Влияние Pseudomonas fluorescens на некоторые почвенные микроорганизмы

Из-за увеличения и неконтролируемого использования минеральных удобрений и химических средств защиты растений, почва подвергается загрязнению различными химическими веществами, что негативно на нее влияет, при этом снижая количество и качество растениеводческой продукции. Но в современном мире появилась тенденция использования бактериальных и других биоудобрений, на основе различных микроорганизмов. Среди этой группы широко представлены бактерии рода Pseudomonas. Благодаря своей биологической активности представители этого рода используются даже для очистки природных объектов от нефтяных загрязнений, пестицидов и некоторых других поллютантов. Однако, бактерии Pseudomonas играют значительную роль в порче продуктов (особенно яиц, молока, мяса, рыбы). Pseudomonas fluorescens является возбудителем псевдомоноза рыб, распространенного в хозяйствах, применяющих индустриальные методы рыбоводства. Для эксперимента были выбраны почвенные микроорганизмы - бактерии Phytophthora infestansи представителей рода Rhizobium sp. На первом этапе эксперимента из пораженных фитофторозом клубней картофеля выделили чистую культуру Phytophthora infestans.Из выросших колоний приготовили мазки, окрасили по Грамму и микроскопировали отмечая морфологию клеток, типичную для Phytophthora infestans. Затем из корневых клубеньков клевера выделили азотфиксирующие бактерии, культивировали их на бобовом агаре, накопили чистую культуру, приготовили мазки, окрасили по Грамму и микрокопировали. При микроскопии обнаружили морфотипы типичные для представителей рода Rhizobium sp. Особенности взаимного влияния P.fluorescens на возбудителя фитофтороза и бактерии рода Rhizobium sp. по методике, придуманной нами. Выполняли посевы 1 мл бактериальной взвеси (стандарт мутности, эталон № 10) в питательные среды: в Сабуро – Phytophthora infestans, в бобовый агар бактерии рода Rhizobium, в среду Хоттингера - Pseudomonas fluorescens. Через 2 суток культивирования в чашках с культурами Phytophthora infestansи бактериями рода Rhizobium стерильным пробойником делали лунки и заполняли из средой с Pseudomonas fluorescens. При учете результатов через 12, 24, 48 часов совместного культивирования микроорганизмов при +24ºС зона задержки роста отсутствовала. Таким образом промежуточным выводом исследования явилось отсутствие выраженного антагонистического действия P. fluorescens на Phytophthora infestansи бактерии рода Rhizobium. На следующем этапе в расплавленную, остуженную среду Сабуро и в бобовый агар внесли взвесь P. fluorescens и выполнили поверхностный посев шпателем на среду Сабуро 1 мл суспензии Phytophthora infestans и на бобовый агар 1 мл суспензии бактерии рода Rhizobium (стандарт мутности, эталон № 10). Контроль – посевы суспензии Phytophthora infestans на среду Сабуро и суспензии бактерий рода Rhizobiumна бобовый агар без Pseudomonas fluorescens. Исследования были проведены в десятикратных повторах. Из результатов этого этапа эксперимента следует, что количество колоний Phytophthora infestans, выросших на среде Сабуро с P. fluorescens через 48 и 72 часа культивирования достоверно выше, чем в контроле и составило 54,54±2,7 и 72,34±2,9 соответственно. Количество колоний бактерии рода Rhizobium, выросших на бобовом агаре с P. fluorescens через 48 и 72 часа культивирования достоверно выше, чем в контроле и составило 55,12±2,4 и 61,24±2,4 соответственно. Таким образом, выявлено достоверное стимулирующее действие P. fluorescens на бактерии рода Rhizobium sp. при совместном культивировании, что позволяет использовать P. fluorescens при разработке новых бактериальных удобрений. Однако, при применении таких препаратов необходимо учитывать стимулирующее действие данных микроорганизмов на возбудителей фитофтороза растений.