson B.D., Dick C.W., Dittmar K. 2007. Rооsting habits of bats affect their parasitism by bat flies (Diptera: Streblidae)// J. Trop. Ecol. № 23. P. 177–189; 42.Plowright R.K., Field H.E., Smith C., Divljan A., Palmer C., et al. 2008. Reproduction and nutritional stress are risk factors for Hendra virus infection in little red flying foxes (Pteropus scapulatus)// Proc. Biol. Sci. Vol. 275. P. 861–869; 43.Puechmaille S.J., Verdeyroux P., Fuller H., Ar Gouilh M., Bekaert M., et al. 2010.White-nose syndrome fungus (Geomyces destructans) in bat, France// Emerg. Infect. Dis. Vol. 16. № 2. P. 290–293; 44.Puechmaille S.J., Wibbelt G., Korn V., Fuller H., Forget F., et al. (2011) Pan-European distribution of White-nоse syndrome fungus (Geomyces destructans) not associated with mass mortality// PLoS ONE. Vol. 6. 45.Rihtaric D., Hostnik P., Steyer A., Grom J., Tоplаk I. 2010 Identification of SARS-like coronavirus in horseshoe bats (Rhinolophus hipposideros) in Slovenia// Arch. Virol. Vol. 155. № 4. P. 507–514; 46.Sanchez-Seco M.P., Rosario D., Domingo C., Hernandez L., Valdes K., et al. 2005. Generic RT-nested-PCR for detection of flaviviruses using 57

degenerаted primers and internаl control followed by sequencing for specific identification// J. Virol. Methods. Vol. 126. P. 101–109; 47.Schipper J., Chanson J.S., Chiоzza F., Cox N.A, Hоffmann M., et al. 2008. Thestatus of the world’s land and marine mammals: diversity, threat and knowledge// Science. Vol. 322. P. 225–230; 48.Simpson V.R. 2000. Veterinary advances in the investigation of wildlife diseases in Britain// Res. Vet. Sci. № 69. P. 11–16; 49.Sonntag M., Muhldorfer K., Speck S., Wibbelt G., Kurth A. 2009. New adenovirus in bats, Germany// Emerg. Infect. Dis. Vol. 15. № 12. P. 2052– 2055; 50.Talan D.A., Citrоn D.M., Abrahamian F.M., Moran G.J., Goldstein E.J.C. 1999. Bacteriologic analysis of infected dog and cat bites// N. Engl. J. Med. Vol. 340. № 2. P. 85–92; 51.ter Hofstede H.M., Fenton M.B. 2005. Relationships between roost preferences, ectoparasite density, and grooming behaviour of neotropical bats// J. Zool. Lond. № 266. P. 333–340; 52.Towner J.S., Amman B.R., Sealy T.K., Carroll S.A.R., Comer J.A., et al. (2009) Isolation of genetically diverse Marburg viruses from Egyptian fruit bats// PLoS Pathog. Vol. 5. № 7 53.Turner, G.G. and Rееder, D.M. 2009. Updаtе of White Nose Syndrome in bats// Bat Res. News № 50. P. 47–53; 54.Wibbelt G., Kurth A., Hellmann D., Weishaar M., Barlow A., et al. (2010) White-Nose Syndrome fungus (Geomyces destructans) in bats, Europe// Emerg. Infect. Dis Vol. 16. № 8. P. 1237–1242; 55.Wibbelt G., Kurth A., Yasmum N., Bannert M., Nagel S., et al. 2007. Discovery of herpesviruses in bats// J. Gen. Virol. Vol. 88. № 10. P. 2651– 2655; 56.Wibbelt G., Mооre M.S., Schountz T., Voigt C.C. 2010. Emerging diseases in Chiroptera: why bats?// Biol. Lett. Vol. 6. № 4. P. 438–440; 58

57.Wibbelt G., Speck S., Field H. 2009. Methods for assessing diseases in bats. In:Kunz TH, Pаrsons S, eds. Ecological and Behavioral Methods for the Study of Bats// 2nd Edition The Johns Hopkins University Press.P. 775–794; 58.Wong S., Lau S., Woo P., Yuen K-Y. 2007. Bats as a continuing source of emerging infections in humans// Rev. Med. Virol. Vol. 17 № 2. P. 67–91; 59.Zahn A., Rupp D., 2004. Ectoparasite load in European vespertilionid bats// J. Zool. Lond. № 262: 383–39;. 60.Zukаl J., Bandouchova H., Brichta J., Cmokova A., Jaron K.S.,et al. 2016. White-nose syndrome without borders: Pseudogymnoascus destructans infection tolerated in Europe and Pаlearctic Аsia but not in North America// Sci.Rep. № 6. P.1–13 61.www.batcon.org; 62.www.whitenosesyndrome.org. 59

ПРИЛОЖЕНИЕ № № t, φ, Степень зала °С % сохранности 12Н1 3,8 96,3 череп Дата Штольня Вид 1 2005 г. Попова Myotis dasycneme 2 2005 Eptesicus nilssonii череп 3 2005 Eptesicus nilssonii череп 4 2005 Eptesicus nilssonii череп 5 2005 Eptesicus nilssonii череп 6 2005 Eptesicus nilssonii череп 7 2005 Myotis mystacinus череп 8 2005 Myotis mystacinus череп 9 2005 Myotis mystacinus череп 10 2005 Myotis mystacinus череп 11 2005 Myotis mystacinus череп 12 2005 Myotis mystacinus череп 13 2005 Myotis dasycneme череп 14 2005 Myotis daubentonii череп 15 2005 Myotis daubentonii череп 16 2005 Myotis daubentonii череп 17 2005 Myotis daubentonii череп 18 2005 Plecotus auritus череп 19 2005 Plecotus auritus череп 20 2005 Plecotus auritus череп 21 2005 Plecotus auritus череп 22 25.11.2004 г. Попова Eptesicus nilssonii череп 23 25.11.2004 г. Попова Eptesicus nilssonii 24 25.11.2004 г. Попова Myotis mystacinus 25 25.11.2004 г. Попова Myotis mystacinus 26 25.11.2004 г. Попова Myotis dasycneme череп 27 25.11.2004 г. Попова Myotis daubentonii нижняя п/п 60 6Н2 0,7 95,5 нижняя челюсть череп 14Н2 3 100 нижняя челюсть

челюсть 2Б нижняя 28 25.11.2004 г. Попова Myotis daubentonii 29 25.11.2004 г. Попова Plecotus auritus череп 30 25.11.2004 г. Попова Plecotus auritus череп 31 25.11.2004 г. Попова Plecotus auritus 32 17.11.2005 г. Попова Eptesicus nilssonii Т1 4,1 92,4 череп 33 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus PH 4 95,1 череп 34 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus 13H2 3,1 100 череп 35 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus M11 -0,6 92,4 череп 36 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus 10Н2 0,4 97,6 череп 37 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus череп 38 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus череп 39 17.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus череп 40 17.11.2005 г. Попова Myotis dasycneme А15 3 100 череп 41 17.11.2005 г. Попова Plecotus auritus M11 -0,6 92,4 череп 42 17.11.2005 г. Попова Plecotus auritus Х15 4,2 95,5 череп 43 17.11.2005 г. Попова Plecotus auritus 44 18.11.2005 СХТ-1 Plecotus auritus Е11 череп 45 18.11.2005 СХТ-1 Eptesicus nilssonii М11 череп 46 18.11.2005 СХТ-1 Myotis mystacinus Д-10 череп 47 18.11.2005 СХТ-1 Myotis daubentonii М12 череп 48 19.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus Т1 4,1 92,4 череп 49 20.11.2005 г. Попова Eptesicus nilssonii 8Н1 0,5 97,6 череп 50 20.11.2005 г. Попова Myotis daubentonii 5Н1 51 21.11.2005 г. Попова Myotis daubentonii 2Г4 4,6 96,8 череп 52 21.11.2005 г. Попова Myotis daubentonii 2Ш 4,1 95,4 череп 53 21.11.2005 г. Попова Plecotus auritus 8Ж 4,1 98,5 череп 54 21.11.2005 г. Попова Plecotus auritus Ч6 55 22.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus Р6 4,1 94 череп 56 22.11.2005 г. Попова Myotis daubentonii Р6 4,1 94 череп 57 24.11.2005 г. Попова Eptesicus nilssonii 6Б -1,2 92,2 череп 61 -0,9 97,9 челюсть нижняя челюсть череп череп череп

58 24.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus M10 -0,1 93,9 череп 59 24.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus M10 -0,1 93,9 череп 60 24.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus А13 -0,8 95,2 череп 61 24.11.2005 г. Попова Myotis mystacinus М12 -1,3 91,2 череп 62 24.11.2005 г. Попова Myotis daubentonii 10Ф 3,8 100 череп 63 24.11.2005 г. Попова Myotis daubentonii 1У 4,2 96,6 череп 64 24.11.2005 г. Попова Plecotus auritus А7 -0,6 85,7 череп 65 24.11.2005 г. Попова Plecotus auritus 6Б -1,2 92,2 череп 66 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus 37ʹ ст.тушка 67 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus Е12 св.тушка 68 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus Е12 ст.тушка 69 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus Е12 ст.тушка 70 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus З7 св.тушка 71 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus Й15 ст.тушка 72 24.11.2015 СХТ-1 Myotis mystacinus Й15 ст.тушка 73 24.11.2015 СХТ-1 Myotis daubentonii Ж11 ст.тушка 74 24.11.2015 СХТ-1 Myotis daubentonii К15 ст.тушка 75 24.11.2015 СХТ-1 Myotis daubentonii Л13 св.тушка 76 24.11.2015 СХТ-1 Plecotus auritus Й15 ст.тушка 77 24.11.2015 СХТ-1 Plecotus auritus О9 ст.тушка 78 25.11.2015 г. Попова Eptesicus nilssonii Х11 79 25.11.2015 г. Попова Plecotus auritus 4Г9 80 25.11.2015 г. Попова Plecotus auritus Х16 4,3 95,3 ст.тушка 81 25.11.2015 г. Попова Plecotus auritus Х17 5,1 92,1 ст.тушка 82 26.11.2015 г. Попова Myotis brandtii П1 4 93,9 ст.тушка 83 26.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus 13Н2 3,1 100 ст.тушка 84 26.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus 14Н2 3 100 ст.тушка 85 26.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus Р 4 94,3 св.тушка 86 26.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus Рʹ 4,7 89,9 ст.тушка 87 26.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus С1Р3 4,3 93,7 св.тушка 88 26.11.2015 г. Попова Myotis daubentonii 5Р1 4,1 94,7 ст.тушка 89 26.11.2015 г. Попова Myotis daubentonii НН1 3,7 95,9 ст.тушка 90 26.11.2015 г. Попова Plecotus auritus РН 4 95,1 св.тушка 62 3,2 91,2 ст.тушка ст.тушка

91 27.11.2015 СХТ-1 Myotis brandtii Й15 92 28.11.2015 г. Попова Eptesicus nilssonii А14 -1 98,8 ст.тушка 93 28.11.2015 г. Попова Eptesicus nilssonii А14 -1 98,8 ст.тушка 94 28.11.2015 г. Попова Eptesicus nilssonii А14 -1 98,8 ст.тушка 95 28.11.2015 г. Попова Eptesicus nilssonii М11 -0,6 92,4 ст.тушка 96 28.11.2015 г. Попова Myotis brandtii 9Н2 0,9 98,2 св.тушка 97 28.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus 2Т1 4,6 91,8 св.тушка 98 28.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus А 4 87,9 ст.тушка 99 28.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus М14 -0,9 89,5 св.тушка 100 28.11.2015 г. Попова Myotis daubentonii 2Т1 4,6 91,8 св.тушка 101 28.11.2015 г. Попова Plecotus auritus 2С 5,1 91,3 ст.тушка 102 29.11.2015 г. Попова Eptesicus nilssonii 1Ш 4 99,3 ст.тушка 103 29.11.2015 г. Попова Myotis mystacinus 2Ц 4,6 95 ст.тушка 104 29.11.2015 г. Попова Myotis daubentonii 1Х 4,4 94 ст.тушка 105 29.11.2015 г. Попова Myotis daubentonii 6Г5 4,9 98,8 св.тушка 106 29.11.2015 г. Попова Myotis daubentonii Г3 4,3 90,6 ст.тушка 107 01.12.2015 Верблюд Myotis dasycneme И24 7,6 84,2 св.тушка 108 01.12.2015 Верблюд Myotis daubentonii 37 3,1 86,3 ст.тушка 109 01.12.2015 Верблюд Plecotus auritus Л27 4,1 92,7 ст.тушка 110 02.12.2015 Верблюд Myotis dasycneme 31 3,6 81,8 св.тушка 111 02.12.2015 Верблюд Myotis dasycneme 31 3,6 81,8 св.тушка 112 03.12.2015 г. Попова Myotis brandtii 16Г4 92,8 4,9 ст.тушка 113 03.12.2015 г. Попова Myotis nattereri 13Я 4,1 99,1 ст.тушка 114 03.12.2015 г. Попова Myotis daubentonii 1Г9 4,7 100 ст.тушка 115 03.12.2015 г. Попова Myotis daubentonii 1Г9 4,7 100 ст.тушка 116 04.12.2015 Бурлак Eptesicus nilssonii 108 1,8 95,1 св.тушка 117 04.12.2015 Бурлак Myotis dasycneme 74 4,7 97,7 св.тушка 118 04.12.2015 Бурлак Myotis dasycneme 76 5,1 96,6 ст.тушка 119 04.12.2015 Бурлак Myotis dasycneme 76 5,1 96,6 ст.тушка 120 04.12.2015 Бурлак Myotis dasycneme 76 5,1 96,6 ст.тушка 121 04.12.2015 Бурлак Myotis dasycneme B7 0,5 85 св.тушка 122 04.12.2015 Бурлак Myotis dasycneme Г4 3,2 90,8 св.тушка 123 04.12.2015 Бурлак Myotis daubentonii В8ʹ 1,6 92,6 св.тушка 63 ст.тушка

2,7 92,2 св.тушка ХЗʹ 4,5 96,3 св.тушка Myotis dasycneme 153 4,6 94,6 ст.тушка Бурлак Plecotus auritus Ж1 3,2 90,9 ст.тушка 05.12.2015 Бурлак Plecotus auritus Х1 4,7 98,3 св.тушка 129 05.12.2015 Бурлак Plecotus auritus ХЗ 4,3 97 св.тушка 130 29.11.2017 г. Попова Myotis mystacinus 5Р1 4,1 94,7 св.тушка 131 29.11.2017 г. Попова Myotis nattereri 5Р1 4,1 94,7 св.тушка 132 30.11.2017 г. Попова Myotis mystacinus Р1 3,7 95,8 ст.тушка 133 30.11.2017 г. Попова Myotis mystacinus 3Ш 4,1 95,8 ст.тушка 134 30.11.2017 г. Попова Myotis nattereri М14 -0,9 89,5 ст.тушка 135 30.11.2017 г. Попова Myotis dasycneme S6 4,1 95,7 св.тушка 136 30.11.2017 г. Попова Myotis daubentonii РС 6,8 75 св.тушка 137 30.11.2017 г. Попова Plecotus auritus Р5 138 30.11.2017 г. Попова Plecotus auritus Б -1,3 94,8 св.тушка 139 02.12.2017 г. Попова Myotis brandtii 10Ф 3,8 100 св.тушка 140 02.12.2017 г. Попова Myotis mystacinus 10Н2 0,4 97,6 св.тушка 141 02.12.2017 г. Попова Myotis mystacinus 13Н2 3,1 100 ст.тушка 142 02.12.2017 г. Попова Myotis dasycneme 9Я 3,7 97,1 ст.тушка 143 02.12.2017 г. Попова Myotis daubentonii 4Т 1,4 99,4 св.тушка 144 03.12.2017 Верблюд Myotis dasycneme 30А св.тушка 145 03.12.2017 Верблюд Plecotus auritus П10 св.тушка 146 04.12.2017 Верблюд Eptesicus nilssonii М7 св.тушка 147 04.12.2017 Верблюд Myotis daubentonii О9ʹ ст.тушка 148 06.12.2017 г. Попова Myotis mystacinus А15 3 100 ст.тушка 149 06.12.2017 г. Попова Myotis mystacinus 10Т 3,1 100 св.тушка 150 06.12.2017 г. Попова Myotis dasycneme 10Т 3,1 100 св.тушка 151 07.12.2017 Бурлак Myotis daubentonii 44 152 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Eptesicus nilssonii 153 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Eptesicus nilssonii 154 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Eptesicus nilssonii 155 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Eptesicus nilssonii 156 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis brandtii 124 04.12.2015 Бурлак Plecotus auritus 125 05.12.2015 Бурлак Myotis brandtii 126 05.12.2015 Бурлак 127 05.12.2015 128 64 св.тушка св.тушка

157 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis brandtii 158 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis brandtii 159 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis brandtii 160 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis mystacinus 161 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis mystacinus 162 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis dasycneme 163 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis daubentonii 164 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Myotis daubentonii 165 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Plecotus auritus 166 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Plecotus auritus 167 ноябрь-декабрь 2014 Бурлак Plecotus auritus 168 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Eptesicus nilssonii 169 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Eptesicus nilssonii 170 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Eptesicus nilssonii 171 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Eptesicus nilssonii 172 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Eptesicus nilssonii 173 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 174 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 175 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 176 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 177 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 178 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 179 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 180 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 181 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 182 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis brandtii 183 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 184 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 185 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 186 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 187 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 188 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 189 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 65

190 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 191 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 192 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 193 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 194 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 195 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 196 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 197 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 198 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 199 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 200 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis mystacinus 201 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis nattereri 202 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis nattereri 203 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis nattereri 204 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis nattereri 205 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis nattereri 206 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis dasycneme 207 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis dasycneme 208 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis dasycneme 209 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis dasycneme 210 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis dasycneme 211 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis daubentonii 212 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis daubentonii 213 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis daubentonii 214 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis daubentonii 215 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Myotis daubentonii 216 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 217 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 218 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 219 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 220 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 221 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 222 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 66

223 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 224 ноябрь-декабрь 2014 г. Попова Plecotus auritus 225 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis brandtii 226 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis mystacinus 227 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis mystacinus 228 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis mystacinus 229 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis mystacinus 230 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis daubentonii 231 ноябрь-декабрь 2014 СХТ-1 Myotis daubentonii 67

Рецензии:

Авторизуйтесь, чтобы добавить рецензию

- у работы пока нет рецензий -

Отзывы:

Авторизуйтесь, чтобы оставить отзыв

6315.12

Игорь Маслеников

Проныра, озорник, Любитель книг, Ловкач, игрок, Жизнь между строк. И потому Открыт ему Незримый путь В любую суть. Танец злобного гения На страницах произведения Это игра без сомнения Обречённый ждёт поражения. Подсыпать в душу яд Всегда он рад Всего за час Прочтёт он вас. Он волен взять И поменять Строку и с ней Смысл темы всей.Танец злобного гения На страницах произведения Это игра без сомнения Обречённый ждёт поражения. Открыт роман Читатель пьян Разлив вино - Шагнул в окно. Танец злобного гения На страницах произведения Это игра без сомнения Обречённый ждёт поражения. Танец злобного гения На страницах произведения Это игра без сомнения Обречённый ждёт поражения.

6315.12

Игорь Маслеников

Танец Злобного Гения КиШ

6315.12

Игорь Маслеников

А теперь я скину тексты своих любимых песен для этого:)

6315.12

Игорь Маслеников

и хорошего настроения

6315.12

Игорь Маслеников

удачи