Получение рекомбинантной ДНК, кодирующей синтез модифицированного инсулин-подобного фактора роста (IGF-LR3)

В рамках данной работы была получена генетическая конструкция, кодирующая ген белка модифицированного инсулин-подобного фактора роста (IGF-LR3). Научно обоснована перспективность использования данной конструкции в качестве активной молекулы генотерапевтического лекарственного препарата для лечения мышечной дистрофии и карликовости. Синтезирован целевой белок в модельной культуре клеточной линии фибробластов.

Биотехнология
Диссертации

Вуз: Санкт-Петербургский государственный политехнический университет (ФГБОУ ВПО «СПбГПУ»)

ID: 5f3d1a40cd3d3e00014f05b8
UUID: 02002a80-c445-0138-1cdd-0242ac180006
Язык: Русский
Опубликовано: 12 месяцев назад
Просмотры: 98

22.76

Евгений Кивилев

Санкт-Петербургский государственный политехнический университет (ФГБОУ ВПО «СПбГПУ»)


3

Комментировать 5

Рецензировать 7

Скачать - 3,2 МБ


Поделиться работой
Current View

Рецензии:

  Авторизуйтесь, чтобы добавить рецензию

Рецензия от Яна Пазенко
Рецензия на диссертационную работу по теме «Получение рекомбинантной ДНК, кодирующей синтез модифицированного инсулин-подобного фактора роста (IGF-LR3)» от инженера-химика ООО "Ассоциация Медицины и Аналитики" Пазенко Я.Э.

11 месяцев назад
Рецензия от Вершилов Сергей Вячеславович
Рецензия от С.В. Вершилова, к.х.н., старший научный сотрудник ФГУП НИИСК

11 месяцев назад
Рецензия от Попова
Рецензия на магистерскую диссертацию Кивилева Е.В. "Получение рекомбинантной ДНК, кодирующей синтез модифицированного инсулин-подобного фактора роста (IGF-LR3)" для конкурса "Путь в науку" от профессора, доктора химических наук Поповой Л.М.

11 месяцев назад
Рецензия от Екатерина Аронова
Рецензия на работу Кивилева Е.В. доцента СПбПУ к.т.н. Ароновой Е.Б.

11 месяцев назад
Рецензия от Цырульникова Анжелика
Диссертационная работа посвящена созданию генной конструкции, способной экспрессировать белок - модифицированный инсулин-подобный фактор роста 1 (IGF-LR3) в клетках млекопитающих. Показана перспективность использования полученной конструкции в качестве основы для генотерапевтических препаратов, предназначенных для терапии наследственных генетических нарушений роста.

11 месяцев назад
Рецензия от Ирина Тимошенкова
Рецензия на работу Кивелева Е.

12 месяцев назад
Рецензия от Евгений Кивилев
Рецензия на работу Заведующего кафедрой молекулярной биотехнологии Санкт-Петербургского государственного технологического института (технического университета) д. б. н. Виноходова Д. О.

12 месяцев назад

0.5
Дарья Черникова

Научно-исследовательская часть магистерской диссертации Кивилева Евгения, выполненная на базе ФГУП ГНИИ Военной Медицины МО РФ при поддержке фирмы ООО «БИОССЕТ», направлена на получение рекомбинантной ДНК, кодирующей синтез модифицированного инсулин-подобного фактора роста (IGF-LR3). В ходе работы была разработана технология получения генетического материала (плазмиды pcDNA3.1(+)-IGF-LR3) в опытно-промышленном масштабе, получена модельная клеточная культура клеток фибробластов fib7, создана рекомбинантная клеточная культура клеток фибробластов fib7/pcDNA3.1(+)-IGF-LR3 - продуцент рекомбинантного белка IGF-LR3, показана экспрессия рекомбинантного белка в клетках фибробластов методом вертикального электрофореза в восстанавливающих условиях, проведен анализ и подтверждено соответствие ориентации и места встраивания гена IGF-LR3 в плазмиду методом секвенирования по методу Сэнгера. Магистерская диссертация Кивилева Евгения актуальна, обладает несомненной научной новизной и практической значимостью и представляет собой совокупность теоретических положений и практических разработок и рекомендаций.


0.5
Светлана Елисеева

В магистерской диссертации Евгений Кивилев разработал и обосновал технологию получения генетического материала (плазмиды pcDNA3.1(+) IGF-LR3) в опытно-промышленном масштабе: получена модельная клеточная культура клеток фибробластов fib7, проведен анализ и подтверждено соответствие ориентации и места встраивания гена IGF-LR3 в плазмиду методом секвенирования по методу Сэнгера, получена рекомбинантная ДНК, кодирующая синтез модифицированного инсулин-подобного фактора роста (IGF-LR3), что соответствует поставленной цели исследования. Данная работа представляет законченное научное исследование, тема которого является актуальной и перспективной и требует дальнейшей разработки.


0.5
Смятская Юлия

В данной работе освещена актуальная проблема - создание генетической конструкции, экспрессирующей синтез IGF-LR3 в клетках млекопитающих. Для решения поставленных задач автором использовались современные методы анализа, что подтверждает практическую значимость исследования. Диссертация представляет большой интерес для фармкомпаний и поэтому очень важно продолжить данные исследования и опубликовать результаты в высоко рейтинговых изданиях базы Scopus и WoS.


0.5
Виктория Преловская

Данная работа имеет большую значимость как в научной, так и в практической области. Автор подробно описывает строение, методы конструирования, получения и доставки, а также возможности применения генетической конструкции, включающей в себя целевой ген IGF-LR3, необходимый в создании генотерапевтических молекул для лечения заболеваний, связанных с недостаточностью IGF1 (инсулин-подобного фактора роста). Кроме этого, Евгений Кивилев детально раскрывает аспекты, затрагивающие приготовление бактериальных клеток для трансформации и собственно процедуру трансформации, стадии культивирования в биореакторе и проведение вертикального и горизонатльного электрофореза для разделения и последующего выделения продуктов фракционирования ДНК. Автор доказал актуальность создания генетической конструкции, экспрессирующей ген модифицированного инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-LR3), перспективной для применения в генной терапии и для получения промышленных количеств рекомбинантной ДНК, кодирующей синтез модифицированного инсулин-подобного фактора роста.


3.5
Иванченко Ольга Борисовна

Представленная работа построена по традиционному плану. Обзор литературы отражает анализ работ по теме исследования. Довольно подробно представлены имеющиеся на сегодняшний день данные о инсулиноподобных факторах роста, молекулярных механизмах генной терапии. В отдельных главах освещены современные методы доставки гена. Представленная работа выполнена на высоком методическом уровне. В ходе экспериментов создана плазмида pcDNA3.1(+)-IGF-LR3, кодирующая целевой ген, а также рекомбинантный штамм Escherichia coliDH5α/pcDNA3.1(+)-IGF-LR3. Проведены эксперименты по выделению плазмиды pcDNA3.1(+)-IGF-LR3 из бактерий. В ходе исследований автором получена рекомбинантная культура клеток фибробластов, несущая плазмиду pcDNA3.1(+)-IGF-LR3. На культуре клеток фибробластов показана экспрессия целевого гена с получением белка IGF-LR3. В результате была разработана технология получения плазмидной конструкции pcDNA3.1(+)-IGF-LR3. Это может послужить основой для промышленной разработки генотерапевтического препарата. Следует отметить, что Кивилевым Евгением была проделана большая работа и, в целом, оставляет благоприятное впечатление. Результаты исследований могут быть опубликованы в рецензируемом научном периодическом издании и/или отраслевом журнале, т.к. исследования представляют большой практический интерес, и результаты могут быть использованы фармацевтическими компаниями для расширения ассортимента продукции.

Для лиц старше 18 лет