КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДОЕМОВ Г. АСТРАХАНИ

Алина Бареева

КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДОЕМОВ Г. АСТРАХАНИ

В ходе исследования, проведенного осенью 2019 и зимой–весной 2020 гг., оценено состояние реки Волга и водотока Кутум, протекающих на территории г. Астрахани. Точки отбора проб определены присутствием источников попадания в воду загрязняющих веществ: близость рынка «Большие Исады» и электростанции. Объектом исследований являются поверхностные водоемы г. Астрахань: река Волга и водоток Кутум. Целью магистерской диссертации является оценка поверхностных водоемов города Астрахани. За период исследования состояние воды оценивалось как удовлетворительное. В качестве экспресс-метода оценки санитарно-бактериологического контроля был положен хемилюминесцентный метод анализа водных проб.

Биология

Диссертации

Вуз: Астраханский государственный технический университет (АГТУ)

ID: 6051f852ccefde0001e8ce5f

UUID: a138bfe0-694b-0139-2e16-0242ac180002

Язык: Русский

Опубликовано: около 3 лет назад

Просмотры: 69

11.38

Алина Бареева

Комментировать 0

Рецензировать 0

Скачать - 2,2 МБ

Поделиться работой

Федеральное агентство по рыболовству Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Астраханский государственный технический университет» Система менеджмента качества в области образования, воспитания, науки и инноваций сертифицированной DQS по международному стандарту ISO9001:2015 Институт рыбного хозяйства, биологии и природопользования Направление подготовки 06.04.01 «Биология» Направленность «Микробиология и вирусология» Кафедра «Прикладная биология и микробиология» МАГИСТЕРСКАЯ ДИССЕРТАЦИЯ КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДОЕМОВ Г. АСТРАХАНИ Работа выполнена студентом группы ДББММ-21 Бареевой Алиной Шамильевной Руководитель ВКР к.б.н., доцент Гальперина Алина Равильевна Консультант по Консультант по Нормоконтролер к.б.н., доцент Пархоменко Анна Николаевна Допущена к защите «26» июня 2020 г. Заведующий кафедрой д.б.н., профессор Сопрунова О. Б. Астрахань 2020

2 СОДЕРЖАНИЕ Введение 4 Глава 1. Влияние антропогенного загрязнения на состояние поверхностных водоемов 7 1.1 Источники загрязнения поверхностных водоемов 7 1.2 Особенности загрязнения водоемов г. Астрахани 13 1.3 Обзор методов оценки состояния поверхностных водоемов 15 1.4 Применение люминесцентного анализа 21 Глава 2. Объекты и методы исследований 26 2.1 Объекты исследований 26 2.2 Методы исследований 29 2.2.1 Отбор проб воды 29 2.2.2 Метод определения общего числа микроорганизмов, образующих колонии на питательном агаре 29 2.2.3 Определение общего количества бактериальных клеток методом прямого микроскопического счета 30 2.2.4 Камеральная обработка проб пресноводного фитопланктона 31 2.2.5 Метод количественного учета водорослей 32 2.2.6 Оценка бактериальной загрязненности воды хемилюминесцентным экспресс-методом 33 2.2.7 Определение БПК скляночным методом по Винклеру 35 2.2.8 Определение химического потребления кислорода 36 2.2.9 Определение массовой концентрации нефтепродуктов в воде 38 Глава 3. Комплексная оценка состояния поверхностных водоемов г. Астрахани 39 3.1 Гидрохимические показатели качества поверхностных водоемов 39

3 3.2 Гидробиологические показатели качества поверхностных водоемов 45 3.3 Микробиологические показатели качества поверхностных водоемов 61 Заключение 83 Выводы 84 Список литературы 85 Приложение 1. Список работ, опубликованных по теме диссертации 95 Приложение 2. Методические указания по теме исследования 96 Приложение 3. Презентация магистерской диссертации 98

4 ВВЕДЕНИЕ В последние годы в системе охраны здоровья и санитарно– эпидемиологического заметное благополучия обострение ситуации населения вследствие страны растущего отмечается общего и специфического бактериального загрязнения воздушной среды, питьевой воды, продуктов питания, помещений и мест наибольшего скопления людей. Весь микромир по своему воздействию на окружающую среду отличается чрезвычайно разной степенью опасности эпидемиологического воздействия. Поэтому основной задачей обеспечения безопасности жизнедеятельности, особенно в зонах чрезвычайных ситуаций в урбанизированных районах, является оперативное определение в очагах заражения допустимого уровня концентрации как опасных патогенных микробных форм, так и всей массы микрофлоры, в том числе относящейся к санитарно–показательной группе КОЕ – колоний образующих форм (Игнатьева, 2016). В условии урбанизированных территорий водоемы подвергаются все возрастающей антропогенной нагрузке. Эта проблема требует особого внимания в связи с тем, что водоемы являются важным средообразующим фактором, поддерживающим экологическое состояние городской среды. Резкое возрастание бактериального загрязнения водоемов в значительной степени связано с ежегодно увеличивающимся числом аварийных сбросов неочищенных сточных вод, нарушением режима обеззараживания стоков, сбрасываемых предприятиями коммунального хозяйства (Заболотских, 2017). Необходимым инфекционного поверхностных очага условием в водоёмов снижения результате является риска образования бактериального заражения проведение санитарно– бактериологического контроля водных объектов. Традиционные методы этого контроля, основанные на высевании взятых водных проб на

5 специально подобранные питательные среды, не обеспечивают экспрессность (до 0,1 часа) получения оценки микробного загрязнения на самом объекте, что особенно важно при ликвидации чрезвычайных ситуаций. Классический метод посевов, имеющий свои достоинства и в ряде случаев являющийся единственно необходимым при санитарной оценке объектов по ГОСТу, не учитывает истинное количество микроорганизмов в воде, почве и других субстратах, поскольку известно, что большинство микроорганизмов не растёт на искусственных питательных средах (Михеева, 2011). В связи с этим поиск новых комплексных подходов по оценке экологического состояния водоемов является актуальным. Целью данной работы являлась оценка поверхностных водоемов города Астрахани. В связи с целью были поставлены следующие задачи: 1. Определить категорию водопользования воды по гидрохимическим показателям на основании ГОСТ 17.1.3.07– 82. 2. Вычислить сапробность воды по показателям в соответствии с ГОСТ 17.1.3.07– 82. 3. Определить класс качества воды по микробиологическим показателям согласно требованиям ГОСТ 17.1.3.07– 82. 4. Установить возможность применения хемилюминесцентного метода для оценки состояния воды. Научная новизна работы. Проведена комплексная оценка состояния водоемов урбанизированных территорий, подверженных значительной нагрузке загрязненными сточными водами, в которых развивается огромное количество различной микробиоты, превращающей водоток в канализационный коллектор. Установлена возможность использования хемилюминесцентного экспресс-метода для санитарно- бактериологического контроля водных объектов, позволяющая снизить

6 риск образования инфекционного очага в результате бактериального заражения поверхностных водоемов. Практическая значимость. Полученные в ходе исследования данные помогут выявить причины ухудшения экологического состояния исследуемых водоемов города Астрахань, а также предложить приемлемые методы защиты водотоков в условиях продолжающейся антропогенной нагрузки. Результаты могут быть использованы при проведении мероприятий по оздоровлению экологической обстановки Астрахани, а также сохранению хозяйственного и рекреационного потенциала города. Апробация работы. Основные положения были представлены на конференциях Всероссийской междисциплинарной научной конференции «Наука и практика-2019» (Астрахань, 21-26 октября 2019 г.) и 69-й Международной студенческой научно-технической конференции (Астрахань, 15-19 апреля 2019 г.). Публикации. По результатам работы опубликована статья в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК России (Приложение 1) и подготовлены Методические указания по теме «Комплексная (Приложение 2). оценка поверхностных водоемов г. Астрахани»

7 ГЛАВА 1. ВЛИЯНИЕ АНТРОПОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА СОСТОЯНИЕ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДОЕМОВ 1.1 Источники загрязнения поверхностных водоемов Поступление загрязняющих веществ в водные объекты обусловлено промышленными и городскими сточными водами, дренажными водами с орошаемых земель, сточными водами животноводческих комплексов, организованными (ливневая канализация, дренажные воды) и неорганизованными поверхностными стоками с территории поселений, промышленных площадок и сельскохозяйственных полей, а также водным транспортом (Трифонова, 2015). Сточными являются воды, образование которых происходит в процессе хозяйственно–бытовой или производственной деятельности человека или сток которых осуществляется с загрязненной территории. В результате их спуска или поступления загрязнений из других источников состав воды водного объекта может измениться (Ji, 2004). Как правило, сточные воды представляют собой сложную смесь компонентов разной химической природы и агрегатного состояния; нередко их температура выше температуры воды объекта, в который они поступают. В сточных водах постоянно происходят многообразные процессы трансформации, усложняющиеся при смешении с природной водой. При этом происходит нарушение процессов естественного самоочищения природной воды (Карелин, 2006). На всех континентах происходит антропогенное эвтрофирование водных объектов, в частности, озер и водохранилищ (интенсивное развитие фитопланктона, зарастание прибрежных мелководий высшей водной растительностью) (Carpenter, 2010). В результате в воде возникает дефицит растворенного кислорода, восстановительные процессы приводят к ухудшению органолептических свойств воды – появлению неприятного запаха и вкуса, повышению

8 цветности. Причиной таких нарушений является повышенное поступление в водные объекты биогенных элементов – азота и фосфора с городскими сточными водами, поверхностным стоком с сельскохозяйственных угодий, промышленными сточными водами некоторых производств (молочные, сахарные, крахмальные заводы и пр.) (Park, 2014). Например, со стоками с полей может поступать до 20–40 % внесенного с удобрениями азота и более 1,5 % фосфора. Большое количество фосфора поступает в водные объекты с детергентами, широко применяемыми как в промышленности, так и в быту. Одной из форм загрязнения водных объектов является термальное загрязнение сбрасываемых нагретых вод из систем водяного охлаждения агрегатов промышленных тепловых предприятий. и Обычно атомных температура электростанций, сбрасываемых термальных вод на 5–13 °С, а в некоторых случаях даже на 14–24 °С выше, чем природных (Тулина, 2006). Сброс нагретых вод приводит к существенному изменению термического режима, уменьшению насыщенности воды кислородом, изменению циркуляции воды, что отрицательно влияет на гидробиологические процессы и в конечном счете приводит к ухудшению санитарных показателей воды (Agus, 2011). На поверхности воды водного объекта за счет свободной энергии молекул воды образуется пленка поверхностного натяжения толщиной в одну или несколько молекул, способная удерживать мелкие организмы с несмачивающимися участками тела, частицы пыли (Крушенко, 2002). Ведущую роль в формировании этой пленки играют органические ПАВ, захватывающие с собой и другие загрязняющие компоненты. В ветреную погоду поверхностная пленка сбивается в хлопья пены. Пена с большой активной поверхностью способна сорбировать и переносить различные загрязнения, как при флотационных процессах в промышленности (Liu, 2013). Эти особенности поверхностного слоя воды необходимо учитывать при осуществлении санитарного надзора за местами купания, водного

9 спорта, а также при организации водозаборов для питьевых водопроводов (Архангельский, 2012). В результате использования населением водопроводной воды для удовлетворения культурно–бытовых и физиологических потребностей и последующего поступления использованной воды в канализационную сеть через санитарно–технические приборы образуются хозяйственно–бытовые сточные воды. Они загрязнены физиологическими выделениями человека, бытовыми, кухонными отходами, домовым мусором, в результате чего резко изменяются как их состав, так и свойства (Красовский, 2003). Большое санитарное значение имеет поступление в общую канализационную сеть города сточных вод больниц, общественных бань. Прачечные, фабрики химчистки и другие предприятия коммунального хозяйства, а также промышленные предприятия, расположенные в городской черте, часто сбрасывают свои стоки в городскую канализацию. В связи с этим сточные воды городской канализации называются «городские сточные воды». Они представляют собой смесь хозяйственно– бытовых и промышленных вод (Besmer, 2014). В результате эвтрофикации в водной экосистеме происходят следующие изменения: 1. Повышение содержания биогенных элементов в верхних горизонтах воды вызывает бурное развитие растений в этой зоне (в первую очередь фитопланктона, а также водорослей–обрастателей) и увеличение численности питающегося фитопланктоном зоопланктона. В результате прозрачность воды редко снижается, глубина проникновения солнечных лучей уменьшается, и это ведет к гибели донных растений от недостатка света. После отмирания донных водных растений наступает черед гибели прочих организмов, для которых эти растения являлись источником пищи или средой обитания (Bergstrom, 2010). 2. Сильно размножившиеся в верхних горизонтах воды растения (особенно водоросли) имеют намного большую суммарную биомассу. В

10 ночные часы фотосинтез в этих растениях не идет, тогда как процесс дыхания продолжается. В результате в предутренние часы теплых дней кислород в верхних горизонтах воды оказывается практически исчерпанным, и наблюдается гибель обитающих в этих горизонтах и требовательных к содержанию кислорода организмов, например, рыб (происходит так называемый «летний замор») (Ademollo, 2012). 3. Отмершие организмы рано или поздно опускаются на дно водоема, где происходит их разложение. Однако донная растительность в результате эвтрофикации погибла и производство кислорода здесь практически отсутствует. Если же учесть, что общая продукция водоема при эвтрофикации увеличивается, то в придонных горизонтах кислород расходуется значительно быстрее, чем образуется, и все это ведет к гибели требовательной к кислороду донных и придонных животных. Аналогичное явление, наблюдающееся во второй половине зимы в замкнутых мелководных водоемах, называется «зимним замором» (Berezina, 2017). 4. В донном грунте, лишенном кислорода, идет анаэробный распад отмерших организмов с образованием таких сильных ядов, как фенолы и сероводород, и столь мощного «парникового газа» (по своему эффекту в этом плане превосходящего углекислый газ в 120 раз), как метан. В результате процесс эвтрофикации уничтожает большую часть видов флоры и фауны водоема, и сильно ухудшает санитарно– гигиенические качества его воды, вплоть до ее полной непригодности для купания и питьевого водоснабжения. В дальнейшем такой водоем будет мелеть, на дне его из остатков отмерших организмов начнет образовываться торф, и в итоге он превратится в болото (Hafizan, 2011). Не следует думать, что эвтрофикация – это процесс, вызываемый исключительно вмешательством человека, т.к. в любой водоем в результате естественных процессов постепенно вымываются питательные вещества из окружающих его почв. Однако при воздействии человека этот

11 процесс резко убыстряется, и вместо нескольких тысяч лет эвтрофикация водоемов происходит за несколько десятков лет (Horvath, 2003). Эвтрофикация является наиболее распространенным типом загрязнения водоемов, однако не единственным. Кроме биогенных элементов, в водоемы в результате хозяйственной деятельности человека попадают различные нефтепродукты, токсичные пестициды, вещества токсичные – тяжелые металлы, компоненты промышленных стоков и так далее (Perelo, 2010). Очень опасны как для человека, так и биоты природных экосистем поступающие с бытовыми стоками синтетические моющие средства, которые благодаря вспениванию препятствуют поступлению кислорода в воду. Экологически опасны не только токсичные вещества, содержащиеся в сточных водах (Curcic, 2002). Мелкодисперсные волокна, выбрасываемые предприятиями по производству строительных и других материалов, способны забивать дыхательные системы водных организмов и вызывать их гибель. Большую опасность для экосистем водоемов со стоячей водой представляет накопление в них органики, поступающей с сельскохозяйственными (и особенно животноводческими) стоками, содержащими биогенные элементы, в том числе азот и фосфор (Fugeruas, 2010). В результате в водоеме развивается процесс эвтрофикации, т.е. повышения биологической продуктивности водных объектов вследствие накопления биогенных элементов, сопровождающейся так называемым цветением воды из–за массового размножения фитопланктона, сине– зеленых водорослей и высших водных растений. В результате вода становится непригодной для жизни (Иркитова, 2013). Главными источниками неблагоприятного влияния на поверхностные водоемы, их загрязнения являются сточные воды – жидкие отходы бытовой и производственной деятельности человека. Сточной называется вода, которая образовалась после использования питьевой воды человеком для удовлетворения тех или иных нужд в быту или на

12 производстве. При этом в воду попали дополнительные примеси (загрязнения), которые изменили и ухудшили ее состав (Чумакова, 2005). В зависимости от происхождения сточные воды делят на:  хозяйственно – бытовые, или хозяйственно– фекальные, образующиеся в результате хозяйственно– бытовой деятельности людей преимущественно в жилых и общественных зданиях;  промышленные, предприятиях, в образующиеся результате на технологических промышленных производственных процессов);  ливневые (атмосферные), образующиеся вследствие формирования поверхностного стока с асфальтовых и других покрытий и почвы во время атмосферных осадков и таяния снега. Они стекают в водоемы с территорий населенных мест, промышленных площадок и сельскохозяйственных полей;  городские, под которыми подразумевают смесь бытовых и промышленных сточных вод, образующихся в населенном пункте вследствие отведения неочищенных или предварительно очищенных промышленных сточных вод в общегородскую канализацию;  дренажные воды с орошаемых земель;  сточные воды животноводческих комплексов;  сточные воды прудов–накопителей, которые сбрасываются в водоемы в период весеннего паводка. Бывают случаи вынужденного сброса сточных вод из накопителей, при недостаточных расходах реки, в зарегулированные водоемы, в период паводка и др.;  сточные воды (фановые) пассажирских судов морского и речного (в том числе маломерного) флота, грузовых и нефтеналивных терминалов и судов (Кожевников, 2005). Кроме того, водоемы загрязняются при заборе песка и проведении других работ в их русле. К загрязнению водоемов приводит замачивание в них волокнистых растений, например, льна или конопли. Загрязняет

13 водоемы и сплав леса. Поверхностные водоемы могут загрязняться через атмосферный воздух. Водоемы могут также загрязняться вследствие массового отмирания в них водных организмов, животных и растительных, особенно в осеннее время, взмучивание донных отложений (Boulam, 2002). Поступая в водоемы, неочищенные или недостаточно очищенные сточные воды загрязняют их взвешенными частицами, органическими веществами, патогенными и условно–патогенными бактериями, вирусами, цистами простейших, яйцами гельминтов. С промышленными сточными водами в водоемы попадает значительное количество токсических химических веществ (Лабинская, 2004). Загрязненные водоемы теряют значение положительного фактора в поддержании здоровья населения. Пользование загрязненными водоемами может привести к возникновению водных эпидемий, массового отравления населения токсическими, канцерогенными, радиоактивными, аллергенными, мутагенными веществами. Водоемы наносят большой вред рыбному и пушному хозяйству, теряют оздоровительное значение (Леденев, 2002). Влияние загрязненных поверхностных водоемов на здоровье человека. Загрязнение поверхностных водоемов оказывает прямое и опосредованное действие на здоровье человека. Прямое вредное действие может проявиться, как при поступлении воды в организм человека перорально (человек сознательно пьет воду (Мазаев, 2014). 1.2 Особенности загрязнения водоемов города Астрахани В городах, таких как Астрахань, где проживают большие массы населения, широко развиты промышленные предприятия и транспорт, происходит образование новой среды обитания. Для неё характерны воздействия различного рода: высокий уровень загрязнений, специфический тепловой режим, эффекты взаимодействия примесей,

14 угнетение растительности, загрязнение водных источников. В городской черте в водный фонд включают р. Волгу и шесть малых рек, характеризующиеся загрязнением органическими и минеральными удобрениями (Болонина, 2013). Промышленные и коммунальные предприятия являются основными источниками загрязнения реки Волги. К доминирующим загрязняющим веществам относятся нефтепродукты, фенолы, тяжелые металлы, СПАВ (синтетические поверхностно активные вещества), соединения азота, сельскохозяйственные ядохимикаты. Большой спектр токсичных веществ, попадающих в водоемы со сточными водами, отрицательно влияют на качество природных вод, донных отложений и состояние обитателей водоемов (Эльпинер, 1999). В бассейне реки Волги сосредоточена основная часть промышленных предприятий России. На них, как правило, устaновлены устаревшие очистные сооружения, поэтому с них сбрасываются в Волгу и ее притоки сильно загрязненные воды (Бортник, 1997). Превалирующая часть загрязнений, которые обнаруживаются в водоемах Астраханской области, поступает сюда с предприятий, расположенных выше по течению, – в Волгограде, Саратове, Самаре, Нижнем Новгороде, Казани. На всем протяжении на Волгу оказывается сильное воздействие антропогенных факторов. Т.к. самоочищения веществами, объем водная и токсичность экосистема поступающими со не превышают справляются стоками. Сточные возможности с токсичными воды, которые сбрасываются астраханскими предприятиями и коммунальным хозяйством загрязняют реку в низовьях (Жижимова, 2010). В Астраханском регионе основными источниками загрязнения поверхностных водоемов являются объекты жилищно–коммунального хозяйства г. Астрахани, сбрасывающие 82 % всех загрязненных вод области. Большая часть очистных сооружений, не соответствующая современным требованиям, нуждается в реновации, на которую не хватает

15 средств. По этой же причине на ряде предприятий наблюдается нарушение сроков строительства очистных сооружений (Кондрашин, 2003). Сильно загрязняют р. Волгу предприятия сельского хозяйства, сбрасывающие в водные объекты коллекторно–дренажные воды с превышенным уровнем минерализации и остаточного количества ядохимикатов. Нефтеналивные базы в порту г. Астрахани, дислоцированная Каспийская флотилия, а также проходящие через порт нефтеналивные суда из Азербайджана, Казахстана, Ирана, Туркменистана создают экологическую напряженность в дельте р. Волги. На территории области через р. Волга проходят газо– и нефтепроводы. Все это обусловливает усиление экологической опасности на водной акватории (Жижимова, 2010). 1.3 Обзор методов оценки состояния поверхностных водоемов Традиционные методы определения содержания бактерий широко используются для анализа состояния окружающей среды. Наряду с традиционными методами, большое распространение получили косвенные инструментальные методы, однако такие методы зачастую обладают рядом недостатков, такими как дорогостоящее оборудование, сложная пробоподготовка и длительное время анализа. В обзоре авторами (Douterelо, 2014) рассмотрены методы определения гетеротрофных бактерий в питьевой воде путем посева исследуемого образца на твердую питательную среду с последующим культивированием при температуре от 20 °С до 37 °С в течении различных промежутков времени (от нескольких часов до нескольких суток). Для повышения чувствительности такого подхода в питательную среду добавляли различные ферменты, которые при контакте с определенными микроорганизмами вызывают видимое изменение цвета анализируемой пробы (Douterelо, 2014).

16 Авторами (Nnane, 2011) применен метод Коха для определения количества энтерококковых микроорганизмов в воде путем культивирования исследуемой пробы воды в питательном агаре в течение 18 – 24 часов при температуре 44,5 °С. Подсчет клеток в счетных камерах применяется для определения относительно крупных объектов, таких как клетки водорослей, дрожжей, спор грибов. Содержание клеток в исследуемом субстрате должно быть не менее 1*10 6. Так же необходимо учитывать, что в счетных камерах подсчитываются как живые клетки, так и мертвые (Nnane, 2011). Подсчет клеток преимущественно на фиксированных применяется для окрашенных определения мазках численности микроорганизмов в естественных субстратах – почве, воде, оптически непрозрачных средах. Для анализа готовят препарат, который наносят на предметное стекло, помещенное на миллиметровую бумагу. Исследуемую субстанцию равномерно распределяют по поверхности предметного стекла, подсушивают на воздухе, фиксируют 96%-ным спиртом и окрашивают красителем. Затем препарат промывают и микроскопируют (Kusić, 2014). В работе (Cragg, 2014) представлен способ прямого подсчета клеток с использованием флуоресцентной микроскопии. Исследуемый материал пропускался через фильтры и окрашивался красителем акридиновым оранжевым. исследовались Фильтры, под на которых микроскопом, оседали окрашенные оснащенным УФ клетки, лампой для возбуждения флуоресценции (Cragg, 2014). Существует множество альтернативных косвенных методов определения содержания бактерий, без применения питательных сред и микроскопии. В работе описывается способ определения качества воды, основанный на исследовании устойчивости к антибиотикам содержащихся в воде бактерий. По увеличению количества популяций таких

17 микроорганизмов судят о неблагоприятном состоянии водного источника (Harnisz, 2013). Высокую экспрессность микробиологического анализа можно достичь, используя способ проточной цитометрии. Данный метод основан на измерении светорассеяния частицами, содержащимися в исследуемом объекте или на флуоресценции химических соединений, входящих в состав клеток, или внесенных в образец непосредственно перед анализом (Prest, 2013). В патенте № 2698651 предложен способ определения сапробности гидробионтов для оценки экологического состояния водоемов, состоящий в том, что отбирают пробы гидробионтов из водоема, определяют видовой состав организмов в пробе и получают очищенную ДНК этих организмов. Далее получают последовательности генов с последующей трансляцией в последовательности маркерных белков, пополняют полученными первичными последовательностями генов и белков международные базы данных с последующей выборкой первичных последовательностей ДНК/РНК и белков гидробионтов водоемов. На основе выборки выполняют реконструкцию молекулярного филогенетического дерева, применяя бутстреп метод. Проводят анализ кластеров по сапробности. При группировке в один кластер не индикаторных гидробионтов с индикаторными гидробионтами одной сапробности с бутстреп значением более 50% делают вывод о принадлежности гидробионтов к данной группе индикаторных организмов, присваивая им сапробность данной группы, пополняют списки видов индикаторных организмов с указанием сапробности. Изобретение обеспечивает сокращение сроков, повышение точности и достоверности оценки экологического состояния водоема (Патент № 2698651). Привлекает внимание устройство для экспресс-анализа биохимического потребления растворенного кислорода. Оно содержит измерительный резервуар, выполненный в виде проточной

18 амперометрической ячейки, включающий электрод сравнения и рабочий электрод в виде амперометрического датчика растворенного кислорода, блок коммутации, вычислительный блок суммирования, вычислительный блок вычисления и сравнения, вычислительный блок измерения и индикации. При этом устройство снабжено блоком водоподготовки, амперометрическая ячейка снабжена мембраной, помещенной перед рабочим электродом, с иммобилизованным на ней активным илом, а электрод сравнения и рабочий электрод выходами подключены к входам вычислительного блока сравнения и вычислительного блока суммирования, выход вычислительного блока суммирования соединен с входом вычислительного раскрывается способ блока измерения экспресс-анализа и индикации. Также биохимического потребления растворенного кислорода с использованием описанного выше устройства. Группа изобретений обеспечивает расширение функциональных возможностей и повышение точности анализа (Патент № 2608443). В патенте № 2576030 предложен способ, в котором используют пробы с различной концентрацией колониеобразующих единиц (КОЕ) бактерий. При возбуждении ультрафиолетовым излучением определяют интенсивность флуоресценции Iфл каждой пробы, а также интенсивность флуоресценции Iфлк контрольной пробы, содержащей дистиллированную воду при длине волны λфл=415±10 нм. Затем строят калибровочную кривую зависимости между КОЕ и значением Iфл-Iфлк в каждой пробе, определяют флуоресценцию Iфла анализируемой пробы и значение Iфла-Iфлк, по калибровочной кривой определяют соответствующую Iфла-Iфлк концентрацию КОЕап в анализируемой пробе. В случае превышения КОЕап допустимого значения микробиологическую более чем загрязненность на заданную оценивают как величину опасную. Изобретение обеспечивает точность оценки инфекционной опасности воды, упрощает и сокращает время определения и может быть

19 использовано для мониторинга процесса очистки сточных вод (Патент № 2576030). В патенте № 2695154 представляют способ, включающий отбор проб воды и измерение ее спектральной прозрачности с использованием спектрофотометра на длине волны 430 нм. В качестве эталонной жидкости используют дистиллированную воду. Рассчитывают спектральный показатель ослабления света в воде и определяют трофический уровень, который соответствует диапазону значений спектрального показателя ослабления, а именно олиготрофный от 0 до 2 м -1, мезотрофный от 2 до 3 м-1, эвтрофный от 3 до 23 м-1, гиперэвтрофный от 23 до 60 м-1. Изобретение обеспечивает оперативное определение трофического уровня пресноводных водоемов (Патент № 2695154). В патенте № 268874 предложен метод определения токсичности проб, содержащих нефтепродукты, включающий инкубирование тестовых микроорганизмов Pseudomonas yamanorum VKM B-3033 D в количестве от 5×105 до 5×106 жизнеспособных клеток на мл в жидкой питательной среде в течение 10-20 ч при 15-25 °С в присутствии тестируемых проб и в их отсутствие. Измеряют интенсивность света (I od), оптическую плотность (Auv) и интенсивность фотофлуоресценции (I ff). Общую степень активирования или ингибирования (+/-) жизнедеятельности тестовых микроорганизмов тестируемыми пробами. Способ может обеспечить повышение объективности и расширение области применения определения токсичности проб (включая пробы, содержащие значительные количества различных нефтепродуктов и других подобных им углеводородов) (Патент № 268874). В патенте № 2492641 измеряют гидробиологические показатели – индекс сапробности по Пантле и Букку в модификации Сладечека. Одновременно измеряют гидрохимические показатели – водородный показатель, химическое потребление кислорода, концентрация растворенного кислорода и электропроводность. Рассчитывают сводный

20 показатель по формулам. Сравнивают полученное значение сводного показателя и по результатам судят об экологическом состоянии водоема. Изобретение позволяет ускорить определение экологического состояния водоема по гидрохимическим и гидробиологическим показателям (Патент № 2492641). Вызывает интерес устройство, представленное в патенте № 120101 и предназначенное для анализа материалов особыми способами, в частности, к определению степени загрязнения компонентов природной среды (атмосферного воздуха, воды поверхностных водоемов, почвы) методом биотестирования и может использоваться для экспресс-биотестирования токсичности, в частности природных и сточных вод, на различных тестобъектах. Базовыми тест-объектами, на работу с которыми настроена полезная модель, являются инфузория туфелька и половые клетки млекопитающих. Наряду с этим полезная модель позволяет проводить оценку состояния компонентов природной среды и по другим тестобъектам (например, цериодафнии). Использование двух независимых тест-объектов: простейшие млекопитающих) компонентов объективность – (инфузории), обеспечивает природной получаемых среды высшие комплексность и, как результатов. (половые оценки следствие, Простота и клетки качества необходимую компактность конструкции устройства обеспечивает ему высокую мобильность и позволяет оперативно проводить экспресс-оценку качества компонентов природной среды в условиях максимально приближенных к местам отбора проб (Патент № 120101). Обращает внимание устройство, предложенное в патенте № 163653, для оценки загрязненности донных отложений водных объектов нефтью и нефтепродуктами включает распылитель воздуха, гибкий шланг, корпускомпрессор. Отличается тем, что оно снабжено клавиатурой, имеющей несколько кнопок по числу оценок в баллах степени загрязнения донных отложений, модулем временных и геодезических координат и блоком

21 памяти, куда записывается в электронном виде информация о дате и времени измерения, координатах точки измерения, степени загрязнения донных отложений в баллах (Патент № 163653). В патенте № 2420734 предложен способ биоиндикации водоемов, включающий отбор проб обитающих в водоеме планктонных организмов, определение уровня загрязнения путем филогенетического анализа генов 18S рРНК и COI планктонных организмов в пробе, оценку результатов анализа, разработку рекомендаций, их выполнение и контроль результатов выполнения восстановительных мероприятий путем повторной биоиндикации (Патент № 2420734). Традиционные методы определения содержания бактерий по сей день широко используются для анализа состояния окружающей среды. Наряду с традиционными методами, большое распространение получили косвенные инструментальные методы анализа, однако такие методы зачастую обладают рядом недостатков, такими как дорогостоящее оборудование, сложная пробоподготовка, длительное время анализа. Наиболее активно окружающей среды развивающимся является методом метод анализа люминесценции. состояния Высокая чувствительность и экспрессность делают метод люминесцентного анализа незаменимым при анализе субстратов различной природы. 1.4 Применение люминесцентного анализа Люминесцентные методы анализа включают в себя исследования с использованием флуоресценции (флуориметрия) и фосфоресценции (фосфориметрия). В аналитических целях люминесцентный анализ применяется для идентификации веществ, для обнаружения малых концентраций веществ, для контроля изменений, претерпеваемых веществом, для определения степени чистоты веществ. Высокая чувствительность метода позволяет

22 фиксировать малую степень превращения веществ, а иногда по люминесценции промежуточных соединений становится возможным установить механизм химической реакции (Jia, 2012). Известно, что интенсивность флуоресценции биологических объектов незначительна из-за малой величины квантовых выходов и низкой концентрации флуоресцирующих компонентов. Чтобы это компенсировать требуется увеличение чувствительности измеряющей аппаратуры, тщательная фокусировка света, выбор оптимальных условий регистрации флуоресценции, позволяющих исключить влияние возможных примесей, оптики и «паразитного» свечения кювет (Ma, 2014). Образование соединений многих не люминесцирующих в водных растворах катионов с молекулой органического реагента сопровождается изменением или появлением люминесценции этого реагента. Например, ион натрия с цинк-уранилацетатом дает зелено-желтую люминесценцию, а бериллий с морином образует комплекс, люминесцирующий ярко-зеленым цветом. Задача качественного анализа усложняется, когда смесь состоит из нескольких люминесцирующих веществ; в этом случае применяют светофильтры или сочетание люминесцентного анализа с хроматографическим. Наиболее избирательные методы анализа основаны на спектральном разложении света люминесценции и изучения спектральных характеристик люминесценции спектрофотометрическим методом (Olaniran, 2011). Количественный люминесцентный анализ – основан на зависимости между интенсивностью люминесценции и концентрацией анализируемого вещества, т. е. на пропорциональности интенсивности люминесценции количеству поглощающих и излучающих центров и доле поглощенного света. Флуометрические измерения выполняются как визуально, так и с помощью аппаратурных методов регистрации возникающего излучения (Ravikumar, 2012).

23 Наиболее широко люминесцентные измерения используются как методы анализа протекающих биохимических и химических реакций, а также для кинетических исследований быстрых реакций электронновозбужденных молекул. Особую роль данный метод играет в микробиологических исследованиях. Известно, что все микроорганизмы содержат в своем составе компоненты, способные к флуоресценции в различных областях. В УФ области – это белки и нуклеиновые кислоты, в видимой области – коферменты метаболизма, в ближней ИК области – порфирины, цитохромы. Рассматривая различные классы бактерий можно выделить один компонент, общий для всех микроорганизмов – это кофермент процесса метаболизма никотинамидадениндинуклеотид (NADH) (Rozhko, 2011). В патенте № 2413771 предлагают экспресс-способ, который включает приготовление рабочей и контрольной биолюминесцентных проб на основе ферментов и измерение кинетики биолюминесценции. Причем при приготовлении биолюминесцентный иммобилизованные контрольной биомодуль, пробы включающий используют совместно ферменты и субстраты биферментной системы светящихся бактерий с добавлением дистиллированной воды или фосфатного буфера. При этом критерием токсичности воды является снижение на 20 % и более или увеличение на 20 % и более величины максимальной интенсивности свечения биолюминесценции, измеряемой в рабочей пробе по сравнению с этими параметрами в контрольной пробе. Изобретение позволяет повысить чувствительность экспресс-способа биотестирования природных, сточных вод и водных растворов (Патент № 2413771). Предложенный в патенте № 2538707 способ определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проводимого в колонке тест-системы твердофазного иммуноферментного анализа заключается в том, что в колонке тест-

24 системы размещают носитель, в качестве которого используют активированную твердую фазу физической сорбции – активированную пористую подложку с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, производят обработку носителя блокирующим раствором для закрытия на носителе оставшихся свободными мест неспецифического связывания, вносят тестируемые образцы, содержащие определенное количество предварительно введенных специфичных к токсиканту антител, при этом производят обработку носителя конъюгатсодержащим раствором, в антивидовых качестве антител, которого химически используют связанных раствор с конъюгата люминесцентными квантовыми точками или с липосомами, содержащими люминесцентные квантовые точки, а уровень токсикантов определяют путем освещении обработанного носителя возбуждающим излучением по интенсивности люминесценции, возбужденной в квантовых точках. Тест-система для данного способа включает колонку, в которой установлен носитель в виде активированной твердой фазы физической сорбции – активированной пористой подложки с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, при этом колонка снабжена устройством для измерения уровня люминесценции, включающим источник возбуждающего излучения и фотоприемник, причем перед фотоприемником дополнительно установлена фокусирующая оптическая система, а выход фотоприемника электрически подключен через усилитель сигнала и аналого-цифровой преобразователь к блоку управления – контроллеру, к выходу которого подключены блок индикации и через блок стабилизации источник возбуждающего излучения, при этом боковые стенки колонки выполнены из прозрачного для возбуждающего и люминесцентного излучения материала. Изобретение повышает эффективность и достоверность определения (Патент № 2538707). В патенте № 2431132 осуществлен способ, при котором в исследуемый раствор добавляют заданное количество белка и

25 люминесцентного зонда, деоксигенируют его, затем полученный раствор облучают импульсным источником света. Определяют люминесцентнокинетические характеристики выхода фосфоресценции зонда и сравнивают их с люминесцентно-кинетическими характеристиками предварительно подготовленного эталонного водного раствора. По изменению интенсивности и времени жизни фосфоресценции люминесцентного зонда судят о наличии тяжелых металлов в исследуемом растворе. Устройство содержит: импульсный источник света, блок питания источника света, параболическое зеркало, кювету, светофильтры, линзу, фотоэлектронный умножитель (ФЭУ), блок управления задержкой ФЭУ и блок синхронизации. Технический результат – исключение влияния рассеянного света на результаты анализа (Патент № 2431132). Вызывает интерес изобретение, описанное в патенте № 2696824 относящееся к области люминесцентного анализа вещества. При осуществлении способа формируют мультизондовую систему и проводят калибровку ее отклика к воздействию тестовых ионов тяжелых металлов в растворе. Для этого тестовый раствор смешивают с раствором мультизондовой системы, воздействуют на раствор источником света и записывают спектры флуоресценции всех зондов системы. По полученным данным формируют неизвестного базу раствора к данных. нему При анализе добавляют ионного малые состава концентрации мультизондовой системы, воздействуют на раствор источником света и записывают спектры флуоресценции всех зондов системы. Набор максимальных значений интенсивности флуоресценции зондов системы используют как компоненты векторного отклика системы для обработки методами распознавания образов. Полученные данные сравнивают с данными, записанными в базе данных. Технический результат заключается в повышении эффективности распознавания вида ионов тяжелых металлов и обеспечении возможности определения их концентрации (Патент № 2696824).

26 ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1 Объекты исследований В качестве объектов исследования выбраны поверхностные водоемы г. Астрахань: река Волга и водоток Кутум. Пробы отобраны в четырех точках: точка №1 –р. Волга, Комсомольская набережная (в районе д. 19) (рис. 1а), точка №2 – в. Кутум, Калининский мост (рис. 1б), точка №3 – в. Кутум, Ямгурчевский мост (рис. 1в), точка №4 – в. Кутум, Студенческий мост (рис. 1г). Точки отбора проб указаны на карте–схеме города Астрахани (рис. 2). а

27 б в

28 г Рис. 1 Точки отбора проб: а - точка №1 (река Волга, Комсомольская набережная); б - №2 (водоток Кутум, Калининский мост); в - № 3 (водоток Кутум, Ямгурчевский мост); г - №4 (водоток Кутум, Студенческий мост) Рис. 2 Карта–схема отбора проб

29 2.2 Методы исследований 2.2.1 Отбор проб воды Для отбора проб воды использовали специально предназначенную для этих целей одноразовую посуду, изготовленную из материалов, не влияющих на жизнедеятельность микроорганизмов. После наполнения емкость закрывали стерильной пробкой, обеспечивающей герметичность и не намокающей при транспортировании и стерильным колпачком. Поверхностные пробы отбирали с глубины 10–15 см от поверхности воды. Отобранную пробу маркировали и сопровождали сведениями с указанием места, даты, времени забора и другой информацией (температуры воды, погодных условий). Транспортировали в лабораторию с соблюдением условия, чтобы срок начала исследований от момента отбора проб не превышал 6 ч (МУК 4.2.1884–04). 2.2.2 Метод определения общего числа микроорганизмов, образующих колонии на питательном агаре Для определения общего числа микроорганизмов, образующих колонии на питательном агаре использовали метод, позволяющий определять в воде общее число мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (ОМЧ), способных образовывать колонии на питательном агаре при температуре 37 °С в течение 24 часов, видимые с увеличением в 2 раза. Из каждой пробы отобранной воды сделан посев двух объемов по 1 мл. После тщательного перемешивания пробы воды вносили по 1 мл в стерильные чашки Петри, сразу же в каждую чашку вливали 6–8 мл расплавленного и остуженного до 45–46 °С питательного агара. Затем смешивали содержимое чашек, равномерно распределяя по всему дну, избегая образования пузырьков воздуха, попадания агара на края и крышку чашки. После застывания агара чашки с посевами

30 помещали в термостат при температуре 37 °С на 24 часа. По истечении 24 ч. подсчитали все выросшие на чашке колонии, наблюдаемые при увеличении в 2 раза. Подсчет производили только на тех чашках, на которых выросло не более 300 изолированных колоний. Подсчитанное количество колоний на каждой чашке суммировали и делили на два. Результат выражали числом колоний образующих единиц (КОЕ) в 1 мл исследуемой пробы воды (МУК 4.2.1018–01). 2.2.3 Определение общего количества бактериальных клеток методом прямого микроскопического счета Для количественного учета бактерий использовали метод Звягинцева и Кожевина. Суть его в том, что приготовленные препараты окрашивают флуорохромом – акридином оранжевым. Окрашенные ярко– зеленые клетки хорошо заметны на темном фоне препарата (Асеева, 1991). Перед приготовлением препаратов колбу энергично встряхивали, суспензию наносили микропипеткой на обезжиренные предметные стекла (0,01 мл на препарат) и равномерно распределяли на площади 4 см 2 (квадрат 2 х 2 см). Фиксировали нагреванием и окрашивали препарат водным раствором акридинового оранжевого (разведение 1:10000, 2–4 мин). Для удаления избытка флуорохрома стекла погружали на 10 мин в стакан с водопроводной водой. После высушивания при комнатной температуре препараты просматривали в люминесцентном микроскопе. Для микроскопирования на препарат наносили каплю воды и закрывали обезжиренным покровным стеклом. Готовили два препарата и в каждом препарате просматривали 20 полей зрения, чтобы данные были математически достоверными. Количество бактериальных клеток в 0,01 мл воды рассчитывали по следующей формуле (1): M = N * ¯K, (1)

31 где N – количество полей зрения, которые размещаются на площади мазка (S) определяется по формуле (2); ¯K – среднее количество клеток в поле зрения (3). N= (2) , P – площадь мазка, мм2; S – площадь поля зрения, мм2. Диаметр поля зрения измеряли при помощи объектного микрометра. ¯K = , (3) n – количество полей зрения, в которых был произведен подсчет бактерий (Куликова, 2004). 2.2.4 Камеральная обработка проб пресноводного фитопланктона Для оценки качества воды по развитию фитопланктона и его индикаторным видам использовали метод Пантле и Букку в модификации Сладечека. Отбор проб осуществляли в чистые 0,5 л стеклянные бутылки темного цвета. Темное стекло предотвращает обесцвечивание хлорофилла водорослей при хранении пробы. Пробы фитопланктона собирали в поверхностном слое воды простым зачерпыванием. Пробу фиксировали 4 % формалином. Пробы фитопланктона доставили в лабораторию, поместили на ровное и защищенное от прямых солнечных лучей место. Сгущение проб осадочным методом проводили после их предварительной фиксации и отстаивания в темном месте в течение 15 – 20 дней путем отсасывания среднего слоя воды с помощью стеклянной трубки. Отсасывание проводили медленно и осторожно, чтобы не допустить нарушения осадка и засасывания поверхностного слоя пробы. При изучении видового состава водорослей измеряли их размеры, являющиеся важными диагностическими признаками. Для измерения

32 микроскопических объектов применяли окуляр–микрометр с измерительной линейкой. Цену делений окуляр–микрометра определяли с помощью объект–микрометра (предметное стекло с нанесенной на ней линейкой, цена каждого деления которой 10 мкм), индивидуально для каждого микроскопа и объектива. Для оценки качества водных объектов вычисляли индекс сапробности (S) по формуле (4): (4) где s – индикаторная значимость каждого вида (определяется по атласу сапробных организмов); h – величина, которая находится из шестиступенчатой шкалы значений частоты и определяет относительное количество видов (Садчиков, 2003). 2.2.5 Метод количественного учета водорослей Для количественного учета водорослей пользовались камерами Горяева. При использовании камеры Горяева покровное стекло тщательно притирали к боковым поверхностям предметного счетного стекла до появления колец Ньютона, а затем заполняли камеру каплей исследуемой пробы с помощью пипетки. Просчитывали либо часть дорожек (квадратов) на поверхности счетного стекла. При исследовании количественных проб фитопланктона пересчитывали численность организмов на 1 л воды по формуле (5): N=n*k(A/a)*v*(100/V), (5) где N – количество организмов в 1 л воды исследуемого водоема (культуральной жидкости); k – коэффициент, показывающий во сколько раз объем счетной камеры меньше 1 см3;

33 n – количество организмов, обнаруженных на просмотренных дорожках (квадратах); А – количество дорожек (квадратов) на счетной пластинке (в камере); а–количество дорожек (квадратов), на которых производился подсчет водорослей; V – первоначальный объем отобранной пробы (см3); V – объем сгущенной пробы (Садчиков, 2003). 2.2.6 Оценка бактериальной загрязненности воды хемилюминесцентным экспресс-методом Для определения общей обсемененности водной суспензии по содержанию внутриклеточного АТФ использовали набор «Люмтек». Из анализируемого образца воды отбирали 0,3 мл, вносили её в фильтравету и продавливали поршнем раствор через фильтравету так, чтобы жидкость впиталась в бумагу. Переносили фильтравету с помощью пинцета в кюветное отделение люминометра, добавляли в нее 0,02 мл раствора АТФ– контроля, по истечении двух минут добавляли 0,1 мл раствора АТФ– реагента. Быстро перемешивали и измеряли биолюминесцентный сигнал образца. Рассчитывали концентрацию АТФ в 1 мл исследуемого образца по формуле (6): [АТФ]обр = 0,25 * (Iобр/Iконтр), пикомоль/мл, (6) где Iобр – среднее значение биолюминесцентного сигнала для образца; Iконтр – биолюминесцентный сигнал для АТФ–контроля

34 По таблице 1 определяли содержание микробных клеток в анализируемом образце воды. Таблица 1 Диапазоны определения общей обсемененности водной суспензии с помощью набора «Люмтек» Концентрация АТФ в анализируемом образце воды, пикомоль/мл До 0,004 0,004–0,01 0,01–0,1 Более 0,1 Содержание микробных клеток в анализируемом образце воды, тысяч КОЕ/мл Менее 50 50–100 100–1000 Более 1000 При работе с образцами воды перед проведением серийных измерений проводили измерения концентрации АТФ в анализируемом образце воды и определяли величину КОЕ\мл методом посева разведений. На основании полученных величин построили калибровочную зависимость величины КОЕ/мл от измеряемой концентрации АТФ в образце для более точного определения общей микробной обсемененности образцов воды, представленную на рисунке 3 (Сопрунова, 2017). Рис. 3 Калибровочная зависимость величины КОЕ/мл от измеряемой концентрации АТФ в анализируемом образце

35 2.2.7 Определение БПК скляночным методом по Винклеру Метод основан на использовании растворенного кислорода, содержащегося в определенном объеме воды, для окисления гидроксида марганца (II) в оксид марганца (IV). К исследуемой воде добавляли хлорид или сульфат марганца и гидроксид натрия для того, чтобы получить легко окисляющийся осадок гидроксида марганца (II): MnSO4 + 2 NaOH = Mn(OH)2 + Na2SO4 Гидроксид марганца (II) окисляется кислородом в оксид марганца (IV): 2Mn(OH)2 + O2 = 2 MnO2↓ + 2Н2О Оксид марганца (IV) окисляет в кислой среде KJ с образованием свободного иода в количестве, эквивалентном кислороду. MnO2 + 2H2SO4 + 2 KI = MnSO4 + K2SO4 + I2 + 2 H2O Выделяющийся йод титруют раствором тиосульфата натрия в присутствии крахмала. I2 + 2 Na2S2O3 = 2 NaI + Na2S4O6 Пробы воды отбирали в прокалиброванные стеклянные емкости с притертой пробкой вместимостью 250 см 3. Для калибровки сначала взвешивали сухую емкость с пробкой, затем наполняли ее доверху водой, закрывали пробкой и снова взвешивали. По разнице масс определяли массу воды в колбе и ее объем (для пресной воды плотность близка к 1 кг/дм3). Склянки опускали на глубину 0,5 м, вынимали и закрывали пробкой так, чтобы под пробкой не образовались пузырьки. Сразу же фиксировали кислород, для чего в склянки при помощи пипетки на 2 см3, погружая ее до дна, вносили 2 см3 раствора MnSO4 или MnCl2. Другой пипеткой в верхнюю часть склянки вносили 2 см3 щелочного раствора KI. Склянку осторожно закрывали пробкой так, чтобы под пробкой не осталось пузырьков воздуха. При этом из склянки выливается 4 см3 исследуемой воды, т.е. столько, сколько наливали реактивов. Затем

36 жидкость перемешивали перевертыванием. Перед титрованием (осадок должен хорошо осесть) прилили 4 см3 Н2SO4 (1:4), часть жидкости переливается через край. При этом раствор H2SO4 вносили пипеткой в нижнюю часть склянки. Закрывали склянку пробкой и перемешивали до растворения осадка MnO2. После этого всю пробу перелили в коническую колбу для титрования вместимостью 500 см3 и быстро титровали 0,01н. раствором тиосульфата натрия при непрерывном помешивании до соломенно-желтого цвета после чего добавляли 1 см3 крахмала и продолжили титровать до исчезновения синей окраски. Содержание растворенного кислорода (Х) в мг/дм 3 производилось по формуле (7): БПК= * 1000, (7) где VТ – объем тиосульфата натрия, пошедшего на титрование, см 3; Н – концентрация тиосульфата натрия, моль-экв/дм3; Vпробы – объем пробы в склянке, см3; V1 – объем реактивов, добавленный до образования Mn(OH)2, см3; 1000 – коэффициент для перевода от граммов к миллиграммам; ЭО2 – эквивалент кислорода, г/моль-экв; К – коэффициент поправки к концентрации титранта (Пименова, 2011). 2.2.8 Определение химического потребления кислорода Отбирали такой объем анализируемой сточной воды, чтобы на окисление расходовалось не более 20 см 3 стандартного раствора дихромата калия и чтобы в ней содержалось не более 40 мг хлорид-ионов, разбавили до 50 см3 дистиллированной водой и перенесли в круглодонную колбу

37 вместимостью 300 см3. Прибавили 1 г сульфата ртути (II), 5 см3 серной кислоты, перемешивали до растворения сульфата ртути, затем влили 25,0 см3 стандартного раствора дихромата калия. Очень осторожно, малыми порциями вливали 70 см3 серной кислоты, всыпали 0,4 – 0, 5 г сульфата серебра, вводили в колбу несколько стеклянных бусин или кусочков пемзы, закрывали пробкой, соединенной с обратным холодильником, и нагревали при слабом кипении 2 часа. Затем охлаждали, обмывали стенки холодильника 25 см3 дистиллированной воды и перенесли содержимое этой колбы в коническую колбу вместимостью 500 см 3, обмывая стенки первой колбы несколько раз дистиллированной водой. Добавили дистиллированную воду до объема 350 см 3, вводили 3 – 4 капли раствора ферроина или 10 – 15 капель раствора N – фенилантраниловой кислоты и оттитровывали избыток дихромата титрованным ратвором соли Мора. При титровании раствор вначале приобретал фиолетовую окраску, а затем изумрудно-зеленую, что являлось сигналом окончания титрования. Проводили холостой опыт; для этого брали 50 см3 дистиллированной воды и проводили ее через все ступени анализа. Химическое поглощение кислорода (ХПК), выраженное числом миллиграммов кислорода на 1 дм3 сточной воды, вычисляли по формуле (8): ХПК= , (8) где V1–объем раствора соли Мора, израсходованного на титрование в холостом опыте, см3; V2 – объем раствора соли Мора, израсходованного на титрование пробы, см3; H – концентрация титрованного раствора соли Мора, моль-экв/дм3; ЭО2 – эквивалент кислорода, 8 г/моль-экв.; Vпробы – объем анализируемой сточной воды, см3;

38 1000 – коэффициент для перехода от граммов к миллиграммам (Пименова, 2011). 2.2.9 Определение массовой концентрации нефтепродуктов в воде Пробу воды, в которой необходимо определить содержание нефтепродуктов, переносили в делительную воронку вместимостью 250 мл. При помощи пипетки отбирали 10 мл гексана и ополаскивали им сосуд, в котором находилась проба. Гексан помещали в делительную воронку. Смесь перемешивали 1 мин, отстаивали до появления прозрачного верхнего слоя, который отделили, переносили в кювету и измеряли концентрацию нефтепродуктов в экстракте на приборе «Флюорат-02-2М» в режиме «Измерение». Водную фазу собирали в мерный цилиндр вместимостью 100 – 200 см3 и фиксировали ее объем. Если концентрация нефтепродуктов в экстракте в диапазоне концентраций 10-50 мг/дм3, то допускалось измерения без разбавления экстракта (ПНД Ф 14.1:2:4.128-98).

39 ГЛАВА 3. КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДОЕМОВ ГОРОДА АСТРАХАНИ Пробы отобраны в осенний, зимний и весенний периоды в соответствии с общепринятой методикой и были доставлены в лабораторию с соблюдением правил транспортировки. Осенью отобраны 15 сентября, погодные условия: температура воздуха + 25 °C, атмосферное давление 762 мм.рт.ст., скорость ветра 5 м/с, направление восточное, облачно, температура воды +23 °C ; погодные условия в день отбора зимой (6 февраля): температура воздуха: + 5 °C, атмосферное давление 773 мм.рт.ст., скорость ветра 4 м/с, направление восточное, пасмурно температура воды +3 °C; погодные условия в день отбора весной (10 марта): температура воздуха: + 11 °C, атмосферное давление 763 мм.рт.ст., скорость ветра 24 м/с, направление восточное, ясно, температура воды +4 °C. В г. Астрахани все городские каналы являются искусственно созданными рукавами р. Волги. Водоток Кутум питается транзитными водами р. Волги и протекает по территории г. Астрахани. Вдоль водотока по правому и левому берегам расположены автомобильные дороги и многочисленные поселения, что повышает угрозу загрязнения воды Кутума. 3.1 Гидрохимические показатели качества поверхностных водоемов Химическое потребление кислорода (ХПК) — показатель содержания органических веществ в воде, который показывает количество кислорода (или другого окислителя) затраченное на окисление органических соединений в пробе. В настоящее время ХПК считается одним из наиболее информативных показателей антропогенного

40 загрязнения вод. Показатели ХПК проб воды поверхностного горизонта водоемов, определенные титриметрическим методом, представлены на рисунке 4. норма ПДК по ГОСТ 17.1.3.07. –82 Рис. 4 Показатели ХПК проб воды поверхностного горизонта водоемов В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 норма ПДК для воды водных объектов, относящихся к рекреационной категории водопользования, по показателю химического потребления кислорода составляет 30 мгО2/дм3. При определении в пробах воды химического потребления кислорода выявлено, что показатель не превышает норму в зимний период в точках исследования № 1, № 2 и № 4, в остальные периоды наблюдается превышение на 2 ПДК и 3 ПДК. Наибольшее отклонение от нормы определено в пробе воды водотока Кутум, отобранной в точке № 3 (Ямгурчевский мост) в осенний период, на 4 ПДК. По показателю ХПК исследуемые водоемы по степени загрязнения можно

41 отнести к «очень грязным». ХПК или химическое потребление кислорода своим значением характеризует суммарное содержание в воде органических веществ по объему израсходованного на их полное окисление химически связанного кислорода. Показатель ХПК является общим показателем загрязнения как промышленных сточных вод, так и природных вод. Увеличению гидрохимического загрязнения также способствует активное освоение месторождений, сопровождающееся значительным антропогенным воздействием на окружающую среду, включающим механические нарушения природных комплексов при строительстве, поступление загрязняющих веществ в ходе технологических циклов при эксплуатации объектов добычи и транспорта газа и от автотранспорта, а также возможные временные локальные загрязнения в результате аварийных ситуаций. Показатель биохимического потребления кислорода или БПК характеризует собой количество растворенного кислорода, необходимого на окисление бактериями загрязняющих органических веществ в заданном объеме воды. Для определения БПК проб воды поверхностного горизонта водоемов использовался скляночный метод по Винклеру. Результаты представлены на рисунке 5.

42 норма ПДК по ГОСТ 17.1.3.07. –82 Рис. 5 Показатели БПК5 проб воды поверхностного горизонта водоемов Согласно требованиям ГОСТ 17.1.3.07. –82 норма ПДК для воды водных объектов, относящихся к рекреационной категории водопользования, по показателю биохимического потребления кислорода составляет 4 мгО2/дм3. При определении в пробах воды химического потребления кислорода выявлено соответствие норме в пробах воды всех исследуемых водоемов в зимне-весенний период. Определенный уровень БПК5 позволяет отнести исследуемые пробы воды по степени загрязнения к «грязным». Максимальное значение показателя БПК5 равное 12 мгО2/дм3 и составляющее 3 ПДК обнаружено в пробах воды водотока Кутум, отобранных в точке № 3 (Ямгурчевский мост) в осенний период исследования и по степени загрязнения характеризуются как «очень грязные». Разрушение органических водоемах, осуществляется соединений, бактериями. Процесс содержащихся носит в название анаэробного биохимического окисления. Его результатом становится

43 выделение двуокиси углерода. При этом окисление проходит с участием растворенного в жидкости О2. Чем больше органических включений, тем больше кислорода необходимо на их переработку. Поэтому превышение показателя БПК указывает на высокую загрязненность субстанции — уровень кислорода резко снижается, что приводит непригодности воды. Содержание горизонта нефтепродуктов водоемов в определялось пробах воды поверхностного флуориметрическим методом. Флуориметрический анализ более всего пригоден для осуществления постоянного контроля этой величины в режиме online. Используемая в нём методика заслуживает более широкого освещения ввиду появления приборов, функционирующих на её основе и поднимающих решение проблемы контроля на качественно новый уровень. Полученные результаты представлены на рисунке 6. норма ПДК по ГН 2.1.5.1315-03 Рис. 6 Содержание нефтепродуктов в пробах воды поверхностного горизонта водоемов

44 По требованиям ГН 2.1.5.1315-03 норма ПДК для воды водных объектов, относящихся к рекреационной категории водопользования, по содержанию нефтепродуктов составляет 0,3 мг/дм3. При определении содержания нефтепродуктов выявлено соответствие норме в воде водотока Кутум, отобранной в точке № 4 (Студенческий мост) в зимний период исследования. Наибольшее превышение содержания нефтепродуктов равное 1,8 мг/дм3 и 1,5 мг/дм3 и составляющее 6 ПДК и 5 ПДК обнаружено в пробах воды водотока Кутум, отобранных в точке № 3 (Ямгурчевский мост) в осенний и весенний периоды. Пробы воды всех исследуемых водоемов по содержанию нефтепродуктов в них относятся к 4 классу опасности. Нефтепродукты относятся к числу наиболее распространенных и опасных веществ, загрязняющих поверхностные и грунтовые воды. Образует пленку на поверхности воды, которая препятствует нормальному газообмену, влияет на температуру, что ведет к изменению химического состава воды. Стойкое загрязнение водоемов создают комочки грунта, внутри которых содержатся нефтепродукты. При их разрушении освобождающиеся нефтепродукты вызывают вторичное загрязнение воды. Они оказывают токсическое воздействие на организм человека, поражая сердечно-сосудистую и нервную системы. Большинство нефтепродуктов поступают в поверхностные и грунтовые воды при транспортировании нефти, со сточными водами предприятий, со стоками с автомагистралей, бензозаправок, с аэрозольной фракцией выхлопных газов, выход из «донных» отложений, с хозяйственно-бытовыми водами. Также к источникам загрязнения относятся системы отопления, работающие на нефти, операции автозаправочные обслуживания станции, автомобилей станции (мойки, стоянки, техобслуживания), несанкционированные свалки отходов, загрязненных нефтепродуктами (опилки, песок, шлам, ветошь), гаражи, хранилища нефтепродуктов. При определении гидрохимических показателей, таких как ХПК, БПК5 и содержание нефтепродуктов обнаружено несоответствие нормам

45 показателей для воды водных объектов, относящихся к рекреационной категории водопользования. Максимальное превышение ПДК наблюдается в пробах воды водотока Кутум, отобранной в районе Ямгурчевского моста, находящегося на территории рынка «Большие Исады». Согласно требованиям ГОСТ 17.1.3.07. –82 вода исследуемых водоемов по степени загрязнения относится к «грязным» и «очень грязным», что не позволяет отнести их к рекреационной категории водопользования и не рекомендуется использование водного объекта для культурно-бытовых целей населения и спорта. 3.2 Гидробиологические показатели качества поверхностных водоемов Для оценки качества воды по развитию фитопланктона и его индикаторным видам использовали метод Пантле и Букку в модификации Сладечека. При исследовании воды поверхностного горизонта р. Волги в районе Комсомольской набережной по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в осенний период получены данные, представленные в таблице 2. Таблица 2 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) Вид Числен– ность s Anabaena macrospora Ankistodes mustaleatus Cymbella lanceolata Euglena genraculata Gloeotnientapisum Navicula gastrum Oscillatoria amphibia Oscillatoria limnetica 10 12 11 13 25 12 21 12 2 2,35 2 3,5 1,7 2 2 2 Процент от общей численности 5,1 6,2 5,7 6,7 12,9 6,2 10,9 6,2 h s*h 3 3 3 3 5 3 5 3 6 7,05 6 10,5 8,5 6 10 6

46 1 Oscillatoria limosa Oscillatoria tenuis Phormidium uncinatum Trachelomonas hruolcluos Trachelomonas stokesiana Итого 2 13 14 23 9 3 3 3 2 2 4 6,7 7,2 11,8 4,6 5 3 3 5 3 19 2 9,8 3 6 194 – 100 45 100,05 S= 6 9 9 10 6 = 2,2 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 1 (река Волга, Комсомольская набережная) по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». При исследовании воды поверхностного горизонта водотока Кутум в районе Комсомольской набережной по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в осенний период получены данные, представленные в таблице 3. Таблица 3 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 2 (в. Кутум, Калининский мост) Вид Численность s h s*h 0,65 Процент от общей численности 7,5 Aphanothec castagnina Astasia guartaha Chlorogonium elongatum Closterium acerosum Euglena gracilis 10 3 1,95 16 15 3,5 3 11,2 10,5 5 5 17,5 15 9 3 6,3 3 9 28 0,95 19,5 5 4,75

47 1 Euglena placiforma Lyngbya limnetica Navicula viridula Stigeoclonium sp. Итого 2 25 24 6 10 143 3 2,5 2 3 3 – S= 4 17,5 16,7 4,1 6,7 100 5 5 5 3 3 64 6 12,5 10 9 9 88,7 = 1,4 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 2 (водоток Кутум, Калининский мост) исследования по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». При исследовании воды поверхностного горизонта водотока Кутум в районе Ямгурчевского моста по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в осенний период получены данные, представленные в таблице 4. Таблица 4 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) Вид Численность s Euglena gracilis Euglena viridis Navicula gastrum Navicula viridula Nitzschia holsatica Oscillatoria limosa Pediastrium tetras Pseudoholopedia giaca Scenedesmus arcuahis Scenedesmus quadricauda Итого 24 26 17 13 28 22 35 12 16 17 210 0,05 3,55 2 3 2 3 1,75 1,8 1,8 2 – Процент от общей численности 11,4 12,4 8,1 6,2 13,3 10,5 16,7 5,7 7,6 8,1 100 h s*h 5 5 3 3 5 5 5 3 3 3 40 0,25 17,75 6 9 10 15 8,75 5,4 5,4 6 83,5

48 S= =2,1 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 3 (водоток Кутум, Ямгурчевский мост) по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07.–82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». При исследовании воды поверхностного горизонта водотока Кутум в районе Студенческого моста по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в осенний период получены данные, представленные в таблице 5. Таблица 5 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) Вид Численность s Aphathacecla thorota Chorococcus turgidus Chorococcus turgiocus Euglena genculata Euglena gracilis Euglena viridis Meriamopediamaior Navicula viridula Oscillatoria limosa Scenedesmus arcuahis Stigeoclonium sp. 15 10 21 19 23 18 12 24 14 15 17 Итого 188 S= h s*h 1,7 1,3 1,3 3,5 0,05 3,55 1,5 3 3 1,8 3 Процент от общей численности 7,9 5,3 11,2 10,1 12,2 9,6 6,4 12,8 7,4 8,0 9,1 3 3 5 5 5 3 3 5 3 3 3 5,1 3,9 6,5 17,5 0,25 10,65 4,5 15 9 5,4 9 – 100 41 86,8 =2,2 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 4 (водоток Кутум, Студенческий мост по шкале

49 сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». При исследовании проб воды поверхностного горизонта водоемов в осенний период была определена численность водорослей и рассчитан индекс сапробности. Полученные данные представлены в таблице 6. Таблица 6 Численность водорослей и сапробность водоемов в осенний период исследования Наименование Диатомовые Зелёные Цианобактерии Эвгленовые Динофитовые Золотистые Общая численность Индикаторных видов р. Волга, точка № 1 водоток Кутум точка № 2 точка № 3 точка № 4 Численность фитопланктона, млн кл/м3 735 654 590 67 56 101 103 38 95 9 5 0 0 1 20 3 0 0 908 753 806 13 Сапробность (S) 2,2 Наибольшая 9 Сапробность 1,4 численность водорослей 82 49 153 34 0 26 344 10 11 2,1 2,2 в осенний период исследования наблюдается в пробе воды, собранной в точке № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) 908 млн кл/м3. Было выявлено 13 индикаторных видов, данные были использованы при расчете индекса сапробности методом Пантле и Букку в модификации Сладечека. Индекс сапробности (S) был равен 2,2 и характеризует состояние вод, как умеренно загрязненное. В пробе воды, отобранной в точке № 2 (в. Кутум, Калининский мост) численность водорослей составила 753 млн кл/м3. Были

50 идентифицированы 9 индикаторных видов, данные использовались при расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) равен 1,4, что характеризует состояние вод, как умеренно загрязненное. В пробе воды, отбиравшейся в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) общая численность водорослей равна 806 млн кл/м3. Было обнаружено 10 видов, относящихся к индикаторным, и использовавшихся в расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) равнялся 2,1 и свидетельствовал об умеренном загрязнении вод. В пробе воды из точки отбора № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) общая численность водорослей была равна 344 млн кл/м3. Идентифицировано 10 индикаторных видов, которые были использованы при расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) составил 2,2 и характеризовал состояние воды, как умеренно загрязненное. При исследовании воды поверхностного горизонта р. Волги в районе Комсомольской набережной по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в зимний период получены данные, представленные в таблице 7. Таблица 7 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) Вид Числен– ность s Anabaena macrospora Ankistodes mustaleatus Cymbella lanceolata Euglena genraculata Navicula gastrum Oscillatoria limnetica Oscillatoria limosa Oscillatoria tenuis Phormidium uncinatum Итого 11 14 12 13 10 11 15 10 13 109 2 2,35 2 3,5 2 2 3 3 2 – Процент от общей численности 10 13 11 12 9 10 14 9 12 100 h s*h 3 5 5 5 3 3 5 3 5 37 6 11,75 10 17,5 6 6 15 9 10 91,25

51 S= =2,5 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 1 (река Волга, Комсомольская набережная) по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». При исследовании воды поверхностного горизонта водотока Кутум в районе Комсомольской набережной по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в осенний период получены данные, представленные в таблице 8. Таблица 8 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 2 (в. Кутум, Калининский мост) Вид Численность s Astasia guartaha Euglena gracilis Euglena placiforma Lyngbya limnetica Navicula viridula Stigeoclonium sp. Итого 12 13 15 10 8 10 68 3,5 0,95 2,5 2 3 3 – S= Процент от общей численности 18 19 22 14,7 12 14,7 100 h s*h 5 5 5 5 5 5 30 17,5 4,75 12,5 10 15 15 74,75 = 2,4 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 2 (водоток Кутум, Калининский мост) исследования по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная».

52 При исследовании воды поверхностного горизонта водотока Кутум в районе Ямгурчевского моста по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в осенний период получены данные, представленные в таблице 9. Таблица 9 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) Вид Числен – ность s Euglena gracilis Navicula gastrum Nitzschia holsatica Oscillatoria limosa Pediastrium tetras Pseudoholopedia giaca Scenedesmus quadricauda Итого 22 16 20 28 30 15 14 145 0,05 2 2 3 1,75 1,8 2 – S= Процент от общей численности 15 11 14 19 21 10 10 100 h s*h 5 5 5 5 5 3 3 26 0,25 10 10 15 8,75 5,4 6 55,4 =2,1 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 3 (водоток Кутум, Ямгурчевский мост) по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует III классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». При исследовании воды поверхностного горизонта водотока Кутум в районе Студенческого моста по уровню сапробности (индикаторным видам фитопланктона) в представленные в таблице 10. осенний период получены данные,

53 Таблица 10 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) Вид Численность s Aphathacecla thorota Chorococcus turgidus Chorococcus turgiocus Euglena viridis Navicula viridula Oscillatoria limosa Scenedesmus arcuahis Итого 17 12 19 15 18 10 14 105 1,7 1,3 1,3 3,55 3 3 1,8 – S= Процент от общей численности 16 11,5 18 14 17 9,5 13 100 h s*h 5 5 5 5 5 3 5 33 8,5 6,5 6,5 17,75 15 9 9 103,5 =3,1 После вычисления индекса сапробности (S) установили, что вода в точке отбора № 4 (водоток Кутум, Студенческий мост по шкале сапробности относится к альфамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 соответствует IV классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «загрязненная». При исследовании проб воды поверхностного горизонта водоемов в зимний период была определена численность водорослей и рассчитан индекс сапробности. Полученные данные представлены в таблице 11.

54 Таблица 11 Численность водорослей и сапробность водоемов в зимний период исследования Наименование Диатомовые Зелёные Цианобактерии Эвгленовые Динофитовые Золотистые Общая численность Индикаторных видов Сапробность(S) р. Волга, точка № 1 водоток Кутум точка № 2 точка № 3 точка № 4 Численность фитопланктона, млн кл/м3 35 54 65 21 56 38 15 38 42 63 5 0 0 0 2 0 0 0 134 153 147 8 2,5 12 Сапробность 2,4 28 19 43 34 0 0 124 10 9 2,1 3,1 Общая численность водорослей в зимний период исследования в пробе воды, отобранной в точке № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) равна 134 млн кл/м3. Было выявлено 8 индикаторных видов, данные были использованы при расчете индекса сапробности методом Пантле и Букку в модификации Сладечека. Индекс сапробности (S) был равен 2,5 и характеризует состояние вод, как чистое. В пробе воды из точки отбора № 2 (в. Кутум, Калининский мост) численность водорослей составила 153 млн кл/м3. Были идентифицированы 12 индикаторных видов, данные использовались при расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) равен 2,4 и характеризует состояние вод, как умеренно загрязненное. В пробе воды, собранной в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) общая численность водорослей равна 147 млн кл/м3. Было обнаружено 10 видов, относящихся к индикаторным, и использовавшихся в расчете

55 индекса сапробности. Индекс сапробности (S) равнялся 2,1 и свидетельствовал об умеренном загрязнении вод. В пробе воды, отобранной в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) общая численность водорослей была равна 344 млн кл/м3. Идентифицировано 9 индикаторных видов, которые были использованы при расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) составил 3,1 и характеризовал состояние вод, как загрязненное. Сапробность воды по состоянию фитопланктона в весенний период в точке № 1 (река Волга, Комсомольская набережная) представлена в таблице 12. Таблица 12 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) Вид Численность s h s∙h 1 Процент от общей численности 21 Netrium genuflexa Peridium bipes Scenedesmus opolienata Trachelomonas stokesiana Trustulis vulgaris Итого 45 7 7 15 69 1 2 7 33 3 7 3 14 57 2 27 7 14 20 1,2 9 3 3,6 100 27 41,6 206 S= =1,5 После вычисления индекса сапробности S равного 1,5 установлено, что вода в точке отбора № 1 (река Волга, Комсомольская набережная) в весенний период исследования по шкале сапробности относится к олигосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82

56 соответствует II классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «чистая». Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в весенний период исследования в точке № 2 (водоток Кутум, Калининский мост) представлена в таблице 13. Таблица 13 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 2 (в. Кутум, Калининский мост) Вид Численность s h s∙h 3,5 Процент от общей численности 30 Astasia guartaha Euglena velata Heteromastrix angulata Meriamo pediamaior Navicula viridula Pleurotaenium trabecula Итого 78 7 24,5 35 2,6 13 5 13 36 2,55 13 5 12,75 43 1,5 16 5 7,5 28 2,8 10 3 8,4 39 1,2 15 5 6 100 30 72,15 259 S= =2,5 После вычисления индекса сапробности S, который составил 2,5 установлено, что вода в точке отбора № 2 (водоток Кутум, Калининский мост) в весенний период исследования по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07– 82 соответствует II классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в весенний период исследования в точке № 3 (водоток Кутум, Ямгурчевский мост) представлена в таблице 14.

57 Таблица 14 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) Вид Численность s h s∙h 1,7 Процент от общей численности 26 Aphatha ceclathorota Euglena genraculata Euglena placiformia Nitzshia longissima Pseudoholopedia giauca Trachelomonas hruoleluos Итого 62 7 11,9 52 0,05 22 7 10,5 37 2,5 15 5 12,5 30 2 12 5 10 44 1,75 18 5 9 10 3,55 4 3 6,9 100 32 60,8 235 S= =1,9 После вычисления индекса сапробности S равного 1,9 было установлено, что вода в точке отбора № 3 (водоток Кутум, Ямгурчевский мост) в весенний период исследования по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07– 82 соответствует II классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в весенний период исследования в точке № 4 (водоток Кутум, Студенческий мост) представлена в таблице 15.

58 Таблица 15 Сапробность воды по индикаторным видам фитопланктона в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) Вид Численность s h s∙h 1,3 Процент от общей численности 23 Chorococcus turgidus Cymbella chrenbergii Gloeothienta pissum Lyngbya limnetica Pedastrium terras Scenedesmus arcuahis Итого 64 7 9,1 24 1,5 8 3 4,5 43 1,7 15 5 8,5 58 2 21 7 14 55 1,75 20 7 12,25 29 1,8 10 3 5,4 100 32 53,75 273 S= =1,6 После вычисления индекса сапробности S, который составил 1,6 было установлено, что вода в точке отбора № 4 (водоток Кутум, Студенческий мост) в весенний период исследования по шкале сапробности относится к бетамезосапробной зоне. В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 соответствует II классу качества и по степени загрязненности характеризуется как «умеренно загрязненная». Результаты проведенного исследования проб воды поверхностного горизонта водоемов в весенний период по состоянию фитопланктона представлены в таблице 16.

59 Таблица 16 Численность водорослей и сапробность водоемов в весенний период исследования Наименование р. Волга, водоток Кутум точка № 1 точка № 2 точка № 3 точка № 4 Диатомовые Зелёные Цианобактерии Эвгленовые Динофитовые Золотистые Общая численность Индикаторных видов Сапробность (S) Численность фитопланктона, млн кл/м3 535 548 465 221 456 388 172 308 412 87 54 33 16 10 28 6 8 2 1037 1334 1328 15 17 1,5 Сапробность 2,5 528 119 443 43 17 3 1153 12 11 1,9 1,6 Численность водорослей и сапробность водоемов в весенний период исследования представлена в таблице 16. Численность водорослей весенний период исследования в пробе воды, отобранной в точке № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) составила 1037 млн кл/м3. Выявлено 15 индикаторных видов, данные использованы при расчете индекса сапробности методом Пантле и Букку в модификации Сладечека. Индекс сапробности (S) равен 1,5 и характеризует состояние вод, как умеренно загрязненное. В пробе воды из точки № 2 (в. Кутум, Калининский мост) численность водорослей была равна 1334 млн кл/м3. Были идентифицированы 17 индикаторных видов, данные использовались при расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) равен 2,5 и характеризует состояние вод, как загрязненное. В пробе воды, собранной в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) общая численность водорослей равна 1328 млн кл/м3. Было обнаружено 12

60 видов, относящихся к индикаторным, и использовавшихся в расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) равнялся 1,9 и свидетельствовал об умеренно загрязненном состоянии вод. В пробе воды, отобранной в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) общая численность водорослей была равна 1153 млн кл/м3. Идентифицировано 11 индикаторных видов, которые были использованы при расчете индекса сапробности. Индекс сапробности (S) составил 1,6 и характеризовал состояние вод, как умеренно загрязненное. При определении гидробиологических показателей по индексу сапробности и индикаторным видам фитопланктона обнаружено, что исследуемые водоемы находятся в пределах степени загрязненности по ГОСТ 17.1.3.07–82 от «умеренно загрязненных» до «загрязненных». Водоемы можно охарактеризовать как естественно стареющие, что связано с их зарастанием и происходящим цветением воды. В них доминируют окислительные процессы, наблюдается перенасыщенные кислородом, преобладают такие продукты минерализации белков, как аммонийные соединения, нитраты и нитриты. В этих водах разнообразно представлены животные и растительные организмы, среди последних – диатомовые, сине-зеленые и зеленые. Из результатов проведенного сапробиологического анализа внутригородских водотоков следует, что в них идет активный процесс самоочищения, завершающийся минерализацией воды (бета-мезосапробная зона). Однако присутствие индикаторных организмов и их преобладание в планктонных пробах дает полное основание отнести исследуемые водоемы к умеренно загрязненным. На основании этого рекомендуется принять меры по снижению рекреационной нагрузки на внутригородские водоемы путем уменьшения сброса сточных вод городской ливневой системы.

61 3.3 Микробиологические показатели качества поверхностных водоемов ОМЧ проб воды поверхностного горизонта водоемов определяли методом, позволяющим определять в воде общее число мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (ОМЧ), способных образовывать колонии на питательном агаре . Общая микробная численность бактерий (ОМЧ) выявляет бактерии, потенциально способные причинить вред здоровью. Этот показатель достаточно информативен, так как высокая ОМЧ является индикатором загрязнения органическими соединениями (например, содержащихся в фекалиях) и различными формами азота. ОМЧ проб воды поверхностного горизонта водоемов в осенний период представлено на рисунке 7. Рис. 7. ОМЧ проб воды поверхностного горизонта водоемов в осенний период ОМЧ проб воды поверхностного горизонта водоемов в осенний период колеблется в диапазоне от 5,1∙103 КОЕ кл/мл (точка №4) до 7,3∙103

62 КОЕ кл/мл (точка № 3). В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 пробы вод в исследуемый период находятся в пределах 3–го класса и характеризуются как «умеренно загрязненные». Наибольшее общее число бактерий наблюдается в пробе, отобранной в непосредственной близости к рынку «Большие Исады», характеризующийся большим количеством несанкционированных свалок и стоков. Процентное соотношение морфологических форм групп сапротрофных микроорганизмов в исследуемой воде, отобранной в осенний период в точке № 1 (река Волга, Комсомольская набережная) представлено на рисунке 8. Рис. 8. Процентное соотношение морфологических групп сапротрофных микроорганизмов осенью в точке отбора № 1 (р. Волга, Комсомольская набережная) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, р. Волга относится к 3 классу и является «умеренно загрязненной». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды,

63 отобранной в точке №1 (Волга, Комсомольская набережная) составляет: споровых Г+ палочек составляет 60%, неспоровых Г–палочек–15 %, Г+ кокков– 15 %, Г– кокков– 10%. Преимущественное преобладание Г + спорообразующих палочек свидетельствует о сильной антропогенной нагрузке на реку в данный период времени, связанной с повышением содержания органики. Процентное соотношение морфологических форм групп сапротрофных микроорганизмов в исследуемой воде, отобранной в осенний период в точке № 2 (водоток Кутум, Калининский мост) представлено на рисунке 9. Рис. 9. Процентное соотношение микроорганизмов осенью в точке отбора № 2 (в. Кутум, Калининский мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, водоток Кутум в точке отбора в районе Калининского моста относится к 3 классу и характеризуется как «умеренно загрязненная». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной в точке №2 (Кутум, Калининский мост) составляет: споровых

64 Г+ палочек 44 %, неспоровых Г– палочек–17 %, Г+ кокков– 21 %, Г– кокков – 18 %. Преобладание свидетельствовать проточностью о Г+ спорообразующих загрязнении воды, водотока, производящимся палочек обусловленного неконтролируемым может малой сбросом бытовых стоков, наличием на берегу домов со старой системой канализации или без неё. Процентное соотношение морфологических групп сапротрофных микроорганизмов в исследуемой воде, отобранной в осенний период в точке № 3 (водоток Кутум, Ямгурчевский мост) представлено на рисунке 10. Рис. 10. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов осенью в точке отбора № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, водоток Кутум в точке отбора в районе Ямгурчевского моста относится к 3 классу и характеризуется как «умеренно загрязненная».

65 Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной в точке №3 (Кутум, Ямгурчевский мост) споровых Г + палочек составляет 47 %, неспоровых Г–палочек–30 %, Г+ кокков– 15 %, Г– кокков– 8 %. Преобладание Г+ спорообразующих палочек может свидетельствовать о загрязнении водотока, обусловленного расположением на территории рынка, характеризующегося большим количеством несанкционированных стоков. Процентное соотношение морфологических групп сапротрофных микроорганизмов в исследуемой воде, отобранной в осенний период в точке № 4 (водоток Кутум, Студенческий мост) представлено на рисунке 11. Рис. 11. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов осенью в точке отбора № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07. –82 по показателю ОМЧ, водоток Кутум в точке отбора в районе Студенческого моста относится к 3 классу и характеризуется как «умеренно загрязненная».

66 Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной в точке №4 (Кутум, Студенческий мост) составляет: споровых Г+ палочек составляет 37 %, неспоровых Г– палочек –2 7 %, Г+ кокков – 22 %, Г– кокков – 14 %. Преобладание Г+ спорообразующих палочек может свидетельствовать о благоприятных для развития микроорганизмов условиях – повышенной температуре воды из–за использования воды ТЭЦ. ОМЧ воды поверхностного горизонта водоемов в зимний период, представлено на рисунке 12. Рис. 12. ОМЧ воды поверхностного горизонта водоемов в зимний период ОМЧ воды поверхностного горизонта в зимний период, колеблется в диапазоне от 1∙103 КОЕ кл/мл (точка №1) до 3,6∙103 КОЕ кл/мл (точка № 2). В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 пробы вод в исследуемый период находятся в пределах 2–го класса и характеризуются как «чистые». Наибольшее общее число бактерий наблюдается в пробе водотока Кутум, отобранной в районе Студенческого моста, это может

67 быть следствием повышенной температуры воды из–за использования воды для нужд ТЭЦ. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробах воды, отобранных зимой в точке №1 (р. Волга, Комсомольская набережная), представлено на рисунке 13. Рис. 13. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробе воды, отобранных зимой в точке № 1 (p.Волга, Комсомольская набережная) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, р. Волга в точке отбора в районе Комсомольской набережной относится к 2 классу и характеризуется как «чистая». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной зимой в точке №1 (Волга, Комсомольская набережная) составляет: споровых Г + палочек составляет 43 %, неспоровых Г+палочек–14 %, Г+ кокков– 26 %, Г– кокков– 17 %.

68 Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных зимой в точке № 2 (в. Кутум, Калининский мост) представлено на рисунке 14. Рис. 14. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробе воды, отобранных зимой в точке №2 (в. Кутум, Калининский мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, вода в водотоке Кутум в точке отбора в районе Калининского моста относится ко 2 классу и характеризуется как «чистая». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной зимой в точке №2 (Кутум, Калининский мост) составляет: споровых Г + палочек составляет 48 %, неспоровых Г– палочек–29 %, Г+ кокков– 17 %, Г– кокков– 6 %. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных зимой в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) представлено на рисунке 15.

69 Рис. 15. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробе воды, отобранных зимой в точке №3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, водоток Кутум в точке отбора в районе Ямгурчевского моста относится ко 2 классу и характеризуется как «чистая». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной зимой в точке №3 (Кутум, Ямгурчевский мост) составляет: споровых Г + палочек составляет 47 %, неспоровых Г– палочек–33 %, Г+ кокков– 20 %. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных зимой в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) представлено на рисунке 16.

70 Рис. 16. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробе воды, отобранных зимой в точке №4 (в. Кутум, Студенческий мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, водоток Кутум в точке отбора в районе Студенческого моста относится ко 2 классу и характеризуется как «чистая». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной зимой в точке №4 (в. Кутум, Студенческий мост) составляет: споровых Г + палочек составляет 45 %, неспоровых Г–палочек–33 %, Г+ кокков– 22 %. При посеве на БГКП было обнаружено, что из всех исследуемых водоемов не выделены микроорганизмы данной группы, что может зависеть от неблагоприятных для развития таких микроорганизмов погодных условий в период отбора (пониженная температура воды, ледостав).

71 При посеве на среду МПА отобранных проб воды из исследуемых водоемов в весенний период были получены следующие данные, представленные на рисунке 17. Рис. 17. ОМЧ поверхностного горизонта водоемов в весенний период ОМЧ воды поверхностного горизонта в весенний период колеблется в диапазоне от 5,2∙103 КОЕ кл/мл (точка № 1) до 7,8∙103 КОЕ кл/мл (точка № 4). В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 пробы вод в исследуемый период находятся в пределах 3–го класса и характеризуются как «умеренно загрязненные». Наибольший показатель ОМЧ наблюдается в пробе водотока Кутум, отобранной в районе Студенческого моста, это может быть следствием повышенной температуры воды из–за использования данной воды ТЭЦ. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке №1 (Волга, Комсомольская набережная), представлено на рисунке 18.

72 Рис. 18. Процентное соотношение морфологических групп микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке №1 (р. Волга, Комсомольская набережная) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, р. Волга в точке отбора в районе Комсомольской набережной относится к 4 классу и характеризуется как «загрязненная». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной весной в точке №1 (Волга, Комсомольская набережная) составляет: споровых Г + палочек составляет 35 %, неспоровых Г+ палочек–22 %, Г+ кокков– 23 %, Г– кокков– 20 %. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных зимой в точке № 2 (Кутум, Калининский мост) представлено на рисунке 19.

73 Рис. 19. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке № 2 (в. Кутум, Калининский мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, вода в водотоке Кутум в точке отбора в районе Калининского моста относится к 3 классу и характеризуется как «умеренно загрязненная». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной весной в точке №2 (Кутум, Калининский мост) составляет: споровых Г+ палочек составляет 43 %, неспоровых Г–палочек–27 %, Г+ кокков–20 %, Г– кокков– 10 %. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) представлено на рисунке 20.

74 Рис. 20. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке № 3 (в. Кутум, Ямгурчевский мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, вода в водотоке Кутум в точке отбора в районе Ямгурчевского моста относится к 3 классу и характеризуется как «умеренно загрязненная». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной весной в точке №3 (Кутум, Ямгурчевский мост) составляет: споровых Г+ палочек составляет 35 %, неспоровых Г–палочек–30 %, Г+ кокков–20 %, Г– кокков– 15 %. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) представлено на рисунке 21.

75 Рис. 21. Процентное соотношение микроорганизмов в пробах воды, отобранных весной в точке № 4 (в. Кутум, Студенческий мост) В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 по показателю ОМЧ, вода в водотоке Кутум в точке отбора в районе Студенческого моста относится к 3 классу и характеризуется как «умеренно загрязненная». Содержание различных групп микроорганизмов в пробах воды, отобранной весной в точке № 4 (Кутум, Студенческий мост) составляет: споровых Г+ палочек составляет 41 %, неспоровых Г–палочек–30 %, Г+ кокков–20 %, Г– кокков– 19 %. При посеве на БГКП было обнаружено, что из всех исследуемых водоемов не выделены микроорганизмы данной группы, что может зависеть от неблагоприятных для развития таких микроорганизмов погодных условий в период отбора. Существует тесная взаимосвязь между наличием в воде микроорганизмов, растущих на углеводородах, и нефтяным загрязнением водоема. Способность микроорганизмов использовать в качестве единственного источника углерода и энергии специфические органические

76 соединения (в частности, углеводороды нефти) используется как метод микробной индикации нефтяного загрязнения Произведен посев для определения углеводородокисляющих микроорганизмов из проб воды исследуемых водоемов. Численность углеводородокисляющих микроорганизмов представлена на рисунке 22. Рис. 22. Численность углеводородокисляющих микроорганизмов в воде поверхностных водоемов за исследуемые сезоны Численность углеводородокисляющих микроорганизмов в исследуемые сезоны колеблется от 1∙106 КОЕ кл/мл (точка № 3) до 3,9 106 КОЕ кл/мл (точка № 4). Наибольшая численность обнаруживается в точке отбора № 4 (водоток Кутум в районе Студенческого моста), может свидетельствовать об активно протекающих в поверхностном горизонте воды микробиологических процессах трансформации углеводородов нефтяного происхождения. Максимальная численность

77 углеводородокисляющих микроорганизмов обнаруживается в весенний период исследования, т.к. на интенсивность окисления нефтепродуктов микроорганизмами немалое влияние оказывает температура. Для развития углеводородокисляющих бактерий и интенсификации очищения воды от нефти оптимальными являются мезофильные условия. Для количественного учета бактерий использовали метод Звягинцева и Кожевина. Рассчитывали количество бактериальных клеток в 0,01 мл водной суспензии. Полученные результаты представлены на рисунке 23. Рис. 23. Количество клеток микроорганизмов в воде поверхностного горизонта водоемов Количество клеток микроорганизмов в воде поверхностного горизонта при прямом микроскопическом учете, находится в диапазоне от 1,2∙106 КОЕ кл/мл (точка № 1) до 3,1∙103 КОЕ кл/мл (точка № 4). В соответствии с требованиями ГОСТ 17.1.3.07–82 пробы вод в исследуемый период находятся в пределах 3–го и 4-го классов и характеризуются как

78 «умеренно загрязненные» и «загрязненные». Сопоставление результатов определения общей численности бактерий методом прямого счета и методом посевов показало, что соответствия полученных величин нет, может быть объяснено тем, что при применении метода прямого счета учитывается часть микрофлоры, которая не растет на стандартных питательных средах. В основу экспрессной методики санитарно-бактериологического контроля был положен люминолозависимый хемилюминесцентный метод анализа водной пробы, взятой непосредственно из массы воды. Эта проба сразу после её отбора подавалась на детектор специального прибораанализатора (люминометра ЛЮМ-1), который в реальном масштабе времени показывал величину объёмной концентрации всех микробиологических частиц, прореагировавших с люминольным рабочим раствором. Для определения общей обсемененности водной суспензии по содержанию внутриклеточного АТФ использовали набор «Люмтек». По результатам хемилюминесценции на приборе ЛЮМ–1 определили численность бактерий, представленную на рисунке 24. Рис. 24. Численность бактерий по результатам хемилюминесценции на приборе ЛЮМ– 1

79 Численность бактерий, определенная хемилюминесцентным экспресс-методом, в разных точках отбора составила от 1,2 10 7 КОЕ/мл (точка № 1) до 6,3 107 КОЕ/мл (точка № 3). В верхней точке отбора, откуда идет водоснабжение водотока, численность бактерий наименьшая, а ниже по своему протяжению возрастает в несколько раз. Максимальная численность обнаруживается в пробах воды, отобранной в точке № 3 и находится в пределах от 4.7 107 КОЕ/мл (зима) до 6,3 107 КОЕ/мл (осень). Точка отбора № 3 характеризуется непосредственной близостью к рынку «Большие Исады», фактически водоток в этом месте превращен в несанкционированную свалку, что приводит к высокому загрязнению воды органическими веществами. Численность микроорганизмов определяется различными экологическими факторами, одним из которых является наличие доступной органики. При сопоставлении результатов определения численности бактерий хемилюминесцентным методом и методом посевов выявлено, что прямого соответствия полученных величин нет, что закономерно, так как на искусственных питательных средах вырастают определенные группы микроорганизмов, а хемилюминесцентным методом учитываются абсолютно все живые бактерии и другая микрофлора в анализируемом образце воды. В то же время установлена система синхронного изменения показателей численности микроорганизмов, определенная обоими методами на протяжении исследуемых водоемов. Обнаружено, что наибольшая численность микроорганизмов определена и методом посевов и методом хемилюминесценции в пробах воды водотока Кутум, отобранных в районе Ямгурчевского моста на территории рынка «Большие Исады». По показателям численности бактерий водоем в данной точке можно отнести к высокоэвтрофированным. Для статистической обработки данных был применен метод кластерного анализа. Был вычислен уровень сходства показателей оценки качества в пробах воды исследуемых поверхностных водоемов г.

80 Астрахани по алгоритму «дальний сосед». В общем случае кластер-анализ предназначен для объединения объектов в классы (кластеры) таким образом, чтобы в один класс попадали максимально схожие, а объекты различных классов максимально отличались друг от друга. Количественный показатель сходства рассчитывается заданным способом на основании данных, характеризующих объекты. В программе Microsoft Office Exel была построена дендрограмма, представленная на рисунке 25. 1 2 1 кластер 3 4 Рис. 25. Уровень сходства показателей поверхностных водоемов г. Астрахани Данные по точкам отбора № 2 (Кутум, Калининский мост) и № 3 (Кутум, Ямгурчевский мост) оказались объединены в первый кластер, уровень сходства между ними составил 0,7. Водоток Кутум является урбанизированным водотоком г. Астрахань – по его берегам проходят в незначительной удаленности автомобильные дороги и расположены жилые массивы, что находит свое отражение в возрастающей доле загрязнения водной среды множеством химических элементов. Водоток Кутум в исследуемых подвергается схожей точках отбора, антропогенной объединенных нагрузке – в кластер, поступлением канализационных стоков, так как в районах станций отбора находятся дома

81 с устаревшей канализационной системой или без неё. Также отрицательно сказывается непосредственная близость рынка «Большие Исады», в этой точке отбора распологаются несанкционированные свалки бытового и строительного мусора. Уровень сходства между данными в точке отбора № 1 (Волга, Комсомольская набережная) и 1 кластером составляет 0,35. Для р. Волги. В исследуемой точке отбора характерна концентрация основной массы загрязняющих веществ, накапливающаяся не только в результате бесхозяйственной деятельности города, но и поступающие с жидким и твердым стоком с верховьев Волги. В бассейне реки Волги сосредоточена основная часть промышленных предприятий России. На них, как правило, устaновлены устаревшие очистные сооружения, поэтому с них сбрасываются в Волгу и ее притоки сильно загрязненные воды. Превалирующая часть загрязнений, которые обнаруживаются в водоемах Астраханской области, поступает сюда с предприятий, расположенных выше по течению. На всем протяжении на Волгу оказывается сильное воздействие антропогенных факторов. Так как объем и токсичность превышают возможности самоочищения водная экосистема не справляются с токсичными веществами, поступающими со стоками. Сточные воды, которые сбрасываются астраханскими предприятиями и коммунальным хозяйством загрязняют реку в низовьях Наиболее отдаленной оказалась точка № 4 (Кутум, Студенческий мост), расстояние составляет 0,1. Водоток Кутум подвержен эксплуатации ТЭС, деятельность которой характеризуется образованием больших объемов сточных вод, загрязненных различными примесями. К их числу следует отнести химические реагенты, используемые в очистных установках при обработке исходной воды и конденсатов, при химической очистке энергетического оборудования, при консервации котлов, при различных химических анализах. Кроме того, в зависимости от типа используемого на ТЭС органического топлива, масел и смазочных веществ

82 сточные воды могут содержать в большом количестве нефтепродукты, масла, компоненты золы и шлака и т. п. Загрязняющие примеси могут находиться в сбросных водах как в растворенном состоянии, так и в виде суспензии и эмульсий.

83 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Водоемы, испытывают находящиеся высокую на урбанизированных антропогенную нагрузку территориях, в результате хозяйственной деятельности города. Вследствие выноса водорастворимых биогенных элементов и органических веществ с поверхностным стоком, поступающим из-за сброса сточных вод, происходит регулярное загрязнение воды. Химический анализ воды водоемов, расположенных на территории города Астрахань, показал отклонение от нормативов таких показателей как ХПК, БПК5 и массовой концентрации нефтепродуктов. По показателям фитопланктона и микробиологическим воды исследуемых водоемов относятся к классу умеренно загрязненных. Санитарное состояние (не обнаруженные бактерии группы кишечной палочки) свидетельствует об отсутствии негативного влияния неочищенных сточных вод от хозяйственно-бытовых предприятий города. Хемилюминесцентный метод позволил провести исследование воды поверхностных водоемов на общую численность микробиоты и показал адекватность полученных данных состоянию загрязненности различных участков. Быстрота и несложность проведения анализа позволяют использовать его для мониторинговых исследований качества воды различных водных объектов. Метод посевов, требующий длительных и трудоемких исследований, может быть использован как дополнительный при необходимости получения такого рода данных.

84 ВЫВОДЫ 1. По гидрохимическим показателям пробы воды исследуемых водоемов не отвечают требованиям ГОСТ для водоемов рекреационной категории водопользования. 2. По индексу сапробности (индикаторным видам фитопланктона) пробы воды исследованных поверхностных водоемов относятся к III классу качества и характеризуются как «умеренно загрязненные» на основании ГОСТ 17.1.3.07–82. 3. По показателям ОМЧ методом посева на питательные среды на основании ГОСТ 17.1.3.07–82 пробы воды исследованных поверхностных водоемов относятся ко II и III классу качества и характеризуются как «чистые» и «умеренно загрязненные». По общей численности бактерий при определении прямым микроскопическим учетом пробы воды исследованных поверхностных водоемов относятся к III классу качества и характеризуются как «умеренно загрязненные. 4. В ходе проведенного исследования установлена возможность применения хемилюминесцентного метода для оценки состояния воды по общей численности микроорганизмов.

85 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Архангельский, В. И. Гигиена: учебное пособие / В. И. Архангельский, П. И. Мельниченко. – М. : ГЭОТАР–Медиа, 2012. – 392 с.: ил.; 20 см. – Библиогр.: с. 3–7. – ISBN 978–5–9704–2042–3. – Текст : непосредственный. 2. Асеева, И. В. Методы почвенной микробиологии и биохимии: учебное пособие для вузов / под ред. Д. Г. Звягинцева. – М. : Изд-во МГУ, 1991. – 302 с.: ил.; 22 см. – ISBN 5-211-01675-0. – Текст : непосредственный. 3. Болонина, Г. В. Геологическая оценка состояния внутригородских водоемов агломератов Прикаспийского региона Текст : непосредственный / Г. В. Болонина [и др.]. // Геология, география и глобальная энергия. – 2013. – № 1(48) – С. 145–152. 4. Бортник, В. Н. Современная геоэкологическая ситуация в Волго–Каспийском бассейне / В. Н. Бортник [и др.]. – Текст : непосредственный // Водные ресурсы. – 1997. – № 5. – С. 548–555. 5. ГОСТ 17.1.307. – 82. Охрана природы. Гидросфера. Правила контроля качества воды водоемов и водотоков = Nature protection/ Hydrosphere / Predures for quality control of water in reservoirs and stream flows: издание официальное: утвержден и введен в действие Приказом Минприроды России от 16. 04. 1992 № 60: дата введения 1983–01–01. – М. : Стандартинформ, 1982. – 10 с. – Текст : непосредственный. 6. Жижимова, Г. В. Влияние урбанизированных территорий на внутригородские аквальные комплексы: (на примере г. Астрахань) / Г. В. Жижимова [и др.]. – Текст : непосредственный. – Астрахань : Изд–во АГУ, 2010. – 110 с. – ISBN 5–99260–427–8. 7. Заболотских, В. В. Экспресс-оценка экологического состояния и бактериального загрязнения водоёмов урбанизированных территорий на

86 примере города Самара / В. В. Заболотских. – Текст : непосредственный // Известия Самарского научного центра РАН. – 2017. №. 5. – С. 228-234. 8. Игнатьева, Л. П. Санитарная охрана водных объектов: учебное пособие / Л. П. Игнатьева, М. О. Потапова. – Иркутск : Изд–во ИГМУ, 2016. – 97 с.: ил.; 19 см. – Библиогр.: с. 3. – Текст : непосредственный. 9. Иркитова, А. Н. Санитарная микробиология: учебное пособие / А. Н. Иркитова. – Барнаул : Изд–во Алт. ун–та, 2013. – 96 с.: ил.; 21 см. Библиогр.: с. 3–4. – ISBN 978–5–7904–1407–7. – Текст : непосредственный. 10. Карелин, А. О. Проблемы методологии оценки окружающей среды и пути их решения / А. О. Карелин. – Текст : непосредственный // Гигиена и санитария. – 2006. – № 1. – С. 25–27. 11. Кожевников, А. Б. Промышленная и эпидемиологическая безопасность при обеззараживании питьевой воды / А. Б. Кожевников. – Текст : непосредственный // Водоснабжение и санитарная техника. – 2005. – № 5. – С. 12–17. 12. Кондрашин, Р. В. Промышленно–ресурсное районирование Астраханской области / Р. В. Кондрашин. – Текст : непосредственный // Южно–Российский вестник геологии, географии и глобальной энергии. – 2003– № 2 (7). – С. 54–60. 13. Красовский, Г. Н. Тенденции изменения показателей качества воды как сигнал опасности для здоровья населения / Г. Н. Красовский. – Текст : непосредственный // Гигиена и санитария, 2003. – №6. – С. 26–27. 14. Крушенко, Г. Г. Состояние ресурсов пресной воды / Г. Г. Крушенко [и др.]. – Текст : непосредственный // Водоснабжение и санитарная техника. – 2002. – № 12. – С. 2–5. 15. Куликова, И. Ю. Методические указания по количественному учету микроорганизмов: учебное пособие / И. Ю. Куликова. – Астрахань : Изд–во АГТУ, 2004. – 36 с. – Библиогр.: с. 3. – Текст : непосредственный. 16. Лабинская, А. С. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований : учебное пособие / А. С.

87 Лабинская и [др.]. – М. : Медицина, 2004. – 576 с.: ил.; 20 см. – 3000 экз. – Библиогр.: с. 4–8. – ISBN 5–225–04654–1. – Текст : непосредственный. 17. Леденев, Ю. А. Гигиеническая оптимизация питьевого водопользования и здоровье населения г. Брянска: специальность 14.00.07 «Гигиена»: автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Леденев Юрий Алексеевич. – Москва, 2002. – 24 с. – Место защиты: Федеральный научный Центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана. – Текст : непосредственный. 18. Мазаев, В. Т. Коммунальная гигиена: учебное пособие / В. Т. Мазаев [и др.]. – М. : ГЭОТАР–Медиа, 2014. – 704 с.: ил., 21 см. – ISBN 978–5–9704–3021–7. – Текст : непосредственный. 19. Михеева, И. В. Микробиологическое исследование хемилюминесцентным экспресс-методом антропогенного загрязнения реки Сходня / И. В. Михеева. – Текст : непосредственный // Научные и образовательные проблемы гражданской защиты. – 2011. – № 1. – С. 100106. 20. питьевой МУК 4.2.1018–01. Санитарно–микробиологический анализ воды: издание официальное: утверждены Главным государственным санитарным врачом РФ 9. 02. 2001 : дата введения 200107-01. – М. : Минздрав России, 2001. – 35 с. – Текст : непосредственный. 21. МУК 4.2.1884–04. санитарно–паразитологический Санитарно–микробиологический анализ воды поверхностных и водных объектов: издание официальное: утверждены Главным государственным санитарным врачом РФ 3. 03. 2004 : дата введения 2004-03-03. – М. : Минздрав России, 2004. – 63 с. – Текст : непосредственный. 22. Пат № 2698651 Российская Федерация, МПК C12Q 1/68, G01N 33/18. Способ определения сапробности гидробионтов для оценки экологического состояния водоемов: № 2018140522 : заявл. 16.11.2018; опубл. 28.08.2019 / Свердруп А. Э., Фролова, Л. Л. – Текст : непосредственный.

88 23. Пат. № 120101 Российская Федерация, МПК C12M 1/00, C12M 3/00. Устройство для экспресс-оценки качества природных сред: № 2011137715 : заявл. 13.09.2012; опубл. 10.09.2012 / Иванов Д. Е. – Текст : непосредственный. 24. Пат. № 163653 Российская Федерация, МПК G01N 33/18. Устройство оценки загрязненности донных отложений водных объектов нефтью и нефтепродуктами: № 2015151468 : заявл. 02.12.2015; опубл. 27.07.2016 / Воробьев Д. С. – Текст: непосредственный. 25. Пат. № 2413771 Российская Федерация, МПК C12Q 1/00. Экспресс-способ биотестирования природных сточных вод и водных растворов № 2009113656 : заявл. 10.04.2009; опубл. 10.03.2011 / Кратасюк В. А. – Текст : непосредственный. 26. Пат. № 2420734 Российская Федерация, МПК G01N33/00, C12Q1/02, C12Q1/68. Способ биоиндикации водоемов: № 2009133969 : заявл. 11.09.2009; опубл. 20.03.2011 / Фролова Л. Л. – Текст : непосредственный. 27. Пат. № 2431132 Российская Федерация, МПК G01N 21/64. Люминесцентно-кинетический способ определения наличия тяжелых металлов в водных растворах и устройство для его реализации № 20101193360 : заявл. 17.05.2010; опубл. 10.10.2011 / Мельников Г. В. – Текст : непосредственный. 28. Пат. № 2492641 Российская Федерация, МПК A01K 61/00, G01N 27/06, G01N 33/18. Способ определения экологического состояния водоемов: № 2012109140 : заявл. 11.03.2012; опубл. 20.09.2013 / Красногорская Н. Н. – Текст : непосредственный. 29. Пат. № 2538707 Российская Федерация, МПК G01N 33/18. Способ определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях № 2013138679 : заявл. 12.11.2013; опубл. 10.04.2015 / Гребенников Е. П. – Текст : непосредственный.

89 30. Пат. № 2576030 Российская Федерация, МПК G01N 33/18. Способ определения опасности микробиологической загрязненности воды: № 2015107670 : заявл. 03.04. 2015: опубл. 27.02.2015 / Иванов С. Д. – Текст : непосредственный. 31. Пат. № 2608443 Российская Федерация, МПК G01N 3/18, G01N 27/00. Способ экспресс-анализа биохимического потребления кислорода и устройство для его осуществления: № 2015120235 : заявл. 28.05.2015; опубл. 18.01.2017 / Албантов Д. А., Гришин М. В. – Текст : непосредственный. 32. Пат. № 2688745 Российская Федерация, МПК C12Q 1/18, C12N 1/20, C12R 1/38. Способ определения токсичности проб № 2018123135 : заявл. 25.06.2018; опубл. 22.05.2019 / Сибирцев В. С. – Текст : непосредственный. 33. Пат. № 2695154 Российская Федерация, МПК G01N 33/18. Способ определения трофического уровня пресноводного водоема: № 2018134895 : заявл. 02.10.2018; опубл. 22.07.2019 / Суторихин И. А., Фроленков И. М. – Текст : непосредственный. 34. Пат. № 2696824 Российская Федерация, МПК G01N 21/64. Способ селективного определения ионов тяжелых металлов в водных средах с помощью люминесцентной мультизондовой системы № 2018107123 : заявл. 26.02.2018; опубл. 06.08.2019 / Мельников А. Г. – Текст : непосредственный. 35. вод. ПНД Ф 14.1:2:4.128-98 Количественный химический анализ Методика нефтепродуктов выполнения в пробах измерений природных, массовой питьевых, концентрации сточных вод флуориметрическим методом на анализаторе жидкости «Флюорат-02»: издание официальное: утверждены: Заместителем Председателя Государственного комитета РФ по охране окружающей среды: дата введения 01.05.2012. – М. : Федеральная служба по надзору в сфере природопользования. – 25 с. – Текст : непосредственный.

90 36. Пименова, Е. В. Химические методы анализа в мониторинге водных объектов : учебное пособие / Е. В. Пименова – Пермь : Изд-во ФГБОУ ВПО Пермская ГСХА, 2011. – 138 с.: ил.; 20 см. – Библиогр.: с. 35. – Текст : непосредственный. 37. Садчиков, А. П. Методы изучения пресноводного фитопланктона: учебное пособие / А. П. Садчиков – М. : Университет и школа, 2003. – 157 с.: ил.; 19 см. – ISBN 5–94391–015–8. – Текст : непосредственный. 38. Сопрунова, О. Б. Методы биолюминесцентной АТФ-метрии: методические указания для выполнения лабораторных работ / О. Б. Сопрунова – Астрахань : Изд–во АГТУ, 2017. – 35 с. – Текст : непосредственный. 39. Трифонова, Т. А. Исследование процессов нитрификации методами лабораторного моделирования / Т. А. Трифонова [и др.]. – Текст : непосредственный // Вода: химия и экология. – 2015. – № 8. – С. 79–83. 40. Тулина, Л. М. Гигиенические аспекты водопотребления промышленного города и оценка риска для здоровья населения: специальность 14.00.07 «Гигиена»: диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Тулина Лариса Михайловна ; Оренбургская государственная медицинская академия. – Оренбург, 2006. – 120 с. – Текст : непосредственный. 41. Унифицированные методы исследования качества вод. Ч. III. Методы биологического анализа вод. Прил. 2. Атлас сапробных организмов. М. : Секретариат СЭВ. – 1977. – 228 с. – Текст : непосредственный. 42. Чумакова, В. Н. Экологические критерии выбора метода обеззараживания природной воды / В. Н. Чумакова. – Текст : непосредственный // Экология и жизнь : сборник материалов VIII Международной научно–практической конференции. – Пенза, 2005. – С. 193–195.

91 43. Эльпинер, Л. И. Качество природных вод и состояния здоровья населения в бассейне Волги / Л. И. Эльпинер. – Текст : непосредственный // Водные ресурсы, 1999. – № 26. – С. 60–70. 44. Ademollo, N. The analytical problem of measuring total concentrations of organic pollutants in whole water / N. Ademollо. – Text : direct // Trends in Analytical Chemistry, 2012. Vol. 5, № 5. P. 12-18. 45. Agus, S. Assessment of persistent organic pollutants in sediments from Lower Mekong River Basin / S. Agus. – Text : direct // Chemosphere. – 2011. – 82, № 5. – Р. 679-686. 46. Berezina, N. A. An integrated approach to the assessment of the eastern Gulf of Finland health: a case study of coastal habitats / N. A. Berezina. – Text : direct // Journal of Marine Systems. – 2017. – Vol. 171. – P. 159-171. 47. Bergstrom, A. K. The use of TN:TP and DIN:TP ratios as indicators for phytoplankton nutrient limitation in oligotrophic lakes affected by N deposition / A. K. Bergstrom. – Text : direct // Aquatic Sciences. – 2010. – Vol. 72 (3). – P. 277-281. 48. Besmer, M. The feasibility of automated online flow cytometry for in–situ monitoring of microbial dynamics in aquatic ecosystem / M. Besmer. – Text : direct // Frontiers in microbiology. – 2014. – № 5. – Р. 265–273. 49. Boualam, М. Relationships between coliform culturability and organic matter in low nutritive waters / M. Boualam. – Text : direct // Water Research. – 2002. –V. 36. – №10 – Р. 412–420. 50. Carpenter, S.R., Trophic cascade in lakes: lessons and prospects / S. R. Carpenter. – Text : direct // Trophic cascades: predators, prey, and the changing dynamics of nature. – 2010. – P. 55-69. 51. Cragg, G. M. Natural Products as Sources of New Drugs from 1981 to 2014 / G. M. Cragg. – Text : direct // Journal of Natural Products. – 2016. – P. 155-169.

92 52. Curcic, S. A microbiological index in estimation of surface water quality / S. Curcic. – Text : direct // Hydrobiology. – 2002. – № 1. – Р. 219– 224. 53. Douterelo, I. Methodological approaches for studying the microbial ecology of drinking water distribution systems / I. Douterelo. – Text : direct // Water Research. – 2014. – V 65. – P. 134-156. 54. Hafizan, J. Spatial water quality assessment of Langat River Basin (Malaysia) using environmetric techniques / J. Hafizan. – Text : direct // Environ. Monit. and Assess. – 2011. – 173, № 1-4. – Р. 625-641. 55. Harnisz, M. Total resistance of native bacteria as an indicator of changes in the water environment / M. Harnisz. – Text : direct // Environmental Pollution. – 2013. – V 174. –P. 85-92. 56. Horváth, R., Pedersen, H. Optical waveguide sensor for on–line monitoring of bacteria / R. Horváth, H. Pedersen. – Text : direct // Optics letters. – 2003. – № 14. – Р. 1233–1235. 57. Ji, J. Real–Time Detection of Bacterial Contamination in Dynamic Aqueous Environments Using Optical Sensors / J. Ji. – Text : direct // Analytical Chemistry. – 2004. – № 5. – Р. 1411–1418. 58. Jia, L. Application of Electrochemical Enzyme Biosensor in Environmental Pollution Monitoring / L. Jia. – Text : direct // Prog. Chem. – 2012. – V. 24-№ l. – P. 131-143. 59. Kusić, D. Identification of water pathogens by Raman microspectroscopy / D. Kusić. – Text : direct // Water Research. – 2014. – V 48. – P.179-189. 60. Liu, G., Verberk, J, Bacteriology of Drinking Water Distribution Systems: an Integral and Multidimentional Review / G. Liu, J. Verberk. – Text : direct // Applied Microbioogy and Biotechnology. – 2013. – № 21. – Р. 9265– 9276.

93 61. Ma, S. Visible paper chip immunoassay for rapid determination of bacteria in water distribution system / S. Ma. – Text : direct // Talanta. – 2014. – V 120. – P. 135-140. 62. Nnane, D. E. Sustainable microbial water quality monitoring programme design using phage-lysis and multivariate techniques / D. E. Nnane. – Text : direct //Science of The Total Environment. – 2011. – V 409. – Issue 24. – P. 5188-5195. 63. Olaniran, A. O. Whole-cell bacterial biosensors for rapid and effective monitoring of heavy metals and inorganic pollutants in wastewater / A. O. Olarniran. – Text : direct // J. Environ. Monit. – 2011. – V.13. – № 10. – P. 2914-2920. 64. Park, S. J. Detection of Microorganisms using Terahertz Metamaterials / S. J. Park. – Text : direct // Scientific reports. – 2014. – № 4. – Р. 49–88. 65. Perelo, L. W. Review: In situ and bioremediation of organic pollutants in aquatic sediments / L. W. Perelo. – Text : direct // Journal of Hazardous Materials. – 2010. – Vol. 177. – № 1-3. – P. 81-89. 66. Prest, E. Monitoring microbiological changes in drinking water systems using a fast and reproducible flow cytometric method / E. Prest. – Text : direct // Water Research – 2013. – № 19. – Р. 7131–7142. 67. Ravikumar, S. Construction of a bacterial biosensor for zinc and copper and its application to the development of multifunctional heavy metal adsorption bacteria / S. Ravikumar. – Text : direct // Process Biochemistry. 2012. – V. 47. – № 5. – P. 758765. 68. Rozhko, T.V. Detoxification of AM-241 Solutions by Humic Substances: Bioluminescent Monitoring / T. V. Rozhko. – Text : direct // Anal. & Bioanal. Chem. – 2011. – V. 400. – № 2. – P. 329-334.

Рецензии:

Авторизуйтесь, чтобы добавить рецензию

- у работы пока нет рецензий -

Отзывы:

Авторизуйтесь, чтобы оставить отзыв