Влияние сырья биогазовой станции на выход биогаза

Головина Е.В.

Влияние сырья биогазовой станции на выход биогаза

06.04.01 Микробиология

Биология

Диссертации

Вуз: Белгородский государственный университет - национальный исследовательский университет (НИУ «БелГУ»)

ID: 5c1a59697966e104f6f8542b

UUID: 9430c6d0-e5ca-0136-fe73-525400005860

Язык: Русский

Опубликовано: больше 5 лет назад

Просмотры: 24

Головина Е.В.

Источник: Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Комментировать 0

Рецензировать 0

Скачать - 1,6 МБ

Поделиться работой

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ «БЕЛГОРОДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» ( Н И У « Б е л Г У » ) ИНСТИТУТ ИНЖЕНЕРНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ И ЕСТЕСТВЕННЫХ НАУК Кафедра микробиологии и биотехнологии ВЛИЯНИЕ СЫРЬЯ БИОГАЗОВОЙ СТАНЦИИ НА ВЫХОД БИОГАЗА Магистерская диссертация студента очной формы обучения направления подготовки 06.04.01 Микробиология 2 курса группы 07001643 Головиной Евгении Валериевны Научный руководитель доктор биологических наук, заведующая кафедры биотехнологии и микробиологии Батлуцкая И.В. Рецензент Начальник лабораторной биогазовой установки ООО «АльтЭнерго» Охримчук Д.П. БЕЛГОРОД 2018

2 ВВЕДЕНИЕ..................................................................................................................3 ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.......................................................................5 1.1. История открытия биогаза.....................................................................5 1.2. Свойства биогаза.....................................................................................6 1.3. Сырье для получения биогаза…………………………………………9 1.4. Особенности установки по производству биогаза.............................12 1.5. Факторы, влияющие на процесс получения биогаза.........................13 1.6. Характеристики процесса получения биогаза....................................15 1.7. Стадия гидролиза при получении биогаза..........................................17 1.7.1. Гидролиз белков..........................................................................19 1.7.2. Гидролиз жиров...........................................................................20 1.8. Субстрат для стадии гидролиза при производстве биогаза………..21 1.9. Технологические параметры, необходимые для производства биогаза………………………………………………………………………..22 1.10. Биогаз как сырье для получения биоводорода……………………...25 1.11. Классификация биогазовых установок……………………………...28 ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...........................................33 2.1. Объект исследования...............................................................................33 2.2. Методы исследования..............................................................................34 2.2.1. Метод прямого посева на твердые питательные среды (метод Коха)…………………………………………………………………….35 2.2.2.Метод микроскопического изучение морфологии микроорганизмов.....................................................................................36 2.2.3. Метод выделение чистой культуры микроорганизмов..............36 2.2.4. Метод окраска бактерий по Граму...............................................38 2.2.5. Метод статистической обработки результатов...........................39 Г.ЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ......................................................42 3.1. Общая численность микроорганизмов, выросших на различных питательных средах........................................................................................42

3 3.1.1. Анализ пробы №1..........................................................................43 3.1.2. Анализ пробы №2..........................................................................45 3.2. Микроскопическое исследование микрофлоры субстрата для стадии гидролиза при получении биогаза.................................................................46 3.2.1. Окраска бактерий по Граму..........................................................48 3.2.2. Посев микроорганизмов методом истощающего штриха…….53 3.3. Статистическая обработка цифровых данных методом дисперсионного анализа.................................................................................56 3.4. Размер микроорганизмов………………………………………………61 3.4.1. Размер микроорганизмов пробы №1...........................................62 3.4.2. Размер микроорганизмов пробы №2...........................................64 3.5. Выход биогаза…………………………………………………………...66 ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ...................................................................................67 СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.......................................................69 ПРИЛОЖЕНИЕ 1......................................................................................................75 ПРИЛОЖЕНИЕ 2…………………………………………………………………..77

4 ВВЕДЕНИЕ Технический прогресс в развитии современного производства связан с поиском надежных, альтернативных, экологически чистых, возобновляемых источников энергии и создания энергосберегающих технологий. В настоящее время достижения микробиологии многообещающие во многих отраслях экономики РФ: в промышленности, в экологии, медицине, сельском хозяйстве и в энергетике. В частности, в энергетической отрасли используются новые источники биоэнергии, преобразования веществ, микробиологии может полученные на основе извлечение из биомассы значительно изменить микробиологического биогаза. Развитие промышленное и сельскохозяйственное производство, повысить эффективность использования природных ресурсов, решить экологические проблемы, в полной мере использовать новые альтернативные источники энергии. Возрастающий дефицит ископаемого топлива выделяет острую проблему создания и внедрения технологий, связанных с использованием возобновляемых источников энергии и биосистемам. Для этих целей используют растения и фототрофные микроорганизмы, которые с высокой эффективностью превращают солнечную энергию в энергию химических связей. Однако проблемы промышленного использования альтернативных источников энергии, о чем свидетельствует анализ библиографических данных, касаются переработки отходов животноводства. Мировая практика переработки органических отходов, с целью получения биогаза ориентирована на переработку растительного сырья. Функциональная экономика РФ находится в других реалиях и ставит задачи по утилизации всех видов отходов. В этой связи наиболее сложные отходы животноводства, поскольку растения это продуценты и их органические вещества это продукты так называемой первой ступени органического синтеза.

5 Животные включают растительные органические вещества в свой метаболизм. Поэтому в результате жизнедеятельности животных получаются очень сложные органические соединения. Но вместе с тем эти органические соединения, в химических связях которых аккумулировано большее количество энергии, которую и нужно, путем трансформации, она переводится в доступные в хозяйственной деятельности человека виды энергии. Данные обстоятельства ставят перед сотрудниками альтернативной энергетики РФ достаточно сложные вопросы модернизации традиционных схем получения биогаза с целью повышения эффективности выхода конечного продукта. В этой связи становится понятна роль изучения органической массы субстратов, в том числе животного происхождения, используемых при получении биогаза. В связи с этим, целью работы является: изучение влияния сырья биогазовой станции на выход биогаза. Для достижения этой цели нами были сформулированы следующие задачи: 1. дать описание сырью для получения биогаза; 2. сделать серию посевов субстрата стадии гидролиза на твердые питательные среды для определения до рода микрофлоры субстрата стадии гидролиза, взятых проб; 3. сопоставить микрофлору стадии гидролиза с опытными данными по выходу биогаза из различного сырья.

6 ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 1.1. История биогаза Первые методические исследования биогаза начал итальянский ученый Аллесандро Вольта. Ему удалось собрать болотный газ в отложениях озер северной Италии в 1770 году, после чего Аллесандро Вольта начал проводить опыты по сжиганию этого газа. Английский физик Фарадей, в первой четверти XVIII в. определил болотный газ как углеводород. Всего лишь в 1821 году исследователю Авогадро удалось установить химическую формулу данного газа, им оказался метан. Известный французский бактериолог Пастер в 1884 году провел эксперименты с биогазом, который он выделил из твердого навоза. Он рекомендовал использовать навоз из парижских конюшен для производства биометана для уличного освещения [10, 11]. В конце XIX века было обнаружено анаэробное брожение, с помощью которого можно обрабатывать сточные воды. Это открытие дало мощный стимул к развитию технологии производства биогаза. В 1897 году в одной больнице Индии построили первую установку, биогаз которой использовался для освещения, а в 1907 году как топливо двигателя для производства электроэнергии. В Германии инженер с завода по переработке органических отходов с 1906 года на территории Рурского района начал планомерное строительство анаэробных двухуровневых очистных установок, известных как «эмшерский колодец». В наши дни каждая очистная установка имеет аэробные и анаэробные этапы производства, получаемый биогаз применяется как источник тепла и электричества [16]. К 40-м годам канализационных XX газов. в. Для быстро распространялось ускорения анаэробного использование брожения были

7 разработаны плавающие колоколообразные газгольдеры, мощные мешалки и системы отопления. В это же время широкое распространение получили эксперименты по очистке газа от воды, двуокиси углеводов и сероводорода с целью его расфасовки в железные баллоны и приминения его в качестве топлива для транспорта [10]. В первой половине 1940 года в Германии в связи с увеличением спроса на «газовое топливо» пытались увеличить производство биогаза за счет добавления твердых органических отходов, то есть использовали метод, называемый сегодня совместной ферментацией. Очень подробные эксперименты с совместной ферментацией были проведены Францем Попелем во время войны в Амельсфорте, Нидерланды. Даже тогда органические остатки домашнего хозяйства были добавлены для экспериментов. В 1940 году в Штутгарте впервые удалось успешно добавить отсепарированный жир [29]. 1.2. Получение и использование биогаза Биогаз состоит из смеси газов. В его состав входят: 50-70% метана, 5030% углекислого газа, 1% сероводорода и незначительных примесей азота, кислорода, водорода и угарного газа. Синонимами биогаза являются такие слова, как канализационный или болотный газ, метановый газ. Различные виды микроорганизмов извлекают углерод из субстрата, содержащего органические вещества, в анаэробных условиях. Данный газ применяется как обычный природный газ для отопления и получения электроэнергии. Так же биогаз может использоваться для заправки автомобилей. Для работы электрогенераторов биогаз используется без дополнительной очистки. Кроме получения энергии биогазовые станции могут использоваться как очистные сооружения на фермах, птицефабриках, винокуренных заводах, сахарных

8 заводах, мясоперерабатывающих заводах и, в отдельных случаях, могут заменять ветеринарные санитарные заводы, где падаль может быть утилизирована с получением биогаза [1, 19]. В Белгородской области для изучения, обобщения и совершенствования на практике мирового опыта использования биогазовых технологий впервые на территории РФ была построена и запущена биогазовая станция «Лучки». В настоящее время в Белгородской области в результате выполнения региональных целевых проектов по развитию птицеводства и скотоводства ежегодно образуется более 1020 тысяч тонн навоза крупного рогатого скота, 1800 тысяч м3 свиноводческих стоков, более 1100 тысяч тонн куриного помета. Из данного объема органических отходов можно в сутки производить свыше 500 тысяч м3 биогаза. В связи с накоплением больших объемов органических отходов, создаются экологические проблемы. В то же время отходы, содержащие органические вещества, являются возобновляемым сырьем для производства таких ценных продуктов, как удобрения и бикогаза. Для заправки транспорта биогаз подвергается дополнительной очистке. После таких манипуляций биогаз становится полным аналогом природного газа (90% метана (CH4) и 10% углекислого газа (CO2)). Другим продуктом обработки биогаза является углекислый газ. Он используется в качестве сухого льда, для карбонизации, а так же для технических целей [5, 36]. Биогаз – продукт метаболизма бактерий, которые разлогают органический субстрат. ОН является продуктом метаболизма данных бактерий. Процесс получения биогаза можно разделить на 4 стадии, в каждом из которых участвует определенные группы бактерий: 1. Стадия гидролиза субстрата. На этом этапе аэробные микроорганизмы расщепляют высокомолекулярные органические вещества (белоки, углеводы, жиры, целлюлозу) с помощью ферментов в низкомолекулярные соединения, такие как сахара, аминокислоты, жирные кислоты и вода. Ферменты, гидролитических микроорганизмов, расположенны на внешней стенке бактерий

9 (так называемые экзоферменты). Они разрушают органические составляющие субстраты на небольшие водорастворимые молекулы. Полимеры превращаются в мономеры. Данный этап длится долгое время и зависит от экзоферментов. Группа экзоферментов включает в себя гидролазы, которые вызывают гидролиз белков, жиров, углеводов. Белки расщепляются на аминокислоты и пептоны, жиры – на жирные кислоты и глицерин, углеводы – на дисахариды и моносахариды. Гидролиз белков вызывают ферменты протеазы, жиров – липазы, углеводов – карбогидразы. На процесс гидролиза влияет уровень кислотности, который должен составлять от 4,5 до 6, и время пребывания в камере для гидролиза. В данной стадии участвуют следующие микроорганизмы: Clostidium, Baсteroides, Rumiococcus, Butyrivibrio, а также факультативноанаэробные: Escherichia, Bacillus. 2. Стадия ацидогенеза. На данном этапе мономеры молекул проникают в клетки бактерий, где они продолжают разлагаться. В этом процессе участвуют аэробные кислотообразующие бактерии, потребляющие кислород и создающие анаэробные условия, необходимые для метанообразующих бактерий. При рН 67,5 образуются следующие соединения: нестабильные жирные кислоты, такие как уксусная, муравьиная, масляная, пропионовая, низкомолекулярный спирт этанол и газы - диоксид углерода, углерод, сероводород и аммиак. 3. Стадия ацетогенеза. При этой стадии бактерии из органических кислот получают исходные продукты для образования метана, а именно: уксусную кислоту, углекислый газ и углерод. Данные бактерии очень чувствительны к изменениям температуры. 4. Стадия метаногенеза. При метаногенезе образуются метан, углекислый газ и вода. На данной стадии 70% объема биогаза образуется из уксусной кислоты. Метановые бактерии - исключительно анаэробы. Оптимальный уровень рН данной стадии примерно равен 7. Микроорганизмы данной стадии являются физиологически однородной группой, но им присущи широкое разнообразие морфологических форм [4].

10 Биогаз по своим свойствам схож с природным газом. Объем газов зависит от температуры и давления окружающей среды. Повышение температуры приводит к растяжению газа и как следствие к уменьшению содержания метана (калорийности), и наоборот. Калорийность так же снижается при повышении влажности биогаза. Данные о производстве биогаза выражают в литрах или кубометрах метана на килограмм органического сухого вещества (ОСВ) [3,11]. 1.3. Сырье, используемое для получения биогаза. В состав сырья для получения биогаза входит широкий спектр органических отходов: твердые и жидкие отходы агропромышленного комплекса, воды, сточные твердые бытовые отходы, отходы лесопромышленного комплекса. Данный состав зависит от региональной направленности. При этом наиболее эффективным является использование отходов животноводческих и птицеводческих агропромышленного комплекса и сточных вод [8, 54]. ферм, предприятий

11 Таблица 1.1. Выход биогаза из различного сырья (по Б. Эдер и Х. Шульц, 2011 год) Тип сырья Выход газа, м3 на тонну сырья Навоз коровий 60 Навоз свиной 65 Помет птичий 80-140 Отходы бойни 300 Жир 1300 Барда после спиртовая 50-70 Зерно 500-600 Силос, ботва, трава, водоросли 200-300 Молочная сыворотка 50 Свекольный и фруктовый жом 60-70 Глицерин технический 500 Дробина пивная 150-180 Таблица 1.2. Выход биогаза из различного сырья (по данным компании biteco-energy, Киев, 2015 год) Субстрат Кукурузный силос Выход биогаза м3 на тонну сырья 185-205 Навоз коровий 40-50 Навоз свиной 60-75 Птичий помет 80-100 Дробина пивная 120-130 Глицерин 840-850 Зернобобовые 580-600

12 Таблица 1.3. Выход биогаза из различного сырья (по данным биогазовой станцией «Лучки», 2017 год) Тип сырья Выход биогаза, м3 на тонну сырья Силос кукурузный 172-198 Свекольный жом 101-139 Шелуха подсолнечника неизмельчѐнная 399-537 Шелуха подсолнечника измельчѐнная 520-565 Ядра семян подсолнечника неизмельчѐнные 749 Ядра семян подсолнечника измельчѐнные Отходы маслопроизводства (жмыхи) 794 376-550 Зерноотходы ячменя и пшеницы (мякина) 486-517 Отходы производства комбикормов АБ 376-483 Отходы зернобобовых культур 107 Зелѐная масса кукурузы 149 Зелѐная масса овощей (ботва) 67 Опилки древесные 313-406 Кишки МПЗ 279-300 Шлам МПЗ 35-67 Шлам Белая Птица 233-334 Жир Белая Птица 440-493 Отходы инкубации Белая птица 278-428 Микс Белая птица 421-440 Кровь 80-103 Куриный помѐт 293 Шлам творожный 28 Конфеты Конти 774 Нефтешламмы 13-56

13 Поскольку исходное сырьѐ всегда имеет разный процент абсолютной органики, зависящий и от времени получения, и от условий хранения, а в случае неоднородного сырья этот показатель разнится даже в пробах, отобранных в один день, но в разных участках партии, необходимо рассматривать выход биогаза в виде промежутков, с минимальными и максимальными значениями [8,10]. При анализе таблиц 1.1.-1.3. видно, что с течением времени технология производства биогаза совершенствуется. Это подтверждается увеличением выхода биогаза из различного сырья. При рассмотрении отдельных позиций данных таблиц выход биогаза при использовании сырья животного происхождения выше на биогазовой станции «Лучки». Данный факт связан с тем, что в Белгородской области преобладает животноводство. 1.4. Особенности установки по производству биогаза На промышленной установке по производству биогаза сырье подается периодически. Данная манипуляция осуществляется через насосную станцию или загрузчик в реактор. Реактор представляет собой изолированный железобетонный резервуар, оборудованный мешалками, в котором поддерживается постоянная температура [28]. В реакторе находятся сообщества микроорганизмов, которые в результате своей жизнедеятельности преобразуют органические отходы. Продуктом таких преобразований является биогаз. Для поддержания благоприятных условий для жизни бактерий требуется периодическая подача отходов, поддержание определенного температурного режима и постоянное перемешивание субстрата. Полученный биогаз хранится в специальном хранилище, затем, при

14 необходимости, проходит систему очистки и доставляется потребителям. Реактор является практически герметичным и безопасным [9]. 1.5. Факторы, влияющие на процесс получения биогаза Для эффективного функционирования микроорганизмов, необходимо создание определенных условий:  Определенный уровень влажности. Метановые бактерии могут осуществлять свою жизнедеятельность при влажности среды более 50%.  Содержание кислорода. При получении биогаза участвуют аэробные и анаэробные микроорганизмы. На первых этапах в основном есть аэробы, при том, что в конце процесса производства биогаза присутствуют строгие анаэробы.  Попадание света на субстрат. Хотя свет не является лимитирующим фактором для бактерий, он замедляет процесс их роста и размножения. Влияние света на процесс ограничивают с помощью светонепроницаемой крышки.  Отсутствие скачков температуры. Скорость процесса напрямую зависит от температурного режима. Чем выше температура в реакторе, тем быстрее протекает стадия гидролиза субстрата. Таким образом сокращается и время разложения субстрата. При повышении температуры, уменьшается содержание метана в биогазе. Это связано с растворением биогаза в субстрате при высоких температурах. Существует три температурных режима для функционирования различных групп микроорганизмов: 1. Психрофильный режим, при котором благоприятная температура находится ниже 25ºС,

15 2. Мезофильный режим, при котором благоприятная температура составляет 25-45ºС, 3. Термофильный режим, при котором благоприятная температура находится выше 45ºС [21, 33].  Уровень кислотности. Для гидролитических и кислотообразующих бактерий оптимум pH составляет 4,5-6 и 6-7,5 соответственно. Бактерии, образующие уксусную кислоту и метан могут осуществлять свою жизнедеятельность только при нейтральном или слабощелочном уровне кислотности (рН 6,8-8). Известно, что уровень рН является лимитирующим фактором. При его повышении или снижении, бактерии теряют свою активность, вследствие чего замедляется образование биогаза .  Подача субстрата. Бактериям для роста и размножения необходимы питательные вещества, витамины, растворенные соединения азота, минералы и микроэлементы. Данные вещества в нужной концентрации содержатся в жидком и твердом навозе, в сене, кукурузе (в свежей или консервированной), пищевых остатках, кухонных отходах, внутренностях животных, барде и молочных продуктах. В качестве ориентировочного значения для составления субстрата можно принимать следующие соотношения питательных веществ: C: N: P = 75: 5: 1 или 125: 5: 1.  Площадь поверхности сырья. Чем более качественно измельчен субстрат, тем быстрее проходит ферментация. Кроме того, субстрат легче перемешивается, смешивается и нагревается, не образуя плавающей корки или осадка. При недостаточном измельчении сырья в реактор может попадать кислород.  Пагубное влияние различных веществ зависит от их концентрации. Это значит, что лимитирующим фактором является концентрация данного вещества по отношению к другим веществам, а не его полное отсутствие. Антибиотики, химиотерапевтические и дезинфицирующие средства могут замедлить или полностью остановить процесс ферментации в зависимости

16 от концентрации. Антибиотики и химиотерапевтические средства могут попасть из организмов животных.  Задерживающий эффект. Он обусловлен, во-первых, накоплением органических кислот, которые образуются при анаэробном разложении органического субстрата. Во-вторых, образованием высокотоксичного сероводорода, который образуется при разложении белков. В-третьих, образованием аммиака, при разложении азотсодержащих субстратов.  Пагубное влияние вторичных компонентов на консорциум бактерий. К вторичным компонентам относятся: 1. Серные соединения (образующиеся в теплицах для выращивания капусты, лука-порея и репчатого лука) 2. Эфирные масла (корки цитрусовых, чеснок) 3. Щавелевая кислота (напр. в разных видах клевера) 4. Цианиды, танины [20].  Токсичность тяжелых металлов зависит от их растворимости в воде. Растворимость в свою очередь зависит от уровня pH. Тяжелые металлы отрицательно действуют на ферменты клеточного обмена веществ, чем замедляют жизнедеятельность бактерий. Нейтрализация ионы тяжелых металлов происходит при взаимодействии ионов тяжелых металлов с сероводородом, после чего образуются тяжело растворимые сульфиды металлов в виде твердого вещества, выпадающего в осадок [41, 49]. 1.6. Методы получения биогаза С точки зрения технических параметров процесса различаются методы получения биогаза. Методы делят по способам подачи субстрата (периодический способ подачи или проточный), по типу перемешивания

17 (полное перемешивание или пробочное проталкивание), одно- или многоступенчатая система и/ либо по консистенции субстрата (твердое сырье или метод переработки в текучем/мокром виде) [30]. Метод периодической подачи. Для метода периодической подачи характерно заполнение ферментационной камеры за одну операцию. Во время получения биогаза субстрат не добавляют и не удаляют. Выход биогаза соответствует кривой роста микроорганизмов. По окончанию времени получения биогаза ферментационная камера освобождается за одну операцию. При этом для следующего цикла производства часть субстрата возвращается обратно в ферментационную камеру для введения различных микроорганизмов [22, 23]. Проточный метод. При использовании данного метода ферментационные камеры должны быть постоянно заполнены. Во время ферментации субстрат добавляют в камеру ферментации, и в то же время из камеры изымается тот же объем субстрата. По сравнению с предыдущим методом, этот метод позволяет производить биогаз без колебаний его процентного выхода [22,23]. Метод полного смешивания. В установках, работающих по методу полного смешивания, субстрат в ферментационной камере смешивается со свежим субстратом. В это же время часть субстрата, в состав которого входит и свежий субстрат удаляется из ферментационной камеры [23, 47]. Метод пробочного проталкивания субстрата. В установках, использующих метод пробочного проталкивания, субстрат как бы проталкивается в виде пробки в продольном направлении по ферментеру. Соотношение диаметра такого резервуара к его длине должен быть не менее 1:4. Мешалка должна устанавливаться поперек направления потока. Для эффективной ферментации после описанного типа ферментера

18 установливают большой дображиватель. Важно отметить, что данная конструкция занимает много места [29]. Одно или многоступенчатый метод. При использовании одноступенчатого технологического метода получения биогаза ферментация проходит все 4 стадии в одном резервуаре. Для установок, использующих многоступенчатый метод, эти процессы происходят последовательно во времени один за другим. При многоступенчатом методе стадии получения биогаза разделяются с помощью разных резервуаров или путем разделения камер в ферментере. В каждой камере или резервуаре поддерживаются определенные условия, необходимые для конкретной стадии получения биогаза [47]. 1.7.Стадия гидролиза при получении биогаза Гидролиз является первым этапом процесса получения биогаза. На этом полимеры, такие как сахара, жиры и белки, превращаются в мономеры такие как аминокислоты, простые сахара, жирные кислоты и некоторые спирты. Этот первый шаг очень важен. Ведь именно от того насколько эффективно расщеплены крупные органические полимеры будет зависеть способность микроорганизмов поглощать расщепленные вещества, и следственно выход биогаза [13]. Микроорганизмы для расщепления органических полимеров на мономеры используют экзоферменты, которые расщепляют большие молекулы, для того чтобы использовать их в качестве источника энергии и питательных веществ. Некоторые микроорганизмы выделяют специализированные ферменты, то есть ферменты которые расщепляют несколько классов органических

19 соединений. Другие же микроорганизмы синтезируют свои ферменты для каждого класса органических веществ [26]. Существуют отдельные ферменты расщепляющие сахара, белки, жиры и т. д. Микроорганизмы, которые гидролизуют различные сахара, называются сахаролитическими, а те, которые гидролизуют белки, являются протеолитическими. Ниже приведена таблица, в которой перечислены некоторые примеры различных групп экзоферментов. Скорость гидролиза зависит от природы сырья. Разложение целлюлозы и гемицеллюлозы обычно происходит медленнее, чем разложение белков [44, 53]. Таблица 1.4. Некоторые важные группы гидролитических ферментов и их функции (по Б. Эдер и Х. Шульц, 2011 год) Ферменты Субстрат Продукты распада Протеиназ Белки Аминокислоты Целлюлаза Целлюлоза Сахара, такие как глюкоза, ксилоза, манноза и арабиноза Амилаза Крахмал Глюкоза Липаза Жиры Жирные кислоты и глицерин Пектиназа Пектин Сахара, такие как галактоза, арабиноза и сложные молочные уроновые кислоты Бактерии, участвующие в стадии гидролиза и расщепляющие полисахариды относятся к следующим родам: Clostidium, Baсteroides, Rumiococcus, Butyrivibrio. Некоторые из этих микроорганизмов имеют несколько типов ферментов, объединенных в целлюлозуме (место на клеточной стенке клетки). Основными продуктами ферментации, с помощью данных микроорганизмов, являются ацетат, пропионат, сукцинат, водород и углекислый газ. Бактерии, выделенные из рубца жвачных и кишечника свиней разлогают целлюлозу и гемицеллюлозу до различных летучих жирных кислот [27].

20 В состав данных целлюлозумов входят белки, которые обеспечивают связь бактерии с целлюлозой. Это позволяет более эффективро расщеплять целлюлозу. В условиях биогазовой станции «Лучки» компании АльтЭнерго стадия гидролиза протекает при 20 0С и длится 24 часа. Данная стадия проходит преимущественно в аэробных условиях. 1.7.1. Гидролиз белков Белки состоят из цепочек аминокислот, они находятся в высокой концентрации в убойных отходах, курином помете и свинном навозе. Короткие цепи (менее 50 аминокислотных остатков) называются пептидами или пептидными цепями [15]. Конечными продуктами гидролиза белков и пептидов являются аминокислоты. Состав аминокислот в конечном продукте зависит от того, из какого сырья будет производиться биогаз. В состав белков помимо аминокислот могут входить, например углеводы. В этом случае белки называются гликопротеинами. Они обычно расположены в клеточных мембранах и на поверхности клеток, а их углеводная часть может составлять до 80 % от их веса. При разложении гликопротеинов, помимо аминокислот могут образовываться различные углеводы. К протеолитическим микроорганизмам в рамках производства биогаза относятся: Clostidium, Peptostreptococcus и Bifidobacterium [15,17].

21 1.7.2. Гидролиз жиров Состав жиров зависит от их происхождения. Как правило, эти жиры состоят из глицерина (спиртов) и различных жирных кислот, которые образуются в процессе биодеградации [31]. Ферменты, расщепляющие жиры, называются липазами. Примерами сырья для получения биогаза с высоким содержанием жира являются отходы скотобойни и осадки сточных вод. Липазы образуются аэробными или факультативными аэробными микроорганизмами. Наиболее известным родом микроорганизмов, синтезирующим липазы является род Clostridium [35]. 1.8.Субстрат для стадии гидролиза при получении биогаза В смешивающий резервуар, в котором проходит стадия гидролиза и кислотообразования, в сутки подается следующее измельченное сырье:  Кишпакеты (измельченные свиные кишки и их содержимое) – около 25 тонн;  Мякотное сырье – 7-10 тонн;  Жир и шлам с птицефабрики – 10-15 тонн;  Кровь птичья – 10-15 тонн;  Эффлюент (субстрат из дображивателя для разбавления массы) – 100-120 м3;  Свиной навоз – 20-50 тонн. Содержание различных веществ, входящих в состав субстрата, загружаемого в смешивающий резервуар следующий: Азот (сумма) - 0,742 / 8,25%;

22 Фосфор(в пересчете на Р2О5) - 0,290 / 3,23%; Углерод - 4,10 / 45,63%; Аммонийный азот - 0,441/ 8,52%; Сера - 1,28 / 14,23 г/кг; Свинец - 0,110 / 1,22 мг/кг; Железо - 209,00 / 2324,80 мг/кг; Цинк - 81,5 / 906,56 мг/кг; Медь - 3,17 / 35,26 мг/кг; Марганец - 5,81 / 64,63 мг/кг. Влажность субстрата для стадии гидролиза при получении биогаза составляет приблизительно 91%, pH – 7,7 [25]. 1.9. Технологические параметры, необходимые для производства биогаза Технологический процесс - ряд манипуляций, проводимых для получения из исходного сырья продукта с заранее заданными свойствами. Чтобы описать один технологический процесс или сравнить его с другими процессами, используются различные параметры технологического процесса. Параметры могут быть механическими, электрическими, тепловыми, временными или иметь другие критерии. Все параметры технологического процесса условно делятся на три группы: 1) частные параметры позволяют сравнить технологические процессы, выпускающие одну и ту же продукцию и использующие одну и ту же технологию. К частным параметрам относятся: состав и концентрация

23 исходного сырья, особенности используемого оборудования и инструментов, режимы проведения процесса (температура, рН, давление) и т.д.; 2) единичные параметры позволяют сравнивать технологические процессы, производящие одну и ту же продукцию, но использующие разнуые технологические схемы. К единичным параметрам относят ресурсные параметры (материалоемкость, трудоемкость, энергоемкость, капиталоемкость), а также такой показатель, как себестоимость, который выражает фактические затраты ресурсов в денежном выражении на производство и реализацию продукции; 3) обобщенные параметры позволяют сравнивать различные технологические процессы. К ним относятся удельные, то есть приходящиеся на единицу продукции, рассчитанные в денежном выражении затраты живого (человеческого) и машинного труда [41]. 1.10. Биогаз как сырье для получения биоводорода На сегодняшний день биодород считается одним из самых перспективных видов топливом. Он намного эффективнее нефти и природного газа, потому что, когда горит биоводород, производится почти в три раза больше энергии. И что еще более важно: биоводород является экологически чистым видом топлива, когда он горит, не образуются токсичные вещества, а при сжигании нефтепродуктов и природного газа угарный газ выделяется в атмосферу и загрязняет его, что приводит к парниковому эффекту. Последствия этого очевидны. Климатические изменения, снижения содержания кислорода, снижение выживаемости растений и животных, увеличивание заболеваемости [2].

24 Биоводород, по сравнению с ископаемыми источниками энергии имеет очень большое преимущество - он возобновляемый: бактерии могут использоваться многократно, ограничивая производство только наличием сырья. И сырья, пригодного для получения биоводорода много, оно весьма разнообразно: промышленные и сельскохозяйственные отходы, шроты масличных культур и бобовых, кухонные отходы, сточные воды, содержащие органические вещества. Технология получения биоводорода с использованием микроорганизмов не требует больших затрат так, как большинство процессов происходит при нормальной температуре [2, 32]. Методы получения биоводорода Термохимический метод. В рамках данного метода биомасса подвергается термической обработке при температуре 500-800 ºС. Нагревание происходит в анаэробных условиях. Температура процесса ниже, чем температура газификации угля. В результате этого процесса выделяются водород и другие газообразные продукты. Биохимический метод - производство биоводорода из биомассы с помощью специализированных бактерий. Для ускорения процесса переработки биомассы, богатой крахмалом или целлюлозой, необходимо использовать специальные ферменты. Для данного метода характерны следующие параметры - температура 30 ºС и нормальное давление. Однако поиски идеального метода для получения биоводорода не прекращается. С этим связано возрастание популярности использования водорослей для производства биоводорода. Указанный метод называется фотолизом. Из-за того, что водоросли производят биоводород при определенных условиях, этот процесс проводят в специальном биореакторе. Для водорослей лимитирующим фактором является наличие серы в среде. В таких условиях водоросли переключаются на производство водорода вместо кислорода [3].

25 В наше время наиболее популярным методом производства биоводорода является биохимический способ. Учитывая, что сырьем для данного производства могут быть различные органические отходы такие, как сельскохозяйственные отходы (шелуха, щроты и т. д.), бытовые органические отходы, сточные воды, количество которых неисчерпаемо. Помимо этого, при производстве водорода указанным способом не требуются особые условия и специальное оборудование. Хорошая продукция требует эффективных бактерий. Наиболее подходящими для этой цели являются пурпурные бактерии, которые встречаются в высокогорных источниках. Преимуществом биохимического метода является то, что бактерии могут быть повторно использованы после каждого цикла производства. Поэтому этот метод практически полностью зависит от жизнедеятельности бактерий, он менее энергоемкий и самый дешевый. Биоводород считается отличной заменой традиционным видам топлива. Биоводород является экологически чистым топливом, в несколько раз более эффективным, чем нефть и газ. Производство топлива легкое и простое, но не менее важно то, что оно является дешевым и, как следствие, финансово прибыльным. Реформинг биогаза является перспективным методом получения синтетического газа с добавлением угарного газа из природного. Такой газ можно использовать для получения углеводородов, метанола, диметилового эфира и синтеза Фишера-Тропша [7]. Использование углекислого газа в качестве оксида для окисления низших алканов по парциальному принципу будет важным способом утилизации природного газа. Природный газ в большинстве месторождений имеет углекислый газ вместе с метаном и другими алканами более низкого порядка. Утилизация природного газа желательна без выделения угарного газа путем преобразования метана и углекислого газа в приемлемые продукты или топливо [37].

26 В основе катализаторов для сухого метанового реформинга состоят из никелевых или благородных металлических систем, таких как платина, рутений и т. д. Препятствием для хорошего применения этих катализаторов является образование углерода, дезактивирующего катализатора, особенно в никелевых системах. Существуют никелевые катализаторы устойчивые к отложениям углерода. С промышленной точки зрения данные катализаторы выгодно использовать из-за низкой стоимости никеля [12]. Стадии получения биоводорода из биогаза. 1. На начальном этапе биогаз в сжатом состоянии смешивается с синтетическим аммиачным газом. 2. Далее смесь нагревают в дополнительной конвективном змеевике первичной реформинг-печи, затем смесь подвергается очистке серой при низкой температуре. 3. После этого происходит смешивание очищенной смеси с высокотемпературным водяным паром. 4. В конце смесь поступает в реакционные трубы в зону радиантной печи первичного реформинга. 5. Тепло дымовых газов из первичной печи реформинга утилизируется в дополнительных змеевиках зоны конвекции с помощью подогрева обычного газа [42, 43]. К характерристикам реформинга относятся: экономия потребления энергии, повышение надежности и безопасности эксплуатации. Помимо этого, благодаря данному процессу происходит оптимизация всех этапов очистки с помощью серы и блока аппаратуры печи первичного реформинга, который использует тепло для своей работы, увеличивая производство аммиака [18].

27 1.11. Классификация биогазовых установок Биогазовое оборудование, используемое в мировой практике, классифицируется в соответствии с методами загрузки сырья, методами сбора биогаза, доступными для их использования материалами, использованием дополнительных устройств, горизонтальным или вертикальным расположением реактора, подземным или наземным расположением [28]. 1. По методу загрузки сырья  Установки для порционной загрузки полностью загружаются сырьем, а затем полностью освобождаются, после определенного времени ферментации. Для такого типа загрузки подходят установки любых конструкций и любого типа сырья. Данные установки отличаются нестабильным выходом биогаза.  Установки непрерывной количествами сырья. загрузки При загружаются загрузке нового небольшими сырья часть обработанного шлама, равная объему загрузки, выгружается. Сырье для такого метода должно быть жидким и однородным. Плюсами данной установки является то, что производство биогаза стабильно и количественно превышает объем вырабатываемого биогаза на порционных установках. В наше время практически все строящиеся установки в развитых странах работают как установки непрерывной загрузки. 2. По методу сбора биогаза в биогазовых устаноках  Баллонные установки - это термостойкий пластиковый или резиновый баллон, в котором объединены реактор и газгольдер. Трубы для загрузки и разгрузки сырья фиксируются непосредственно на пластике реактора. Давление газа достигается путем растягивания мешка и за счет дополнительного груза,

28 который фиксируется на баллоне. Преимуществами такой установки являются низкая стоимость, легкость движения, простая конструкция, высокая температура для ферментации, легкая очистка реактора, загрузки и выгрузки сырья. Недостатки короткий период работы (2-5 лет) и высокая восприимчивость к внешним воздействиям.  Установки с фиксированным куполом состоят из закрытого купольного реактора и разгрузочной емкости, также известной как компенсирующий резервуар. Газ собирается в верхней части реактора – в куполе. Когда загружается следующая порция сырья, обработанное сырье выталкивается в специальную (компенсирующую) емкость. С увеличением давления газа в куполе повышается уровень обрабатываемого сырья в компенсирующей емкости. Реакторы с неподвижным куполом обычно представляют собой кирпичные или бетонные резервуары. Такие установки наверху покрыты грунтом и заполнены газом, чтобы обеспечить внутреннее давление (не превышающее 0,15 бар). По экономическим причинам минимальный размер реактора должен составлять 5 м3. максимальный объем таких установок составляет 200 м3.  Установки с плавающим куполом обычно состоят из подземного реактора и подвижного газгольдера (купола). Газгольдер плавает либо непосредственно в сырье, либо в специальном кармане для воды. Газ накапливается в газгольдере, который поднимается или опускается в зависимости от давления газа. Газгольдер поддерживается специальной конструкцией от опрокидывания. Если газгольдер плавает в специальном кармане для воды, он защищен от опрокидывания. Преимущества этой конструкции

29 состоят в простоте ежедневных операций, простоте определения объема газа по высоте, на котором поднимался газгольдер. 3. Горизонтальные и вертикальные установки Выбор места расположения биогазовой установки зависит от способа загрузки и наличия свободной территории в хозяйстве. Горизонтальные установки выбираются для непрерывного способа загрузки сырья и при наличии достаточного пространства. Вертикальные установки более подходят для периодической загрузки сырья и используются, когда это необходимо, для уменьшения пространства, занимаемого реактором. 4. Подземные и наземные установки При выборе места установки необходимо учитывать топографию и использовать ее для оптимизации работы установки. Например, очень удобно поместить установку на склоне так, чтобы загрузочное отверстие было достаточно низким, сырье в реакторе перемещалось небольшим наклоном к разгрузочному отверстию, которое было бы на низкой высоте для легкой загрузки в транспортные средства [61, 57]. Другим фактором, который следует учитывать при выборе типа установки, является улучшенная теплоизоляция подземных сооружений, в том числе слабое колебание суточных температур в процессе ферментации сырья, поскольку температура почвы на глубине более 1 метра остается изменной, 5. По материалам, из которых изготовляется реактор  Бетонные реакторы обычно строятся под землей. Они имеют цилиндрическую форму, а небольшие установки (до 6 м3) могут быть изготовлены на конвейерной основе. Для герметизации реактора необходимы специальные меры. Преимуществами таких установок являются: низкие затраты на строительство и материалы, возможность массового производства. Недостатки - большой объем потребления высококачественного квалифицированных строителях бетона, и потребность большое в количество

30 проволочной сетки, относительная новизна и дизайн, необходимость специальных мер для обеспечения герметичности газгольдера.  Кирпичные реакторы сооружаются для подземных установок с фиксированным или плавающим куполом и имеют округлую форму. Преимущества: низкие начальные капиталовложения и долгий срок эксплуатации, нет движущихся или ржавеющих частей, конструкция компактная, экономит место и хорошо изолирована, строительство создает местную занятость. Из-за того, что кирпичные реакторы располагаются под землей экономится площадь и такие реакторы являются термическиизолированными. Недостатки: кирпичный газгольдер требует специальных покрытий для обеспечения герметичности для обеспечения герметичности частых утечек газа, работа установки плохо контролируется из-за подземного расположения, установка требует тщательного расчета уровней постройки, очень сложный и дорогой подогрев сырья в реакторе. Таким образом, кирпичные установки целесообразно строить только в теплых странах и лишь при наличии квалифицированного персонала.  Металлические реакторы универсальны, они подходят для всех типов установок. Данные реакторы герметичны, выдерживают большое давление и просты в изготовлении. Часто можно использовать уже имеющиеся металлические емкости. Но, металл относительно дорогой и требует ухода для предотвращения коррозии [38].

31 ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Объект исследования Объектом исследования являются микрофлора стадии гидролиза и данные по выходу биогаза из различного сырья. Данные по выходу биогаза из различного сырья представлены в приложении 1. Согласно литературным данным микрофлора стадии гидролиза очень разнообразна. В данной стадии принимает участие более 100 родов микроорганизмов, Из них преобладают: Butyrivibrio, Peptostreptococcus, Bacteroides, Eubacterium, Escherihia, Pseudomonas, Ruminococcus, Clostridium. При этом выход биогаза колеблется в значениях 10-650 м3 на тонну сырья [24]. Стадия гидролиза очень важна для производства биогаза. Так, как насколько качественно микроорганизмы гидролизуют субстрат, тем эффективнее последующие этапы, и тем выше выход биогаза. Материалом для наших исследования послужили субстра для стадии гидролиза при получении биогаза и данные опытов по выходу биогаза из различного сырья, предоставленные компанией «АльтЭнерго». Главным и неотъемлемым компонентом субстрата для производства биогаза является навоз. В нем содержится консорциум микроорганизмов, необходимый для получения биогаза. При добавлении других элементов субстрата, растительного сырья, жиров, отходов бойни, активизируются различные микроорганизмы, входящие в состав данного консорциума. Состав субстрата, его температура, ph, первичные промежуточные продукты гидролиза создают условия для жизнедеятельности определенной части данного консорциума. Именно она продолжает разлагать субстрат. Следовательно,

32 важно знать видовой состав консорциума микроорганизмов, который активизируется самим субстратом [14]. 2.2. Методы исследования В ходе проведенных нашего исследования был использован следующий комплекс методов:  Метод прямого посева на твердые питательные среды (метод Коха);  Метод микроскопического изучение морфологии микроорганизмов;  Метод выделение чистой культуры микроорганизмов;  Метод окраска бактерий по Граму;  Метод статистической обработки результатов. 2.2.1. Метод прямого посева на твердую питательную среду (метод Коха) Питательную среду, приготовленную по рецепту, стерилизуют в автоклаве. Стерильные среды расплавляют в колбе на водяной бане 20-25 минут. Приподняв крышку чашки Петри, быстро выливают расплавленный агар-агар и закрывают чашку. Ждут полного затвердевания агар-агара. Параллельно с этим делают серию разведений субстрата для стадии гидролиза при производстве биогаза. В пробирки наливают по 9 мл воды, закрывают марлевыми пробками и автоклавируют. После остывания воды в первую пробирку вносят 1 мл субстрата для стадии гидролиза, перемешивают на вортексе, затем из этой пробирки берут стерильным инсулиновым шприцом 1 мл жидкости и переносят в следующую пробирку. Таким образом, получают

33 шесть пробирок с разведением субстрата для стадии гидролиза: 0,1; 0,01; 0,001; 0,0001; 0,00001; 0,000001. Посев производят по 0,5 мл в чашки Петри. Посев осуществляется на среду МПА и агар Левина. Посев производится для последних трех разбавлений из шести. После посева чашки Петри помещаются в термостат при температуре 20 оС. По истечению 24 часов после посева материал анализируется. Первоначально описываются колонии выросших микроорганизмов по следующим признакам: форма, цвет, край, поверхность, диаметр [45]. 2.2.2. Метод микроскопического изучения морфологии микроорганизмов Для более подробного изучения клеток микроорганизмов используются фиксированные препараты. Их приготовление складывается из следующих этапов: приготовления мазка, высушивания препарата, его фиксации, окраски, промывки, высушивания. Для этого на чистое предметное стекло в каплю дистиллированной воды вносят небольшое количество культуры микроорганизмов, тщательно перемешивают и растирают ее с помощью микробиологической петли, распределяя мазок по поверхности стекла тонким слоем [45]. Затем препарат высушивают над пламенем спиртовки, не допуская перегрева мазка во избежание свертывания белков протоплазмы бактериальной клетки. После препарат фиксируют, проводя его несколько раз в пламени спиртовки. Затем приступают к окраске, покрывают мазок на 1-2 минуты раствором красителя - метиленового синего или карболового фуксина. Промывают препарат струей дистиллированной воды до полного обесцвечивания стекающих капель, высушивают его над пламенем спиртовки и изучают под микроскопом [40, 50].

34 2.2.3. Выделение чистой культуры бактерий. Для изучения морфологии и формы клеток, необходимо получить чистую культуру исследуемых микроорганизмов. Физиологию, биохимические свойства и циклы развития микроорганизмов обычно исследуют при работе с чистыми культурами. Чистой называют культуру, содержащую микроорганизмы одного вида [51]. Выделение чистой культуры микроорганизмов состоит из трех этапов: 1) Посев микроорганизмов на жидкие или плотные питательные среды с последующим термостатированием 24 часа при определенной температуре. 2) Изучение культуральных свойств бактерий. При этом изучают размер в проходящем свете, прозрачность колоний, положение, поверхность колоний. 3) Приготовлеие мазков из культуры, выросшей на скошенном агаре, окрашивание их по Граму. О чистоте культуры судят по морфологии, тинкориальности и однородности [52, 56]. Затем изучают биохимические свойства. Обычно основным методом выделения чистых культур микроорганизмов является метод, предложенный Р. Кохом. Его принцип состоит в том, чтобы получить чистую культуру из отдельной колонии. Однако этот метод не применим для выделения микроорганизмов, которые не растут или плохо растут на плотных средах [56]. При выделении чистой культуры аэробных микроорганизмов из окружающей среды питательные среды наливают готовят и наливают в чашки Петри как при методе прямого посева микроорганизмов. После того, как питательная среда застынет, из дозатора или стирилиного шприца наносят каплю накопительной культуры на ее поверхность, стерильным стеклянным шпателем Дригальского распределяют каплю по

35 поверхности твердой питательной среды в чашке Петри. Далее этим же шпателем проводят по поверхности среды еще в 2-3 чашках. Обычно в первых двух чашках наблюдается сплошной рост микроорганизмов, тогда как в последующих будет рост лишь изолированных колоний. С целью дальнейшего исследования бактерий, пересевать накопительную культуру можно микробиологической петлей методом истощающего штриха. В этом случае накопительную культуру или ее разведения отбирают петлей и на поверхности плотной среды проводят штрихи. Перед каждым новым штрихом петлю стерилизуют в пламени горелки [27]. После посева всех чашек Петри их помещают в термостат крышками вниз, чтобы конденсат (образовавшаяся вода на крышке чашки Петри при застывании агара) не помешал получить изолированные колонии. Чашки выдерживают в термостате от 1 до 7 суток, длительность времени проращивания выбирают в зависимости от скорости роста микроорганизмов. Выросшие изолированные колонии отсевают петлей на поверхность скошенной плотной среды в пробирке или в жидкую среду [58]. 2.2.4. Метод окраски бактерий по Граму. Метод окраски по Граму является необходимым диагностическим методом в микробиологической практике. Сущность дифференцированной окраски по Граму состоит в том, что краски трифенилметанового ряда, например йод и генциановый фиолетовый, образуют в клетках некоторых бактерий окрашенные соединения, которые не обесцвечиваются при последующей обработке препарата спиртом и сохраняют сине-фиолетовую окраску (грамположительные микроорганизмы). Другие бактерии не обладают

36 свойством удерживать краску и при обработке спиртом обесцвечиваются (грамотрицательные микроорганизмы). Различия к окраске по Граму служит одним из основных морфологических признаков бактерий в их характеристике [58]. Способность бактериальных клеток окрашиваться по Граму зависит главным образом от химического состава и строения клеточных стенок. У грамположительных бактерий клеточная стенка состоит в основном из муреина (95%) и тейхоевой кислоты. В составе клеточной стенки грамотрицательных бактерий находятся липопротеиды, липополисахариды, фосфолипиды и незначительное количество муреина (5%) [34, 56]. На предметном стекле готовят и фиксируют мазок культуры бактерий. На мазок кладут полоску фильтровальной бумаги и наносят краситель – генциановый фиолетовый. Через 1-2 минуты снимают бумажку и, не промывая мазок водой, наносят на препарат раствор йода. Через 1 минуту капают на мазок 96%-ным спиртом. Через 1 минуту промывают мазок водой, после этого для дополнительного окрашивания окрашивают мазок раствором фуксина, через 0,5 минуты промывают мазок водой и высушивают над пламенем спиртовки. Готовый препарат исследуют под микроскопом с иммерсионной системой. Грамположительные бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а грамотрицательные – в розовый [50]. 2.2.5. Метод статистической обработки результатов Для анализа особенностей роста и морфологии клеток проводят обработку результатов измерений с помощью математической статистики [6].

37 Статистический анализ результатов исследований является необходимым и обязательным этапом корректной оценки результатов исследования. Статистическая обработка результатов измерений позволяет оценить систематические и случайные погрешности измерений. Очень важен также выбор метода статистической обработки результатов [39]. При биологических исследованиях использование приемов математической статистики помогает:  Определить методом регрессивного анализа вид функциональной зависимости аналитического сигнала от концентрации (содержания) определяемого элемента;  После получения данных рассчитать метрологические характеристики параметров градуировочного графика и результатов анализа;  Рассчитать основные метрологические характеристики методики анализа (в случае необходимостиоценить воспроизводимость и правильность полученных данных, отбросив результаты, содержащие промахи);  Представить результаты статистической обработки в виде компактных табличных данных, позволяющих оценить воспроизводимость и правильность полученных результатов;  Определить достоверность разностей показателей опытных и контрольных вариантов. Математическую планировании опытов статистику в используют, биологическом прежде эксперименте. всего, Если при хорошо спланируют опыт, необходимо взять достаточное число вариантов, все варианты в начале опыта должны находиться в одинаковых условиях [39]. В нашем эксперименте мы применяем метод дисперсионного анализа и следующие формулы: Средняя арифметическая: Xcp.  X n (1.1)

38 Где  - сумма; X – значения данных; n – количество значений. Среднее квадратическое отклонение   ( X  Xcp.) 2 (1.2) Ошибка средней арифметической m  n (1.3) Достоверность различий в КОЕ (количество колонеобразующих единиц) рассчитывалось по критерию Фишера с помощью программы Excel [6,39].

39 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Для исследования микрофлоры субстрата для стадии гидролиза при производстве биогаза было взято две пробы: 9.02.2016 года и 13.05.2016 года, которые затем были заморожены. Субстрат данных проб состоит из следующих компонентов:  Кишпакеты (измельченные свиные кишки и их содержимое) – около 25 тонн;  Мякотное сырье – 7-10 тонн;  Жир и шлам с птицефабрики – 10-15 тонн;  Кровь птичья – 10-15 тонн;  Эффлюент (субстрат из дображивателя для разбавления массы) – 100-120 м3;  Свиной навоз – 20-50 тонн. 3.1. Общая численность микроорганизмов, выращенных на различных питательных средах. Посев исследуемых образцов производили на питательный агар и агар Левина.

40 3.1.1. Анализ пробы №1 На рисунках 3.1.1. показаны колонии микроорганизмов, выращенных на питательном агаре и на агаре Левина рис. 3.1.2., соответственно. Рис. 3.1.1. колонии микроорганизмов на питательном агаре (слева разведение 1*10-5, справа – 1*10-4) Рис. 3.1.2. колонии микроорганизмов на агаре Левина (слева разведение 1*10-5, справа – 1*10-4) В таблицах 3.1. и 3.2. представлены цифровые значения количества бактерий полученные на питательном агаре и агаре Левина соответственно.

41 Таблица 3.1. Численность микроорганизмов на питательном агаре, выращенных из проб, взятых в феврале 2016 года и замороженных Разведение Повторности 1 1*10-4 847 2 876 3 4 5 6 108 803 105 913 9 2 1*10-5 729 647 764 605 703 777 1*10-6 427 399 353 436 499 469 Таблица 3.2. Численность микроорганизмов на агаре Левина, выращенных из проб, взятых в феврале 2016 года и замороженных Разведение Повторности 1 2 3 4 5 6 1*10-4 736 567 638 573 639 705 1*10-5 309 355 284 320 385 348 1*10-6 274 349 303 221 256 233 Расчет общего микробного числа (ОМЧ) микроорганизмов в 1 мл образца проводили следующим образом: среднее значение микроорганизмов данного разведения делили на разведение и умножали на 0,5 мл (объем суспензии микроорганизмов, взятый для посева). ОМЧ для питательного агара разведения 1*10-6 составило 216250000 КОЕ/г, для агара Левина – 135850000 КОЕ/г. А1=432,5/0,000001*0,5=216250000 КОЕ/г (для питательного агара); А2=271,7/0,000001*0,5=135850000 КОЕ/г (для агара Левина).

42 3.1.2. Анализ пробы №2 Второй анализ численности микроорганизмов проводили в мае 2016 года. На рисунказ 3.2.1. и 3.2.2. показаны колонии микроорганизмов, выращенных на питательном агаре и на агаре Левина, соответственно. Рис. 3.2.1. колонии микроорганизмов на питательном агаре (слева разведение 1*10-4, справа – 1*10-5) Рис. 3.2.2. колонии микроорганизмов на агаре Левина (слева разведение 1*10-6, справа – 1*10-5)

43 В таблицах 3.3. и 3.4. представлены цифровые значения количества бактерий полученные на питательном агаре и агаре Левина соответственно. Таблица 3.3. Численность микроорганизмов на питательном агаре, выращенных из проб, взятых в мае 2016 года и замороженных Разведение Повторности 1 1*10-4 913 2 3 4 5 6 111 933 822 902 928 3 1*10-5 698 750 639 803 620 741 -6 403 422 471 480 375 366 1*10 Таблица 3.4. Численность микроорганизмов на агаре Левина, выращенных из проб, взятых в мае 2016 года и замороженных Разведение Повторности 1 2 3 4 5 6 1*10-4 656 648 692 584 725 732 1*10-5 312 290 337 310 263 314 1*10-6 279 217 199 260 208 240 ОМЧ для питательного агара разведения 1*10-6 составило 210085000 КОЕ/г, для агара Левина – 118085000 КОЕ/г. А1=420,17/0,000001*0,5=210085000 КОЕ/г (для питательного агара); А2=236,17/0,000001*0,5=118085000 КОЕ/г (для агара Левина). 3.2. Микроскопическое исследование микрофлоры субстрата для стадии гидролиза при получении биогаза

44 После того, как мы подсчитали количество колоний микроорганизмов, выросших на питательных средах, нами было проведено микроскопическое исследование данных колоний. Для того чтобы определить род бактерий, мы измеряли размер клеток микроорганизмов и проводили их окраску по Граму. Таблица 3.5. Описание колоний, выросших на среде Левина Описание колонии Средний размер бактерий, мкм Февраль 2016 палочки кокки Май 2016 палочки кокки Черно-синие колонии с 3,095  0,490 1,181  0,566 металлическим блеском. 3,008  1,054 1,189  0,379 Светло-бордовые 2,541  0,660 колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. 1,087  0,628 2,528  0,479 1,083  0,431 Бледно-розовые колонии. 2,200  1,399 Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. 1,098  0,438 2,240  0,813 1,096  0,455 Розовые колонии. Края 2,723  0,788 ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. 1,093  0,397 2,721  0,827 1,108  0,383 Серо-розовые колонии. 2,680  0,790 Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. 1,124  0,378 2,692  0,803 1,124  0,375

45 Таблица 3.6. Описание колоний, выросших на среде МПА Описание колонии Средний размер бактерий, мкм Февраль 2016 палочки Май 2016 кокки палочки кокки 1,070  0,511 2,271  0,518 1,075  0,252 2,300  1,611 1,033  0,633 2,303  1,067 1,056  0,332 Кремовые колонии. Края 3,220  1,153 1,273  0,771 3,201  1,223 1,249  0,635 Белые колонии. Края не 2,269  1,481 ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Бледно-кремовые колонии.края Центр ровные. выпуклый. Поверхность глянцевая. не ровные-разросшиеся. Цент выпуклый. Поверхность матовая. 3.2.1. Окраска бактерий по Граму На рисунках 3.3. – 3.10. представлены микропрепараты бактерий, окрашенных по Граму.

46 Рис. 3.3. Черно-синие колонии с металлическим блеском. Среда Левина Рис. 3.4. Светло-бордовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Среда Левина Рис. 3.5. Бледно-розовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Среда Левина

47 Рис. 3.6. Розовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Среда Левина Рис. 3.7. Серо-розовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Среда Левина Рис. 3.8. Белые колонии. Края не ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Среда МПА

48 Рис. 3.9. Бледно-кремовые колонии.края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая. Среда МПА Рис. 3.10. Кремовые колонии. Края не ровные-разросшиеся. Цент выпуклый. Поверхность матовая. Среда МПА В ходе опытов нам удалось установить следующие роды микроорганизмов: Ruminococcus, Bacteroides, Peptostreptococcus, Butyrivibrio, Escherichia, Pseudomonas [48]. На рисунках 3.11.-3.16. представлены фотографии микропрепаратов вышеперечисленных микроорганизмов.

49 Рис.3.11.микропрепарат Ruminococcus Рис. 3.12. Микропрепарат Bacteroides Рис.3.13. Микропрепарат Peptostreptococcus Рис. 3.14. Микропрепарат Butyrivibrio

50 Рис. 3.15. Микропрепарат Escherichia Рис.3.16. Микропрепарат Pseudomonas 3.2.2. Посев микроорганизмов методом истощающего штриха На рисунках 3.17. – 3.24. представлены фотографии чашек Петри, посев на которые осуществлялся методом истощающего штриха (слева) и фотографии микропрепаратов соответствующих колоний (справа). Рис. 3.17. Белые колонии. Края не ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая

51 Рис. 3.18. Бледно-кремовые колонии.края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая Рис.3.19. Кремовые колонии. Края не ровные-разросшиеся. Цент выпуклый. Поверхность матовая Рис. 3.20. Черно-синие колонии с металлическим блеском

52 Рис. 3.21. Светло-бордовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая Рис. 3.22. Бледно-розовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая

53 Рис. 3.23. Розовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая Рис. 3.24. Серо-розовые колонии. Края ровные. Центр выпуклый. Поверхность глянцевая 3.3. Статистическая обработка цифровых данных методом дисперсионного анализа Таблица 3.7. Дисперсионный анализ. Среда МПА, разведение 1*10-4. ИТОГИ Группы Счет Сумма Среднее Дисперсия Столбец 1 6 5605 934,1667 9215,767 Столбец 2 6 5574 929 13277,6 Дисперсионный анализ Источник вариации PSS df MS F F Значение критическое Между группами 80,08333 1 80,08333 0,007121 Внутри групп 112466,8 10 11246,68 Итого 112546,9 11 0,934417 4,964603 Из таблицы 3.7. видно, что различий в количестве КОЕ между пробами из февральского и майского субстрата не наблюдается. Таблица 3.8.

54 Дисперсионный анализ. Среда МПА, разведение 1*10-5. ИТОГИ Группы Счет Сумма Среднее Дисперсия Столбец 1 6 4219 703,1667 4520,967 Столбец 2 6 4265 710,8333 4734,967 Дисперсионный анализ Источник вариации PSS df MS F Значение критическое F Между группами 176,3333 1 176,3333 0,038102 Внутри групп 46279,67 10 4627,967 Итого 46456 0,849148 4,964603 11 Из таблицы 3.8. видно, что различий в количестве КОЕ между пробами из февральского и майского субстрата не наблюдается. Таблица 3.9. Дисперсионный анализ. Среда МПА, разведение 1*10-6. ИТОГИ Группы Счет Сумма Среднее Дисперсия Столбец 1 6 2577 429,5 2643,1 Столбец 2 6 2521 420,1667 2545,367 Дисперсионный анализ Источник вариации PSS df MS F F Значение критическое Между группами 261,3333 1 261,3333 Внутри групп 25942,33 10 2594,233 Итого 26203,67 11 0,100736 0,757476 4,964603 Из таблицы 3.9. видно, что различий в количестве КОЕ между пробами из февральского и майского субстрата не наблюдается. Таблица 3.10. Дисперсионный анализ. Агар Левина, разведение 1*10-4.

55 ИТОГИ Группы Счет Сумма Среднее Дисперсия Столбец 1 6 3852 642 4642 Столбец 2 6 4031 671,8333 3076,167 Дисперсионный анализ Источник вариации PSS df MS F F Значение критическое Между группами 2670,083 1 2670,083 Внутри групп 38590,83 10 3859,083 Итого 41260,92 11 0,691896 0,424938 4,964603 Из таблицы 3.10. видно, что различий в количестве КОЕ между пробами из февральского и майского субстрата не наблюдается. Таблица 3.11. Дисперсионный анализ. Агар Левина, разведение 1*10-5. ИТОГИ Группы Счет Сумма Среднее Дисперсия Столбец 1 6 2005 334,1667 1274,167 Столбец 2 6 1840 306,6667 625,0667 Дисперсионный анализ Источник вариации PSS df MS F F Значение критическое Между группами 2268,75 1 2268,75 Внутри групп 9496,167 10 949,6167 Итого 11764,92 11 2,389122 0,153217 4,964603 Из таблицы 3.11. видно, что различий в количестве КОЕ между пробами из февральского и майского субстрата не наблюдается. Таблица 3.12. -6 Дисперсионный анализ. Агар Левина, разведение 1*10 .

56 ИТОГИ Группы Счет Сумма Среднее Дисперсия Столбец 1 6 1630 271,6667 2253,867 Столбец 2 6 1417 236,1667 1141,367 Дисперсионный анализ Источник вариации PSS df MS F F Значение критическое Между группами 3780,75 1 3780,75 Внутри групп 16976,17 10 1697,617 Итого 20756,92 11 2,227093 0,166469 4,964603 Из таблицы 3.12. видно, что различий в количестве КОЕ между пробами из февральского и майского субстрата не наблюдается. 3.4. Размер микроорганизмов Из результатов опытов видно, что достоверные различия в КОЕ отсутствуют. Это подтверждается таблицами 3.7.-3.12. Судя по данным таблицам, численность микрофлоры в февральском и майском субстратах примерно одинаковая. Это объясняется тем, что, во-первых, на стадии гидролиза поддерживаются постоянные условия, не зависящие от времени года, во-вторых, субстрат, также имеет подинаковый состав. 3.4.1. Размер микроорганизмов пробы №1

4 6 57 3,22 мкм 2,3 1 2 0 2 2,269 3 2 3 Рис. 3.25. Размер микроорганизмов на среде МПА (палочки) мкм 1,273 1,033 1 2 0 1 1,07 3 Рис. 3.26. Размер микроорганизмов на среде МПА (кокки) На рисунках 3.25. и 3.26. под цифрой 1 представлен средний размер колоний белого цвета, под цифрой 2 – бледно-кремовые колонии, под цифрой 3- кремовые колонии.

4 6 58 мкм 2,88 3 4 3,095 2,2 0 2 2,541 2,723 1 2 5 1,5 2 Рис. 3.27. размер микроорганизмов на среде Левина (палочки) 1,093 1,124 1,181 1 2 3 4 5 1 1,098 0 0,5 мкм 1,087 Рис. 3.28. размер микроорганизмов на среде Левина (кокки) На рисунках 3.27. и 2.28. под цифрой 1 представлен средний размер колоний с металлическим блеском, под цифрой 2 – светло-бордовые колонии, под цифрой 3- бледно-розовые колонии, 4-розовые колонии, 5-серо-розовые колонии. 3.4.2. Размер микроорганизмов пробы №2

4 6 59 3,201 мкм 2,303 1 2 0 2 2,271 3 1,5 2 Рис. 3.29. размер микроорганизмов на среде МПА (палочки) 1,056 1 2 1 1,075 0 0,5 мкм 1,249 3 Рис. 3.30. размер микроорганизмов на среде МПА (кокки) На рисунках 3.29. и 3.30. под цифрой 1 представлен средний размер колоний белого цвета, под цифрой 2 – бледно-кремовые колонии, под цифрой 3- кремовые колонии.

4 60 3 3,008 2,528 2,721 2,692 3 4 0 1 мкм 2 2,24 1 2 5 1,5 2 Рис. 3.31. размер микроорганизмов на среде Левина (палочки) 1,108 1,124 1 2 3 4 1,189 1 1,096 0 0,5 мкм 1,083 5 Рис. 3.32. размер микроорганизмов на среде Левина (кокки) На рисунках 3.31. и 3.32. под цифрой 1 представлен средний размер колоний с металлическим блеском, под цифрой 2 – светло-бордовые колонии, под цифрой 3- бледно-розовые колонии, 4-розовые колонии, 5-серо-розовые колонии. Из рисунках 3.25. – 3.32. видно, что размер бактериальных клеток соответствующих колоний одинаков. 3.5. Выход биогаза

61 В таблице 3.13. представленны опытные данные по загрузке метантенка и выходу биогаза, предоставленные компанией «АльтЭнерго». Ферментация длится 60 суток. Таблица 3.13. Состав сырья, используемого для загрузки метантенка. Выход биогаза м3/т Сырье Масса, т Кишпакеты 25 246 Мякотное сырье 7-10 566 Шлам и жир с птице фабрик 10-15 67 Кров птичья 10-15 810 Свинной навод 20-50 116 Судя по данным таблицы выход биогаза колеблется в значениях 1391219830 м3 . Это зависит от качественного состава сырья и от условий при которых будет проходить ферментация. От условий ферментации будет зависеть и видовой состав микрофлоры стадии гидролиза.

62 ЗАКЛЮЧЕНИЕ На сегодняшний день биотехнологии в энергетике активно развиваются, активно внедряются биотехнологические производства и микробиологическая переработка возобновляемых альтернативных видов источников энергии. Это сырья для производства позволяет существенно изменить промышленное и сельскохозяйственное производство, повысить эффективность использования природных ресурсов, решить экологические проблемы, создать новые альтернативные источники энергии. Первой и наиболее важной стадией получения биогаза является стадия гидролиза. На этом этапе сахара, жиры и белки преобразуются в меньшие органические соединения: аминокислоты, простые сахара, жирные кислоты, и некоторые спирты. Важность этого этапа заключается в том, что большие органические полимеры слишком велики для усвоения микроорганизмами. В результате исследования были получены микробиологические показатели субстрата для стадии гидролиза в производстве биогаза. Данные исследования проводились впервые для биогазовой станции «Лучки» компании «АльтЭнерго». Мы проанализировали основые сведения о стадии гидролиза в данном биотехнологическом производстве. Исследования проводились с

63 учетом особенностей переработки технологического возобновляемого процесса органического сырья. микробиологической В ходе работы ознакомились с методами исследования микрофлоры микроорганизмов. Микроскопическое исследование образцов субстрата для стадии гидролиза в производстве биогаза позволило определить до рода некоторые микроорганизмы, а так же вичислить их количественное содержаниеих в образцах. Выделить данные микроорганизмы в чистую культуру не удалось так, как в одной колонии микроорганизмов присутствовали как палочки, так и кокки. Разделить их при пересеве штрихом не удалось. На основании проведенной работы были сделаны следующие выводы: 1. Сырьем для получения биогаза может служить широкий спектр органических отходов: твердые и жидкие отходы агропромышленного комплекса, воды, сточные твердые бытовые отходы, отходы лесопромышленного комплекса. Состав сырья зависит от региональной направленности. Однако наиболее эффективным является использование отходов животноводческих и птицеводческих ферм, предприятий АПК и сточных вод. 2. В исследуемых пробах качественный и колличественный состав микрофлоры был одинаковым. По критерию Фишера (с помощью программы Exsel) было установлено, что достоверные различия между пробами в колличестве колонеобразующих единиц отсутствуют. В ходе работы по морфологическим признакам колоний и размеру бактериальных клеток нам удалось установить следующие роды микроорганизмов: Ruminococcus, Bacteroides, Peptostreptococcus, Butyrivibrio, Escherichia, Pseudomonas. 3. Суммарный выход биогаза из субстрата, пробы котрого мы исследовали, в соответствии с опытными даннями компании «АльтЭнерго» должен составлять 13242-18825 м3.

64 СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 1. Chartier P., Veriaux S. Biogas technology / Recherche. – 1980, 776 с; 2. Ivanova A. Alternative energy sources: types and principles of operation / International acientific review. – 2016. – № 2 (12). – 29-32 с.; 3. Kalyuzhny S.V. Biotechnological hydrogen production: fun damental principles and limiting factors / Катализ в промышленности. - 2016. - № 6. – 33-41 с.; 4. Tan Benilda V. Anaerobic digestion of some fruit processing wastes for biogas production /Alternative Energy Sourses VIII. Proc. Secc. Non-Sol/ Energy Sth Miami Int. Conf., Miami Beach. Fla (New York, 14-16 Dec. 1997). – № 1. –1999. – 855-863 с; 5. Scholz V., Ellerbrock V. Biomass and Bioenergy. – 2002. – № 23. – 81-82 с; 6. Айвазян С.А., Мхитарян В.С. Прикладная статистика в задачах и упражнениях. – М.: Юнити-Дана, 2001. – 270 с; 7. Алфименко О. К. Экологически чистые источники энергии / Экология и безопасность в техносфере: современные проблемы и пути решения . – 2016. – № 18. – 123-125 с.;

65 8. Аниева А. Г, Масленникова С. М., Курбанова М. Г., Гаазе З. В. Теоретикометодологические аспекты технико-экономической оценки производства биогаза из отходов сельскаго хозяйства / Аграрный вестник Урала. – 2013. –№ 8 (114). – 115 с; 9. Асонов Н.Р. Микробиология: учебник. — Москва: Колос, 2002. – 352 с; 10. Баадер В., Доне Е., Биогаз: теория и практика/ Пер. с нем. М.И.Серебряного. – М.: Колос, 1982. – 148 с; 11. Бекер М.Е., Лиепиньш Г.К., Райпулис Е.П. Биотехнология. – М.: Агропромиздат, 1990. – 334 с; 12. Берсенева О.А., Кулемина О.А. Возможности производства новых видов топлива из различных видов биомассы / Наука сегодня: опыт, традиции, инновации. - 2016. - № 66. – 10-12 с.; 13. Бирюков А.Б., Гнитиев П.А., Дробышевская И.П. Анализ технологии производства биогаза из органических отходов для замены природного газа / Вестник Донецкого национального технического университета. – 2017. - № 1 (7). – 25-31 с. 14. Бурмистров В. Н., Дрогунов С. В., Сафонов М. А., Шкирмантов А. Ю. Некоторые аспекты биоэнергетики — инновационные направления развития энергетики России / Электрика. – 2011. – № 9. –18–21 с; 15. Вандышева М. С. Биогаз – альтернативный источник энергии / Вестн. НГИЭИ. – 2014. – № 8. – 128 с; 16. Василов Р.Г. Биотопливо: биодизель, биоэтанол, биогаз / вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. – 2007. – №3. – 56 с; 17. Винаров А.Ю., Ипатова Т.В., Соколов Д.П. и др. Биотехнология переработки отходов животноводства и птицеводства в органические удобрения. Хранение и переработка сельхоз сырья. – М.: «Мир», 1997. – 121 с; 18. Винаров А.Ю., Соколов Д.П., Смирнов В.П. и др. Направление интенсификации процессов переработки органических отходов в биотопливо /

66 Московская международная науч.-практич. Конф. «Биотехноогия: экология крупных городов». – 2010. – №21. – 232 с; 19. Виноградов А.Ю., Кухаренко А.А., Дирина Е.Н. Эффективность направленной переработки растительного сырья в биотопливо. Экология и промышленность. – М.: Москва, 2008. – 18 с; 20. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. Микробиология. – М.: Медицина, 1998. – 336с; 21. Воробьева Л.И. Промышленная микробиология. – М.: Высшая школа, 1989. – 293с; 22. Галицкая П.Ю. Совместная утилизация отходов различных производств с получением полезных продуктов и биогаза / ученые записки Казанского университета. – 2011. – №153. – 160 с; 23. Геммеке Б., Ригер К., Вайланд П. Биогаз на основе возобновляемого сырья. – Германия: Агентство по возобновляемым ресурсам, 2010. – 118 с; 24. Герасименко В.Г. Биотехнология. – Киев: КВ УГТ, 2006. –475 с; 25. Горшков В.Н. Перспективные энергоносители для энергетических установок / Актуальные проблемы технических наук в России и за Рубежом. 2016.; 26. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. – М.: Академия, 2007. – 55 с; 27. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. – М.: Изд-во МГУ, 1992. – 448с; 28. Гюнтер Л., Гольдфабр Л. Метантенки. – М: Академия, 1991. – 232 с; 29. Дергачева И.В., Салихов П.Т. Биогаз – электроэнергия, биоудобрение, тепло. – Ташкент: ПРООН, 2011. – 32 с; 30. Дирина Е.Н., Винаров А.Ю., Быков В.А. Проблемы и перспективы разработки биотехнологической утилизации отходов производства биодизеля из растительного сырья / Сельскохозяйственная биология. – 2008. – № 11. – 32 с; 31. Дубровский В.С., Виестур У.Е. Метановое сбраживание сельхоз отходов. – Рига, 1988. – 356 с;

67 32. Дуников Д.О. Биоводород: современное состояние и перспективы использования / Энергия: экономика, техника, экология. – 2016. - № 11. – 1218с.; 33. Егорова Т.А., Клунова С.М.. Основы биотехнологии. – М.: Академия, 2003 – 207с; 34. Елинов Н.П., Заикина Н.А., Соколова И.П. Руководство к лабораторным работам по микробиологии / под редакцией Елинова Н.П. – М.: Медицина, 1987. – 78 с; 35. Жданов В.М. Занимательная микробиология. – М.: Знание, 1967. – 192 с; 36. Зеленин А.Г., Козлов Е.А., Шешеня И.Б. Использование биогаза в энергетике / Молодежь и научно-технический прогресс. – 2016. - № 23. – 102103 с.; 37. Казаков А. Н., Дуников Д. О. перспективные водородпоглощающие материалы для решения проблем очистки и хранения биоводорода / Водородные энергетические технологии. – 2017. - № 7. – 129-135 с.; 38. Князева А. В., Голубев Л. Г., Филиппов А. К. Модульный биореактор для выработки биогаза (метана). Тепломас-собменные процессы и аппараты химической технологии / межвуз. тематич. сб. науч. тр. Казан. ГТУ. –2002. – № 3. – 121–125 с; 39. Козловский Б.Л., Ермолаева О.Ю. Математические методы в биологии. – Ростов-на-Дону, 2012. – 109 с; 40. Красникова Л.В. Микробиология: учебное пособие. — СПб.: Троицкий мост, 2012. — 296 с; 41. Мамантов А. Ю. Обоснование параметров технологической схемы «Отходы животноводства → биогаз → электроэнергия» / Вестник Красноярского Государственного аграрного университета. – 2016. - № 1 (112). – 58-65 с.; 42. Мариненко Е.Е. Основы получения и использования биотоплива для решения вопросов энергосбережения и охраны окружающей среды в жилищно-

68 коммунальном и сельском хозяйстве: Учебное пособие. – Волгоград: ВолгГАСА, 2003. –100 с; 43. Мерзляков А. Ю., Выгузова М. А., Кудряшова А. Г. Способ получения биоводорода из органических отходов / Фундаментальные и прикладные исследования в современном мире. – 2017. - № 17-1. – 29-31 с.; 44. Мишустин Е.Н., Емцев В.Т. Микробиология. – М.:Агропромиздат, 1987. – 94 с; 45. Нетрусов А.И. Практикум по микробиологии. – Академия, 2005. – 114 с; 46. Нетрусов А.И., Котова И.Б. Общая микробиология, - М.: Акадения, 2007. – 97 с; 47. Никитин Г.А. Метановое брожение в биотехнологии. – К.: Вища школа, 1990. –207 с; 48. Определитель бактерий Берджи в 2-х т. Пер с англ/под редакцией Дж. Хоулта, Н. Крема, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильямса. – М.: - Мир, 1997. – 432 с; 49. Пащенко О.В., Морозов А.В. Основы микробиологии: учебное пособие. – Волгоград: Издательство: РГТЭУ, 2011. – 139 с; 50. Практикум по микробиологии/под редакцией Шильниковой В.К. – М.: Дрофа, 2004. – 256 с; 51. Промышленная микробиология. Под ред. Н.С.Егорова. – М.: Высшая школа, 1989. – 688 с; 52. Работнова И.Л. Общая микробиология. – М.: Высшая школа, 1966. – 271 с; 53. Сассон А., Биотехнология: свершения и надежды: Пер. с англ. /Под ред. В.Г.Дебабова. – М.: Мир, 1987. – 411 с; 54. Селивановская С.Ю. Отходы производства и потребления: правовое регулирование, утилизация, размещение. – Казань, 2009. – 222 с; 55. Сидоренко О.Д., Борисенко Е.Г., Ванькова А.А, Войно Л.И. Микробиология. – М.: ИНФРА-М, 2009. – 287 с; 56. Сиротин А.А. Практикум по микробиологии. – Белгород. 2007. – 78 с;

69 57. Стребков Д. С., Ковалев А. А. Биогазовые установки для обработки отходов животноводства / Техника и оборудование для села. – 2006. – №11. – 28−30 с; 58. Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии./под редакцией В.К. Шильниковой. – Дрофа, 2004. – 256 с; 59. Царенко Т.М. Курс лекций по микробиологии. – Витебск: Изд-во УО «ВГУ им. П. М. Машерова», 2004. – 174 с; 60. Шомин А. А. Биогаз на сельском подворье. — Балаклея: Информационно-издательская компания "Балаклійщина", 2002. — 68 с; 61. Эдер Б., Шульц Х. Биогазовые установки. Практическое пособие. Под ред. И. А. Реддих. – М: Мир, 2011. – 486 с.

75 Выход биогаза из различного вида сырья № п/п Дата загрузки Образец ПРИЛОЖЕНИЕ 1. Таблица 1. институт альтернат АО "Белгородский СВ, % оСВ, % Отчет о выходе биогаза из различн Продолжит Суммарный ельность выход биогаза, ферментац м 3 /т ии, сутки № п/п 1 12.01.2017 Силос кукурузный 1 тр 27,75 93,98 77 176 57 2 12.01.2017 Силос кукурузный 1 тр *2 27,75 93,98 77 149 58 3 12.01.2017 Силос кукурузный 1 тр *3 27,75 93,98 77 141 59 4 12.01.2017 Силос кукурузный 1 тр *4 27,75 93,98 77 51 60 5 12.01.2017 Отходы зерновых (зернобобовых культур) 36,74 70,01 77 107 61 6 13.01.2017 Кровь (Новоездоцкая) 14,98 92,59 76 95 62 7 13.01.2017 Кровь (МПЗ АБ) 17,42 94,89 76 103 63 8 13.01.2017 Шлам (МПЗ АБ) 18 85,83 76 35 64 9 13.01.2017 Шлам Новоездоцкий 30,44 89,82 76 267 65 10 13.01.2017 Жир Новоездоцкая 47,52 98,12 76 470 66 11 17.01.2017 Шелуха семечек не измельченная 90,07 95,87 72 537 67 12 17.01.2017 Шелуха семечек измельченная 90,07 95,87 72 565 68 13 17.01.2017 Зерна семечек не измельченные 94,6 97,84 72 749 69 14 17.01.2017 Зерна семечек измельченные 94,6 97,84 72 794 70 15 17.01.2017 Жмых подсолнечника 88,67 93,06 72 456 71 16 17.01.2017 Ботва теплиц НовоСадовый 15,67 68,59 72 67 72 17 17.01.2017 Куриный помет 61,35 75,97 72 293 73 18 17.01.2017 Осветеленные стоки (после сепаратора) 5,22 77,82 72 19 74 19 17.01.2017 Водка 40 100 72 283 75 20 17.01.2017 Шлам творожный 3,47 84,87 72 28 76 21 17.01.2017 Субстрат Ф2 без инокулюма 6,27 80,15 72 31 77 22 17.01.2017 Отсепарированая масса + вода (без инокулюма) 21,06 85,03 72 23 78 23 19.04.2017 Кукурузный силос 2 тр 27,37 95,6 60 172 79 24 19.04.2017 Кукурузный силос 5 тр 26,46 95,84 60 182 80 25 19.04.2017 Лузга подсолнечника 89,25 97 60 505 81 26 19.04.2017 Лузга подсолнечника, измельчѐнная блендером 89,25 97 60 520 82 27 19.04.2017 Кровь Новоездоцкая 12,09 92,8 60 81 83 28 19.04.2017 Кишкомплект МПЗ 23,5 96,6 60 246 84 29 19.04.2017 Шлам МПЗ 16,2 83,15 60 48 85 30 19.04.2017 Сепарированная масса 23,12 84,73 60 65 86 31 19.04.2017 Жидкие органические удобрения (слив дображивателя 5,32 85,5 60 14 87 32 19.04.2017 Свекольный жом (Дмитротарановский с БГС) 21,13 93,93 60 105 88 33 19.04.2017 Корка свекольного жома (Дмитротарановский с БГС) 13,9 80,77 60 59 89 34 19.04.2017 ЖирНовоездоцкая 55,19 98 60 493 90 35 19.04.2017 Жир с площадки в Белгороде (Новоездоцкая) 13,12 86,06 60 102 91 36 19.04.2017 Опилки древесные 90,57 97 60 370 92 37 19.04.2017 Конфеты конти 77,42 99 60 774 93 38 19.04.2017 Шлам Новоездоцкая 36,25 91,16 60 286 94 39 18.05.2017 Сепарированная масса (Актюба) 21,27 92,57 60 64 95 40 18.05.2017 Осветленные стоки (Актюба) 2,71 64,58 60 10 96 41 18.05.2017 Навоз ДО сепарации (Актюба) 4,34 77,88 60 17 97 42 18.05.2017 Смесь (50% сепарации + 50% навоза ДО сепарации) (Актюба) 12,85 85,29 60 42 98 43 18.05.2017 Отходы инкубации Новоездоцкая 31,76 94,71 53 278 99 44 18.05.2017 Кек Бессоновский 13,69 66 53 44 100 45 18.05.2017 Жироловки Строитель 7,07 96,6 53 35 101 46 23.06.2017 Корка лагуны (8 траншея) 15,5 79,03 55 30 102 47 23.06.2017 Силос 5 траншея 28,03 91,33 55 178 103 48 23.06.2017 Силос 1 траншея 27 95,37 55 177 104 49 23.06.2017 Силос 1 траншея х2 27 95,37 55 176 105 50 23.06.2017 Силос 1 траншея х3 27 95,37 55 181 106 51 23.06.2017 Силос 1 траншея х4 27 95,37 55 167 107 52 23.06.2017 Лузга подсолнечника 90,2 98,1 55 413 108 53 23.06.2017 Лузга подсолнечника х2 90,2 98,1 55 395 109 54 23.06.2017 Лузга подсолнечника х4 90,2 98,1 55 353 110 55 23.06.2017 Опилки древесные 91,2 95,4 55 406 111 56 23.06.2017 Шлам МПЗ 13,24 87,61 55 67 112

76 городский институт альтернативной энергетики" т о выходе биогаза из различного вида сырья Продолжение таблицы 1. лжит Суммарный ость выход биогаза, ентац м 3 /т утки Продолжи Суммарн тельность ый выход СВ, % оСВ, % фермента биогаза, ции, сутки м 3 /т № п/п Дата загрузки Образец 7 176 57 23.06.2017 Кишкомплект МПЗ 23,46 95,61 55 7 149 58 23.06.2017 Кровь Белая птица 13,37 93,72 55 81 7 141 59 23.06.2017 Жир Белая птица 62 96,61 55 649 7 51 60 23.06.2017 Смесь БГС 11,9 93,78 55 55 7 107 61 11.08.2017 Жом прессованный 84,74 86,96 61 423 6 95 62 11.08.2017 Жир Новоездоцкая 45,18 97,77 61 473 6 103 63 11.08.2017 Шлам СВУЗ 16,4 84,4 61 122 6 35 64 11.08.2017 Слив Д1+инокулум 5,46 79,58 61 14 6 267 65 11.08.2017 Слив д1 без инокулума 5,46 79,58 61 5 6 470 66 11.08.2017 Зерноотходы (пшеница) 84,1 87,71 61 517 2 537 67 11.08.2017 Зерноотходы (ячмень) 80,5 85,55 61 492 2 565 68 25.08.2017 Кишки МПЗ 25,97 93 52 268 2 749 69 25.08.2017 Кишки+энзим 25,97 93 52 310 (+15%) 2 794 70 25.08.2017 Слив д1 7 84,86 52 12 2 456 71 25.08.2017 Слив д1+энзим 7 84,86 52 11 2 67 72 25,97 93 52 298 (+10%) 2 293 73 25.08.2017 Кишки+энзим х2 25.08.2017 Осадок д2 36,98 31,88 52 14 2 19 74 25.08.2017 Зелѐная масса кукурузы 28,29 96,11 52 149 2 283 75 25.08.2017 Лузга 93,2 96,67 52 399 2 28 76 93,2 96,67 52 416 2 31 77 25.08.2017 Лузга + энзим 25.08.2017 Силос 6 траншея 28,88 96,71 52 198 2 23 78 11,7 85,73 52 47 0 172 79 13,68 94,52 52 80 0 182 80 31,28 82,8 52 233 0 505 81 25.08.2017 Шлам Новоездоцкая 25.08.2017 Опилки 91,2 95,4 52 313 0 520 82 91,2 95,4 52 336 (5%) 0 81 83 25.08.2017 Опилки+энзим 13.10.2017 Жом Головчано 17,66 96,3 63 101 0 246 84 13.10.2017 Жом Дмитротарановский 21,27 95,2 63 139 0 48 85 13.10.2017 Шлам СВУЗ 12,69 81,76 63 93 0 65 86 13.10.2017 Шлам Новоездоцкая 32,88 91,13 63 334 0 14 87 13.10.2017 Шелуха Подсолнечника 86,21 96,89 63 380 0 105 88 13.10.2017 Зерноотходы (пшеница) 84,1 87,1 63 486 0 59 89 13.10.2017 Зерноотходы (ячмень) 80,5 85,55 63 509 0 493 90 31.10.2017 Силос 5 траншея 26,88 95,17 60 176 0 102 91 31.10.2017 Отходы производства комбикормов (смесь) 68,75 93,05 60 483 0 370 92 31.10.2017 Отходы маслопроизводства (ЭФКО) 88,87 94,08 60 376 0 774 93 31.10.2017 Шлам МПЗ 13,57 85,33 60 59 0 286 94 31.10.2017 Отходы производства комбикормов (аспирация) 72,85 84,55 60 376 0 64 95 31.10.2017 Кишки 27,87 93,47 60 300 0 10 96 31.10.2017 Кишки + энзим 27,87 93,47 60 330 (+10%) 0 17 97 93,47 60 320 (+7%) 42 98 31.10.2017 Кишки + энзим (х2) 31.10.2017 Жир Новоездоцкая 27,87 0 44,38 97,45 60 440 3 278 99 31.10.2017 Жир Новоездоцкая + энзим 44,38 97,45 60 495 (+12%) 3 44 100 31.10.2017 Жир Новоездоцкая + энзим (х2) 44,38 97,45 60 495 (+12%) 3 35 101 31.10.2017 Мякотные отходы 45,58 98,26 60 566 5 30 102 31.10.2017 Мякотные отходы + энзим (х2) 45,58 98,26 60 616 (+8%) 5 178 103 31.10.2017 Отруби 86,96 95,79 60 655 5 177 104 21.18 91,89 60 136 5 176 105 31.10.2017 Гнилой силос (зелѐная долина) 19.12.2017 Отходы переработки подсолнечника (прессованный кусками) 93,7 81,01 60 550 5 181 106 19.12.2017 Отходы переработки подсолнечника (прессованный гранулами) 92,5 88,16 60 481 5 167 107 19.12.2017 Ил старый (с нефтепродуктами) 15,49 52,6 60 13 5 413 108 19.12.2017 Ил свежий (с нефтепродуктами) 16,48 69,67 60 56 5 395 109 19.12.2017 Отходы инкубации (мягкие) 48,39 77,34 60 428 5 353 110 19.12.2017 Микс Новоездоцкий (1 точка) 38,96 86,23 60 421 5 406 111 19.12.2017 Микс Новоездоцкий (2 точка) 40,42 89,8 60 440 5 67 112 (смеш/силос/лузга - 40/4/1) 25.08.2017 Шлам МПЗ 25.08.2017 Кровь Новоездоцкая 279

77 ПРИЛОЖЕНИЕ 2. В таблицах 1.1.-8.2. приведены размеры бактериальных клеток, выросших на твердых питательных средах пробы №1. Таблица 1.1. Размер бактериальных клеток. Белые колонии. Среда МПА. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,22 2,02 2,84 1,26 2,27 2,09 2,96 2,02 2,2 2,05 2,44 1,98 2,39 2,09 2,52 2,52 2,37 2,44 2,38 2,1 2,09 2,65 2,73 2,37 2,64 1,62 2,38 2,6 2,74 2,34 1,93 2,02 2,8 1,9 2,3 2,36 2,09 2,39 1,93 2,73 2,17 1,9 2,02 2,74 2,38 1,93 2,31 2,31 1,9 2,68 2,24 2,17 2,74 2,32 2,2 2,16 1,04 2,86 2,1 2,39 2,02 1,93 2,68 2,16 2,31 2,56 2,1 2,32 2,02 2,19 2,27 2,27 2,68 2,1 2,44 1,31 2,26 1,9 2,14 1,93 2,56 2,56 2,86 2,94 2,16 1,9 2,19 2,06 2,1 2,68 2,32 2,2 2,17 2,2 2,34 2,34 2,26 2,55 2,8 2,44 2,86 2,55 2,34 2,38 2,94 2,37 1,26 2,8 2,32 2,56 2,34 2,34 1,98 2,02 2,44 2,96 1,9 1,98 2,39 2,52 2,26 2,44 2,34 2,44 2,38 2,17 2,02 2,6 1,93 2,6 2,1 1,96 2,76 2,02 2,38 2,26 2,55 2,14 1,96 1,94 1,98 2,34 2,44 2,14 2,38 2,09 2,17 1,56 2,56 1,68 Xср.  m 2,269 18,143 1,481 Таблица 1.2. Размер бактериальных клеток. Белые колонии. Среда МПА. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 0,84 1,18 0,84 1,04 1,16 1,04 0,94 1,16 0,94 0,99 1,16 1,13 1,16 0,94 1,26 1,18 1,18 1,26 0,96 1,04 0,74 1,24 1,13 1,26 0,86 1,26 0,94 0,94 0,94 0,74 1,26 1,18 1,26 1,04 1,03 1,26 1,26 0,74 1,22 1,04 1,13 0,94 0,84 0,94 1,13 1,18 1,22 1,18 1,16 0,84 1,26 1,16 0,94 1,16 1,26 1,13 1,16 1,18 1,16 1,18 0,99 1,24 0,86 1,24 0,94 1,26 0,16 1,04 1,04 1,17 0,84 0,74 0,99 1,18 1,04 1,13 1,18 1,16 1,26 1,16 1,24 1,32 1,04 1,13 0,86 0,74 0,99 0,94 0,84 1,18 1,16 1,26 0,13 1,16 0,94 1,19 0,99 1,26 1,24 1,16 1,22 0,99 0,99 1,17 1,13 1,26 0,94 1,13 1,17 1,26 0,86 0,84 0,94 0,86 1,24 1,26 1,16 0,94 0,94 1,26 0,74 1,16 1,24 1,26 1,22 0,88 0,84 1,16 1,17 0,74 0,84 1,04 0,88 1,04 0,99 0,94 1,16 0,84 1,22 2,04 1,19 0,86 1,26 1,26 1,16 0,96 0,94 1,22 1,24 1,18 Xср.  m 1,070 6,259 0,511

78 Таблица 2.1. Размер бактериальных клеток. Бледно-кремовые колонии. Среда МПА. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,83 2,82 1,89 2,16 1,97 2,35 2,9 2,74 2,02 2,35 2,08 2,65 1,78 2,78 2,08 2,27 2,26 2,35 2,74 2,44 1,89 1,99 2,16 2,35 2,78 2,08 2,35 2,9 2,01 1,69 2,02 1,73 2,59 2,44 2,59 2,83 2,26 2,59 2,01 2,69 2,83 1,78 2,44 2,21 2,9 2,44 2,27 2,44 2,44 2,83 2,59 1,89 1,99 2,35 2,26 2,74 1,83 2,21 2,78 2,08 2,59 2,16 2,08 2,16 2,57 1,96 2,82 2,74 2,27 1,96 1,83 2,26 1,73 2,35 2,59 2,01 2,83 1,97 1,89 2,44 2,21 1,97 2,9 2,01 2,83 2,09 1,96 2,9 2,87 2,65 2,02 2,9 2,02 2,87 2,02 1,97 1,65 1,96 2,74 2,01 2,35 1,69 2,08 2,09 1,73 2,09 1,89 1,96 2,09 2,02 1,99 1,83 2,26 2,83 2,21 2,44 2,27 2,02 2,98 2,08 1,99 2,35 1,97 2,21 2,78 2,78 2,59 2,16 2,21 1,78 2,01 2,87 2,09 2,35 2,26 1,78 2,16 2,9 2,09 2,83 1,99 2,21 1,89 2,35 2,74 2,87 2,78 1,73 2,74 2,16 Xср.  m 2,300 19,737 1,611 Таблица 2.2. Размер бактериальных клеток. Бледно-кремовые колонии. Среда МПА. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 0,84 0,96 1,19 0,94 1,17 0,8 0,89 1,19 1,17 0,82 0,96 1,03 1,17 0,7 1,08 0,89 0,74 0,95 1,17 1,04 0,89 0,95 1,26 0,7 1,08 1,22 1,04 0,96 0,95 1,19 0,74 1,17 0,82 1,05 0,7 1,19 1,04 1,03 1,17 0,8 1,22 1,08 0,96 0,89 0,9 0,9 1,19 0,74 0,9 1,03 1,4 0,74 1,08 1,05 0,89 1,26 0,94 1,04 0,7 0,8 0,82 0,89 0,74 1,04 1,03 0,96 1,4 0,7 0,7 1,22 1,22 1,17 0,9 1,03 1,26 0,96 1,26 0,9 0,96 1,22 1,04 1,17 0,96 1,4 0,89 1,19 1,26 0,96 1,26 1,19 1,03 1,13 0,8 0,8 0,84 1,04 0,74 1,4 1,19 0,89 1,03 1,4 1,22 1,19 0,8 0,95 0,84 0,9 0,9 1,22 1,26 1,22 1,08 0,7 1,17 0,95 0,89 0,74 1,05 1,03 1,26 1,22 1,13 1,08 0,9 1,19 0,74 1,04 0,7 1,05 2,8 1,4 1,05 0,95 1,19 1,26 1,17 0,74 1,17 0,96 1,22 1,05 1,17 0,96 0,8 0,89 1,13 0,89 1,19 1,22 Xср.  m 1,033 8,115 0,663

79 Таблица 3.1. Размер бактериальных клеток. Кремовые колонии. Среда МПА. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 3,05 2,79 3,03 3,02 3,45 3,03 2,95 2,83 2,95 3,45 3,45 2,97 2,79 3,29 2,97 2,97 3,39 3,79 3,05 3,39 3,75 2,81 2,79 3,03 3,45 2,97 3,45 3,03 3,45 3,37 2,86 3,37 3,59 3,12 3,02 3,37 3,03 2,75 3,03 3,53 3,18 3,03 3,42 2,87 3,05 3,05 3,62 3,05 2,81 3,18 2,81 3,37 2,76 3,03 3,03 2,81 3,55 2,87 3,65 3,18 2,81 3,59 3,39 3,02 3,65 2,81 3,45 3,37 3,39 3,45 2,79 3,39 3,39 3,45 3,03 3,59 3,03 3,59 3,53 2,97 2,79 3,53 3,03 3,54 3,03 3,05 3,37 3,45 3,65 3,69 3,39 3,03 3,12 2,75 3,57 3,45 3,65 3,45 3,03 3,37 2,79 3,53 2,99 3,54 3,02 2,82 3,37 2,89 3,42 3,29 2,91 3,29 3,03 3,47 3,03 3,02 2,81 3,69 3,03 3,12 3,57 3,57 3,02 3,37 3,59 2,75 3,84 3,44 3,53 3,45 2,81 3,81 3,02 3,61 2,64 3,33 3,79 2,81 3,59 3,12 3,13 3,87 3,69 3,39 3,03 3,12 3,69 3,45 3,37 3,59 Xср.  m 3,221 14,123 1,155 Таблица 3.2. Размер бактериальных клеток. Кремовые колонии. Среда МПА. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,33 0,95 1,33 1,33 0,85 1,26 1,73 0,85 0,95 0,95 1,19 1,27 1,33 0,95 1,33 0,71 1,33 1,69 0,85 1,45 0,95 1,51 1,73 1,33 0,76 0,85 1,69 1,19 1,51 0,76 1,67 0,95 0,85 1,73 1,73 1,15 1,55 1,33 0,85 0,95 1,69 1,19 1,19 1,27 0,85 0,85 1,27 1,69 0,92 1,27 0,95 1,52 0,95 1,27 1,89 1,66 1,27 0,95 1,33 1,69 0,82 1,27 0,85 1,27 1,73 1,33 1,89 0,85 1,04 1,27 0,95 0,95 1,29 1,51 1,33 0,85 1,33 0,95 1,33 1,27 0,95 1,33 1,51 0,74 1,89 0,85 1,54 0,95 1,19 0,85 1,89 0,85 0,95 1,19 1,27 1,19 0,95 0,76 0,85 1,33 1,27 1,69 1,33 0,95 1,33 1,15 1,27 1,19 0,85 0,85 1,19 0,95 1,19 0,95 1,33 0,95 1,27 1,33 1,73 0,85 1,51 1,73 1,67 0,95 0,95 1,27 1,69 1,19 1,33 1,27 1,69 1,73 1,27 1,33 0,95 1,33 1,33 0,82 1,27 1,69 1,18 1,27 1,27 1,51 0,95 1,19 1,14 1,51 0,76 1,33 Xср.  m 1,225 13,891 1,135

80 Таблица 4.1. Размер бактериальных клеток. Светло-бордовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм Xср. 2,73 2,27 2,15 2,37 2,55 2,29 2,69 2,69 2,58 2,69 2,10 2,53 2,74 2,16 2,45 2,37 2,89 2,86 2,37 2,53 2,65 2,97 2,97 2,78 2,79 2,12 2,65 2,65 2,17 2,35 2,45 2,79 2,29 2,65 2,78 2,63 2,27 2,69 2,62 2,87 2,69 2,53 2,77 2,73 2,59 2,35 2,53 2,15 2,35 2,73 2,65 2,12 2,69 2,73 2,89 2,74 2,65 2,69 2,33 2,47 2,73 2,38 2,72 2,35 2,54 2,39 2,73 2,83 2,55 2,69 2,88 2,15 2,65 2,46 2,53 2,69 2,69 2,58 2,65 2,53 2,88 2,89 2,15 2,28 2,29 2,69 2,54 2,17 2,81 2,59 2,12 2,69 2,75 2,89 2,59 2,28 2,73 2,65 2,58 2,17 2,17 2,79 2,54 2,89 2,73 2,37 2,65 2,27 2,58 2,62 2,53 2,29 2,69 2,36 2,48 2,17 2,17 2,36 2,53 2,27 2,28 2,37 2,73 2,54 2,55 2,27 2,29 2,39 2,97 2,89 2,39 2,53 2,53 2,73 2,55 2,97 2,73 2,72 2,55 2,97 2,89 2,69 2,37 2,53 2,56 2,55 2,55 2,73 2,16 2,17 2,54  m 8,088 0,661 Таблица 4.2. Размер бактериальных клеток. Светло-бордовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,18 0,77 0,75 1,33 0,89 1,18 1,51 0,85 0,85 0,89 1,27 0,75 0,75 1,27 1,27 0,95 1,27 1,18 0,85 1,19 1,25 0,85 0,85 0,98 1,23 1,55 1,03 1,27 0,85 1,14 0,87 1,19 1,27 1,19 1,14 1,18 1,19 0,89 0,98 0,85 0,75 0,85 1,27 1,27 0,85 0,96 1,19 0,75 1,06 1,27 1,33 0,98 0,85 0,95 1,14 1,19 0,95 0,95 1,27 0,97 1,19 0,95 1,27 1,69 1,18 1,27 2,15 1,33 0,98 1,18 1,16 0,85 0,95 1,19 0,95 1,18 1,27 0,95 1,19 1,18 1,14 1,27 0,87 0,89 0,85 0,85 0,77 0,26 0,75 0,85 0,85 0,98 1,27 1,27 1,18 1,18 1,17 1,27 0,87 1,73 1,27 1,19 1,19 1,18 1,33 1,19 1,03 0,97 1,27 0,95 1,19 1,27 1,19 1,19 1,23 1,27 1,27 0,85 1,05 1,16 1,08 1,27 1,06 1,14 0,77 1,26 1,27 0,75 1,17 0,97 0,85 0,85 1,14 0,85 1,27 1,28 0,95 1,51 0,95 1,23 1,27 1,27 1,27 1,23 0,95 0,95 1,33 1,28 0,87 1,27 Xср.  m 1,088 7,688 0,629

81 Таблица 5.1. Размер бактериальных клеток. Бледно-розовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,69 1,89 1,73 2,29 1,89 1,89 2,37 2,65 2,85 1,75 2,97 1,98 2,65 2,27 2,97 2,45 1,95 2,55 2,37 1,97 2,82 2,69 2,37 2,17 1,98 1,97 2,16 1,76 2,19 2,55 1,77 2,53 2,36 1,79 1,73 2,17 2,45 2,86 2,18 2,45 1,73 2,69 1,79 1,89 1,89 2,45 1,73 2,15 2,17 2,85 2,39 2,15 1,89 1,89 2,37 2,15 2,14 1,89 2,45 2,17 2,53 2,17 2,13 2,27 1,75 1,98 2,3 2,52 2,06 1,88 1,51 2,27 1,79 1,75 2,03 2,75 1,89 1,98 2,45 2,69 2,65 2,36 2,37 2,27 1,89 2,15 2,53 2,14 2,57 1,79 2,27 1,94 2,37 1,98 2,15 2,69 1,97 2,45 1,88 1,97 2,53 2,28 2,18 2,03 2,75 2,27 2,15 2,15 2,69 2,45 2,37 2,37 1,86 1,89 2,03 2,55 2,65 1,73 2,37 2,03 1,79 2,17 1,98 2,77 2,55 2,38 2,37 1,77 1,88 2,66 2,85 1,73 2,55 1,27 2,15 1,89 2,85 2,03 2,03 1,97 1,89 2,45 1,88 2,25 2,55 2,27 2,69 2,37 1,98 1,73 Xср.  m 2,201 17,132 1,398 Таблица 5.2. Размер бактериальных клеток. Бледно-розовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,06 1,35 0,76 0,93 1,09 1,14 0,76 1,09 0,76 1,35 1,06 0,76 0,87 0,95 0,76 0,85 1,35 0,95 1,35 0,85 1,14 0,88 1,33 1,14 1,19 1,19 1,28 1,35 1,35 1,06 1,19 1,35 1,28 0,87 1,09 0,87 1,09 1,09 1,19 1,19 0,76 1,23 1,35 1,09 1,27 0,85 1,06 1,35 0,95 0,85 1,09 0,76 1,29 1,09 1,35 1,33 0,95 1,27 1,27 1,28 1,35 1,35 1,19 0,85 0,87 1,35 1,28 1,27 1,28 1,06 1,05 1,09 1,14 1,33 1,23 1,27 1,35 1,23 0,87 0,88 0,87 1,27 1,23 1,14 0,75 1,27 1,28 0,95 1,06 1,23 1,23 0,88 1,06 0,95 0,76 1,19 0,85 1,27 1,14 1,19 1,35 0,85 1,28 0,85 1,35 1,06 1,29 1,27 0,88 1,19 1,35 1,06 1,19 1,29 1,14 0,87 1,19 0,85 1,14 0,87 0,95 0,95 1,06 0,87 1,23 1,19 0,85 1,29 0,95 0,85 0,85 0,76 1,19 1,27 1,33 1,23 1,35 1,14 1,09 1,14 1,29 1,27 1,23 0,85 1,27 0,88 1,19 1,29 1,35 1,06 Xср.  m 1,099 5,358 0,439

82 Таблица 6.1. Размер бактериальных клеток. Розовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,98 2,99 3,39 2,18 2,91 2,53 2,69 2,74 2,65 2,38 3,03 2,89 2,74 2,84 3,39 2,84 2,07 2,79 2,99 2,55 2,75 2,95 2,58 2,69 2,95 3,12 2,97 3,03 2,99 2,55 2,64 3,03 2,99 2,95 2,55 2,76 2,95 2,58 2,24 2,84 2,75 2,37 2,58 3,03 2,88 2,91 2,37 2,88 2,88 2,85 2,57 2,37 2,37 2,98 2,89 2,83 2,92 3,12 2,74 2,32 2,55 2,83 2,91 2,75 2,37 2,79 2,65 2,95 3,39 3,23 3,03 2,65 2,74 2,83 2,07 2,34 2,99 2,99 2,79 3,03 2,65 2,89 2,88 2,69 2,53 2,91 2,58 2,83 2,95 2,89 2,88 2,79 2,95 2,69 2,69 2,55 2,85 2,55 2,64 2,64 2,54 2,83 2,83 2,07 2,32 2,58 2,24 2,53 2,24 2,79 2,74 2,88 2,58 2,95 2,81 2,32 2,91 2,67 2,24 2,37 2,69 2,55 2,64 2,75 2,95 2,07 2,69 2,69 2,89 2,74 2,65 2,84 2,88 2,58 2,97 2,89 2,55 2,75 2,55 2,37 2,97 2,75 2,64 2,95 2,66 3,03 2,32 2,84 2,88 2,64 Xср.  m 2,724 9,648 0,789 Таблица 6.2. Размер бактериальных клеток. Розовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,06 1,09 0,88 1,14 1,05 0,87 1,28 1,19 1,18 0,77 1,15 0,77 1,28 1,05 1,04 1,16 0,96 1,04 1,09 1,04 0,87 1,27 0,96 1,18 1,18 1,23 0,97 1,18 1,06 1,26 1,27 1,02 1,19 1,24 1,08 1,28 1,05 1,15 1,19 1,06 0,77 1,19 1,28 1,27 1,36 1,28 1,04 1,05 1,49 0,96 1,49 1,04 0,96 0,87 1,27 0,76 1,04 1,06 1,48 1,28 1,15 1,15 1,24 1,19 0,77 1,28 1,08 1,04 1,23 1,49 1,14 1,18 0,81 0,76 1,28 1,19 1,27 1,28 0,76 1,36 1,06 1,18 1,08 1,08 0,77 1,07 1,48 1,37 1,07 0,82 1,05 0,77 1,36 0,88 1,18 1,19 0,97 1,36 1,14 0,87 0,95 1,49 1,19 1,27 1,06 1,14 0,97 1,28 1,29 1,15 0,77 0,89 0,98 1,19 0,89 0,98 1,28 1,14 1,09 1,06 1,04 0,97 1,14 0,97 1,05 0,87 1,18 0,76 1,14 0,79 0,91 1,14 1,07 1,37 1,37 1,08 1,19 1,19 1,24 0,77 1,05 1,07 1,18 1,28 1,28 0,97 1,19 0,76 1,18 1,14 Xср.  m 1,094 4,862 0,398

83 Таблица 7.1. Размер бактериальных клеток. Серо-розовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 3,08 2,83 2,89 3,23 2,91 2,92 2,92 2,74 2,24 2,79 2,55 2,74 2,32 2,79 2,38 2,69 2,32 2,24 2,81 2,55 2,97 2,38 2,55 2,58 2,88 2,24 2,65 2,24 2,24 2,55 2,79 2,83 2,99 2,55 3,08 2,97 2,88 2,21 2,81 2,88 2,55 2,68 2,92 2,55 2,24 2,38 2,64 3,03 2,81 2,75 2,89 2,58 2,58 2,74 3,06 3,03 2,58 2,38 2,64 2,88 2,32 2,58 2,32 2,89 3,08 2,92 2,37 2,89 2,97 2,58 2,32 2,95 2,89 2,95 2,32 2,53 2,55 2,69 2,58 2,89 2,53 2,84 3,32 2,89 2,89 2,64 2,75 2,55 2,92 2,55 2,95 3,08 2,79 3,08 2,69 2,37 2,67 2,91 2,75 2,64 2,32 2,38 2,32 2,91 3,03 2,32 2,75 2,92 2,83 2,99 2,24 2,69 3,03 2,53 2,91 2,65 2,56 2,65 2,89 2,32 2,55 2,92 2,37 2,55 2,84 2,97 2,38 2,24 2,55 2,31 3,32 2,91 2,38 2,85 3,08 2,24 2,55 2,99 2,89 2,89 2,58 2,38 2,97 2,32 2,92 2,79 2,65 2,92 2,24 2,55 Xср.  m 2,681 9,676 0,791 Таблица 7.2. Размер бактериальных клеток. Серо-розовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,23 1,08 1,49 1,49 1,14 1,23 1,18 1,06 0,87 0,95 0,87 1,06 1,09 1,49 1,28 0,88 1,28 1,27 1,09 1,19 1,28 0,85 1,27 0,95 1,19 0,95 1,19 0,95 1,08 0,85 1,35 1,09 1,49 0,88 1,49 1,09 1,35 1,19 1,35 1,09 0,85 1,23 1,09 1,27 0,87 1,05 1,27 1,06 1,06 1,27 1,28 1,27 1,08 1,28 0,88 1,18 1,14 1,18 0,85 1,19 1,28 0,88 1,27 1,08 0,87 1,28 1,49 1,19 0,85 1,28 1,35 0,95 1,06 1,08 0,95 1,09 0,95 1,06 1,19 1,05 1,27 1,27 1,08 1,28 1,27 1,23 1,14 0,95 0,88 1,49 0,85 1,18 1,23 0,95 0,95 1,27 1,28 0,87 1,27 1,28 0,87 1,28 0,87 1,23 1,28 1,19 1,05 0,95 0,95 1,18 1,06 0,95 1,05 1,14 1,08 1,08 1,35 0,95 1,14 1,14 1,49 1,19 1,27 0,95 0,95 1,23 1,05 1,28 1,09 0,85 1,49 1,26 1,26 1,28 1,06 1,09 1,14 1,06 0,95 1,49 1,06 0,95 0,87 1,19 0,88 0,87 1,15 1,49 1,35 1,23 Xср.  m 1,125 4,629 0,379

84 Таблица 8.1. Размер бактериальных клеток. Бордовые колонии с металлическим блеском. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 3,02 3,02 3,18 3,27 2,92 3,39 3,38 3,08 3,39 2,87 3,39 3,03 3,02 3,32 2,97 3,36 3,03 3,38 3,32 3,33 3,38 2,92 3,38 3,08 3,02 3,27 3,38 3,05 3,08 3,03 2,87 2,92 2,97 3,14 2,97 3,14 2,89 3,08 2,84 2,92 2,97 3,37 3,38 2,95 3,18 2,89 3,25 3,38 2,97 2,92 3,38 2,97 3,27 3,32 3,02 3,37 3,39 3,38 3,32 2,97 3,39 2,97 2,74 3,02 3,08 3,08 3,18 3,18 3,37 2,97 3,03 3,18 2,95 3,39 2,27 2,92 2,87 3,08 2,95 3,27 2,87 3,37 3,02 2,95 2,92 3,32 3,38 2,95 3,08 3,27 3,14 3,39 2,92 3,18 3,08 2,97 3,05 2,97 2,92 3,02 3,14 3,18 2,97 2,84 3,27 3,08 3,02 2,92 3,02 3,03 3,02 3,38 2,87 3,35 3,38 3,03 3,37 3,02 3,38 3,27 3,02 2,95 2,89 2,95 3,37 3,08 3,02 3,08 3,18 2,97 3,03 2,98 3,38 3,08 3,38 2,89 2,92 3,05 3,02 3,03 3,08 2,38 2,92 3,38 3,02 2,95 2,97 2,97 3,38 3,27 Xср.  m 3,096 6,005 0,491 Таблица 8.2. Размер бактериальных клеток. Бордовые колонии с металлическим блеском. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,65 1,27 1,18 1,06 1,35 1,65 0,95 1,51 0,95 1,56 1,27 1,33 1,19 0,95 1,18 1,15 1,14 1,18 1,65 0,87 1,35 1,23 1,23 1,18 1,05 1,27 1,33 1,04 1,27 0,95 1,35 1,33 1,14 0,95 1,04 1,19 1,18 0,95 0,87 1,27 1,33 0,95 1,23 0,95 0,85 0,88 1,56 1,18 1,35 1,23 1,36 0,95 0,88 0,88 0,88 1,06 1,19 1,19 1,33 1,33 1,23 1,14 1,33 1,08 0,88 1,09 1,18 1,18 0,88 1,27 1,65 1,27 1,09 1,18 1,07 1,33 1,06 1,08 1,56 1,65 1,27 1,54 1,19 1,19 1,33 1,65 1,14 1,27 1,18 1,65 1,19 1,33 1,33 0,97 1,54 1,18 1,14 1,65 1,33 0,92 1,67 1,33 1,18 0,95 0,85 1,18 0,85 1,06 1,05 1,27 1,37 0,95 0,95 0,85 0,97 1,04 1,27 1,05 1,18 0,95 1,19 0,87 0,85 1,07 1,33 1,65 1,05 1,56 0,95 1,36 1,27 1,05 0,88 1,27 1,35 1,05 0,95 1,27 1,19 1,65 1,33 1,09 0,85 1,27 1,05 1,06 1,14 1,18 1,65 1,27 Xср.  m 1,182 6,932 0,567

85 В таблицах 9.1.-16.2. приведены размеры бактериальных клеток, выросших на твердых питательных средах пробы №2. Таблица 9.1. Размер бактериальных клеток. Белые колонии. Среда МПА. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,08 2,31 2,17 2,38 1,94 1,99 2,34 2,69 2,45 2,66 2,32 2,12 1,99 2,38 1,94 2,08 2,35 1,94 2,35 2,57 2,31 2,57 2,35 2,38 2,13 2,32 2,38 2,35 2,38 2,17 2,53 2,35 2,07 2,32 2,08 2,27 1,94 2,22 2,53 2,38 1,94 2,08 2,56 2,27 2,18 2,27 2,69 2,25 2,08 2,35 2,38 1,91 2,38 1,92 2,57 2,08 1,94 2,15 2,28 2,08 2,45 2,27 2,28 2,32 2,32 2,28 1,91 2,35 2,56 2,27 2,18 2,38 1,94 2,17 1,94 2,57 2,35 2,67 2,11 2,38 1,94 2,17 2,38 2,59 2,38 2,38 2,59 2,59 2,07 2,38 2,54 2,67 2,18 2,35 2,56 2,07 2,12 2,59 2,32 2,07 2,69 2,05 2,07 2,17 2,45 2,27 2,07 2,18 2,17 2,28 2,35 2,57 1,99 2,15 2,25 2,32 2,08 2,57 2,38 2,28 2,45 2,14 2,25 2,69 2,66 2,38 2,18 2,08 2,45 2,35 2,66 2,56 2,26 1,99 2,38 2,36 2,08 2,35 2,35 2,26 2,28 2,27 2,28 2,08 1,94 2,27 2,05 2,53 2,17 2,15 Xср.  m 2,272 6,347 0,519 Таблица 9.2. Размер бактериальных клеток. Белые колонии. Среда МПА. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,06 1,14 1,28 1,09 1,07 1,07 1,18 0,96 1,18 1,05 0,88 0,95 1,09 1,14 1,04 0,95 1,18 1,19 1,23 1,04 1,28 1,27 1,06 1,19 0,87 0,76 1,06 0,87 0,88 1,27 1,27 1,18 1,05 0,96 1,23 1,09 1,14 1,06 1,23 0,87 1,04 1,18 1,04 0,88 1,07 1,18 0,96 1,18 0,85 1,27 1,23 1,18 1,06 1,27 1,04 0,76 0,96 0,88 1,05 0,88 1,04 0,88 1,18 1,25 0,97 0,96 1,09 1,18 1,09 1,05 1,28 1,05 1,05 1,28 1,09 1,19 0,95 1,19 1,28 1,18 1,04 0,95 0,97 0,97 1,23 1,18 1,28 0,97 0,92 1,28 1,18 0,97 0,97 1,27 1,23 1,06 1,14 1,09 0,95 1,28 0,95 1,18 1,23 1,04 1,06 1,18 0,88 0,94 0,95 1,27 0,76 0,95 1,05 1,03 1,14 1,18 0,95 0,76 1,06 1,27 0,96 1,18 1,28 1,28 1,23 1,14 0,95 0,95 0,88 1,14 1,27 1,09 1,14 1,05 1,28 1,23 1,22 0,86 0,93 1,09 1,04 0,88 0,97 1,28 1,18 0,97 1,24 1,28 1,15 1,05 Xср.  m 1,076 3,088 0,253

86 Таблица 10.1. Размер бактериальных клеток. Бледно-кремовые колонии. Среда МПА. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,46 2,36 2,32 1,89 2,03 2,74 2,32 1,98 2,02 2,58 2,02 2,27 2,84 2,32 2,08 2,22 1,98 2,46 2,28 2,08 2,45 2,09 2,28 2,35 2,38 2,86 2,58 1,89 2,18 2,78 2,09 2,56 2,75 1,85 1,88 2,54 2,32 2,02 2,84 2,35 2,75 1,95 2,38 1,98 2,18 1,88 1,88 2,74 1,89 2,17 2,46 2,35 2,17 2,35 2,14 1,98 2,17 2,83 2,76 2,09 2,02 2,53 2,27 2,75 1,98 1,98 1,98 2,22 2,84 2,46 2,45 2,02 2,38 2,36 2,86 2,79 2,32 2,75 2,53 2,36 2,35 2,08 2,83 2,18 2,06 2,08 2,78 1,97 2,56 2,17 2,36 2,32 1,97 2,79 2,03 2,56 2,83 2,17 2,32 2,45 2,26 2,27 2,56 2,72 2,22 2,18 2,83 2,35 1,97 2,08 1,88 2,83 2,45 2,35 2,03 1,98 2,79 2,28 2,45 1,97 2,32 1,97 1,88 2,74 2,02 2,53 2,03 2,22 1,88 2,38 2,79 2,84 2,58 2,45 1,98 2,32 2,28 2,03 1,88 2,18 2,38 2,75 2,02 2,32 2,45 2,45 1,98 1,88 1,98 2,02 Xср.  m 2,304 13,068 1,068 Таблица 10.2. Размер бактериальных клеток. Бледно-кремовые колонии. Среда МПА. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,23 0,85 1,18 1,09 1,28 1,06 0,87 0,96 0,91 0,95 1,09 1,23 0,88 1,28 0,85 1,14 0,95 1,18 0,96 0,87 1,18 1,27 1,27 1,28 1,17 0,76 1,04 0,91 1,23 1,33 0,85 1,06 1,23 0,85 0,85 1,33 0,95 1,09 0,96 1,14 1,27 1,18 1,09 0,95 1,09 1,14 1,04 1,23 1,18 1,24 0,76 1,23 1,18 0,95 0,88 1,14 1,33 1,09 0,76 0,88 0,85 1,28 1,19 0,88 0,76 1,04 0,96 1,28 1,06 1,04 1,28 1,18 0,87 0,96 1,28 0,87 0,76 1,19 1,19 1,27 1,04 1,09 1,09 0,87 1,33 1,06 1,14 0,87 1,27 0,87 1,18 1,18 0,98 0,85 0,85 1,33 0,95 0,76 1,23 1,33 1,19 1,09 0,95 1,28 1,18 1,18 0,87 1,19 0,95 0,98 1,33 0,96 1,28 0,76 1,04 1,18 0,95 1,23 1,14 0,88 1,09 0,96 1,19 1,09 1,14 1,06 0,95 0,88 1,19 1,18 1,33 1,06 0,96 0,95 0,85 0,85 0,76 1,27 1,27 1,14 1,17 1,28 1,06 1,09 1,09 0,88 1,04 0,76 1,18 1,04 Xср.  m 1,057 4,133 0,338

87 Таблица 11.1. Размер бактериальных клеток. Кремовые колонии. Среда МПА. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 3,53 3,47 3,65 3,45 3,45 3,29 3,39 3,02 3,03 3,05 3,53 3,57 2,55 3,58 2,93 2,99 2,64 3,45 3,39 3,39 3,45 2,87 2,78 3,53 3,57 3,57 3,55 2,89 3,03 3,57 2,79 3,45 3,37 2,97 3,39 2,69 3,37 2,97 2,88 3,65 3,03 3,59 3,57 3,39 2,84 3,57 3,37 3,58 3,57 3,37 3,25 3,39 2,97 2,85 3,05 2,72 3,03 3,03 3,18 3,45 3,47 3,03 3,03 3,57 2,74 3,02 3,53 3,12 3,06 3,53 3,59 2,95 2,95 3,64 3,03 2,74 3,39 3,69 3,39 3,39 3,38 3,03 3,53 2,99 3,02 2,75 3,53 2,79 2,75 2,69 3,05 3,03 3,39 3,45 3,57 2,74 2,79 2,97 3,32 3,53 3,03 3,05 3,59 2,75 3,45 3,42 3,37 3,45 2,83 2,85 3,58 3,45 3,59 2,82 2,89 2,87 2,78 3,05 3,57 2,85 3,03 3,45 3,37 3,53 3,37 2,93 2,97 3,55 2,87 3,65 3,47 3,47 3,03 2,53 2,84 3,55 2,85 2,79 3,37 2,75 3,57 2,95 3,53 3,59 3,23 3,59 3,12 3,57 3,53 3,47 Xср.  m 3,202 14,979 1,224 Таблица 11.2. Размер бактериальных клеток. Кремовые колонии. Среда МПА. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 0,96 1,06 1,65 1,48 1,23 1,06 1,33 0,96 1,35 1,09 1,27 1,23 0,88 1,58 1,49 1,65 1,65 0,85 0,87 1,09 1,58 1,27 0,95 1,49 1,52 1,48 0,87 1,35 1,52 1,29 0,96 1,28 1,35 0,95 1,19 1,48 1,48 1,35 1,65 1,52 0,85 1,27 1,27 1,28 1,48 1,48 1,29 1,14 1,28 1,06 1,35 1,33 1,09 1,22 1,35 1,48 1,14 0,85 1,14 1,27 0,95 1,29 1,48 1,35 0,88 1,48 1,49 1,09 1,49 0,87 0,85 1,48 0,88 1,35 1,33 0,95 1,19 1,28 1,06 1,28 0,87 1,49 1,48 0,88 1,58 0,88 1,52 0,96 1,09 0,95 1,45 1,06 1,65 1,65 1,33 1,35 0,95 1,19 1,29 1,14 0,85 1,14 1,27 1,35 1,49 1,33 1,23 1,45 1,19 1,29 1,52 1,45 1,35 1,28 1,48 1,35 1,28 1,45 1,09 1,35 0,96 0,88 0,85 1,23 1,23 1,58 1,58 0,87 1,45 1,06 1,23 1,12 1,19 1,48 1,35 1,48 1,19 1,58 1,35 1,06 1,29 1,33 1,43 1,23 1,52 1,52 0,87 1,06 1,28 1,48 Xср.  m 1,248 7,782 0,636

88 Таблица 12.1. Размер бактериальных клеток. Светло-бордовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,32 2,65 2,65 2,38 2,83 2,49 2,48 2,33 2,35 2,36 2,88 2,74 2,37 2,29 2,52 2,32 2,58 2,39 2,48 2,45 2,48 2,37 2,75 2,83 2,38 2,53 2,37 2,35 2,45 2,32 2,86 2,86 2,53 2,58 2,74 2,85 2,58 2,64 2,45 2,56 2,35 2,48 2,27 2,78 2,88 2,77 2,65 2,26 2,29 2,28 2,34 2,18 2,88 2,28 2,59 2,76 2,78 2,95 2,65 2,79 2,75 2,78 2,65 2,45 2,52 2,56 2,65 2,64 2,75 2,85 2,32 2,58 2,78 2,86 2,59 2,27 2,74 2,28 2,58 2,48 2,28 2,83 2,65 2,37 2,88 2,23 2,48 2,39 2,35 2,32 2,45 2,74 2,65 2,74 2,74 2,36 2,53 2,35 2,32 2,27 2,56 2,27 2,36 2,59 2,38 2,87 2,75 2,88 2,28 2,69 2,46 2,54 2,58 2,32 2,98 2,54 2,37 2,67 2,88 2,76 2,47 2,27 2,46 2,59 2,59 2,58 2,35 2,36 2,56 2,27 2,54 2,48 2,74 2,35 2,69 2,29 2,33 2,32 2,35 2,53 2,45 2,38 2,37 2,52 2,45 2,87 2,45 2,65 2,32 2,59 Xср.  m 2,529 5,862 0,478 Таблица 12.2. Размер бактериальных клеток. Светло-бордовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,28 0,88 1,06 1,18 0,88 0,95 0,97 1,23 1,14 1,88 0,87 1,23 1,09 0,82 1,04 1,27 1,28 0,88 0,87 1,18 1,28 0,85 0,97 1,19 0,87 1,09 1,14 1,27 0,95 1,27 1,09 1,18 1,06 0,88 1,28 1,14 1,28 1,19 1,09 0,95 0,88 1,09 1,06 1,19 0,95 1,23 1,09 1,18 0,95 0,12 0,76 1,27 1,23 1,09 0,85 0,76 1,14 1,27 1,09 1,14 0,88 1,28 0,85 1,18 1,06 1,06 0,76 1,14 1,06 1,09 1,19 1,27 1,14 1,27 1,19 1,27 1,23 1,17 1,04 1,28 1,06 1,23 1,28 0,85 1,23 1,23 1,14 1,28 1,27 0,76 1,14 1,26 1,29 1,28 1,04 1,14 0,95 1,23 1,09 1,23 1,06 1,14 0,87 0,85 1,19 0,87 1,28 1,19 1,28 0,88 1,18 0,97 1,09 1,09 1,28 1,23 1,06 1,27 0,76 0,85 0,87 0,88 0,95 0,85 1,28 0,88 1,23 1,27 1,09 1,23 1,28 1,28 1,29 1,19 1,14 1,14 1,06 1,14 0,85 1,06 1,23 1,19 1,09 1,28 0,88 0,87 0,87 0,88 1,09 1,27 Xср.  m 1,084 5,281 0,432

89 Таблица 13.1. Размер бактериальных клеток. Бледно-розовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,32 2,38 2,02 2,08 2,35 2,09 2,17 1,98 2,18 1,97 2,22 2,35 2,36 1,98 2,36 2,02 2,09 2,75 2,09 2,08 2,02 1,88 1,98 2,22 2,27 2,58 2,58 2,08 2,27 2,08 2,35 2,08 1,88 1,89 2,45 1,88 2,74 1,98 2,18 2,09 1,98 2,45 2,18 2,08 1,97 1,98 2,58 1,89 1,88 2,18 2,02 1,88 2,38 1,87 2,09 2,02 1,88 1,97 2,08 2,22 2,36 1,89 2,45 2,17 2,32 1,98 2,02 2,79 2,35 2,09 2,38 2,32 2,35 1,97 2,17 1,88 2,78 1,98 2,18 2,03 1,98 2,09 2,09 2,17 2,75 2,22 2,45 2,02 2,38 1,88 2,22 2,22 2,08 1,89 2,18 1,98 2,74 1,88 2,17 1,88 2,46 1,89 2,17 2,35 2,38 1,97 2,03 2,75 2,27 1,98 2,03 2,38 2,38 2,27 2,06 1,97 2,03 2,78 2,38 2,35 1,35 2,46 2,79 2,36 2,03 2,22 2,09 2,45 2,18 1,88 1,98 2,38 1,98 2,27 2,58 2,36 2,46 2,36 2,46 2,45 1,88 2,75 2,79 2,74 1,98 2,17 1,97 2,38 2,32 2,36 Xср.  m 2,241 9,957 0,814 Таблица 13.2. Размер бактериальных клеток. Бледно-розовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,06 1,35 0,76 0,95 1,09 1,14 0,76 1,09 1,35 1,06 0,87 0,76 0,87 0,88 0,76 1,35 1,35 0,95 1,28 1,28 0,88 0,88 1,33 1,35 0,87 1,19 1,28 1,35 0,76 1,27 1,19 1,35 1,28 1,06 1,33 1,33 1,09 1,09 1,19 1,19 0,76 1,23 1,35 1,09 1,27 0,85 1,06 1,35 0,95 1,19 1,09 0,76 1,27 1,14 0,95 1,33 0,95 1,27 1,27 1,28 1,35 1,35 1,19 0,85 0,87 1,35 1,28 1,27 1,27 1,06 1,06 1,33 0,95 0,76 1,06 1,27 1,35 1,23 0,87 0,88 0,87 0,85 1,06 1,14 1,14 0,95 1,28 1,27 1,23 1,23 0,85 1,35 1,06 1,29 0,76 1,19 1,14 1,14 1,14 0,87 1,35 0,85 1,28 0,85 1,35 1,06 0,88 0,76 0,88 1,23 1,14 1,06 1,29 1,29 1,14 1,34 1,09 0,87 0,95 0,87 1,27 1,23 0,88 0,87 1,33 1,19 0,85 1,06 0,95 0,85 0,85 0,76 1,17 1,27 1,33 1,23 1,35 1,14 1,09 1,14 1,29 0,95 1,23 0,85 1,27 0,88 1,19 1,29 1,35 1,06 Xср.  m 1,097 5,572 0,456

90 Таблица 14.1. Размер бактериальных клеток. Розовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 2,98 2,99 3,39 2,18 2,91 2,53 2,69 2,74 2,65 2,38 2,79 2,89 2,74 2,84 3,39 2,84 2,58 2,79 2,99 2,55 2,37 2,95 2,58 2,58 2,95 3,12 2,97 3,03 2,99 2,55 2,64 3,03 2,99 2,92 2,55 2,85 2,88 2,58 2,24 2,84 2,75 2,37 2,58 3,03 2,88 2,95 2,37 2,88 2,53 2,89 2,58 2,83 2,37 2,98 2,89 2,65 2,92 3,21 2,74 2,32 2,55 2,53 2,95 2,75 2,37 2,79 2,65 2,95 3,39 3,32 3,03 2,65 2,74 2,37 2,07 2,34 2,65 2,99 2,79 3,03 2,85 2,89 2,97 2,69 2,53 3,39 3,03 2,83 2,95 2,89 2,88 2,79 2,95 2,69 2,69 2,55 2,85 2,83 2,53 2,64 2,54 2,58 2,83 2,07 2,32 2,92 2,24 2,64 2,24 3,23 2,99 2,79 2,58 2,85 2,85 2,32 2,92 2,07 2,24 2,75 2,69 2,55 2,64 2,75 2,95 2,07 2,37 2,69 2,84 2,74 2,65 2,58 2,88 2,58 3,03 2,89 2,55 2,75 2,55 2,89 2,97 2,83 2,64 2,95 2,66 2,69 2,32 2,84 2,88 2,64 Xср.  m 2,722 10,135 0,828 Таблица 14.2. Размер бактериальных клеток. Розовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,06 1,09 0,88 1,14 1,05 0,87 1,28 1,18 1,19 1,05 1,15 0,76 1,23 0,97 1,05 1,18 0,95 0,76 1,18 1,04 0,87 1,27 0,96 1,18 1,14 1,23 0,97 1,18 1,09 1,23 1,28 1,04 1,18 1,23 0,76 1,27 1,04 1,24 1,05 0,97 1,05 1,18 1,28 1,18 1,36 1,28 1,06 1,05 1,49 1,49 1,49 1,04 0,96 0,87 1,27 0,76 1,18 1,05 1,47 1,23 1,14 1,18 1,09 1,14 1,14 0,95 1,09 1,04 1,23 1,49 1,14 1,27 0,76 1,04 1,18 1,19 1,27 1,28 0,76 1,36 1,06 1,18 1,09 1,09 0,88 1,23 1,18 1,36 1,06 1,49 1,04 0,76 1,36 0,88 1,18 1,19 0,96 0,85 1,18 0,87 0,95 1,49 1,18 1,27 1,06 1,14 0,96 1,28 1,27 1,49 1,04 0,96 0,97 1,18 0,88 0,96 1,27 1,14 1,09 1,06 1,04 1,05 1,18 0,97 1,27 0,97 0,76 1,09 1,14 0,85 0,95 1,28 1,14 1,36 1,36 1,09 1,18 1,28 1,23 0,76 1,04 1,06 1,18 1,28 1,28 1,18 1,19 0,76 1,18 1,14 Xср.  m 1,109 4,695 0,384

91 Таблица 15.1. Размер бактериальных клеток. Серо-розовые колонии. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 3,08 2,83 2,89 3,25 2,95 2,92 2,92 2,74 2,24 2,79 2,55 2,74 2,32 2,79 3,26 2,69 2,32 2,24 2,85 2,55 2,39 2,38 2,55 2,58 2,88 2,24 2,65 2,24 2,24 2,55 2,79 2,83 2,99 2,55 3,08 2,97 2,88 2,21 2,85 2,88 2,55 2,69 2,92 2,55 2,24 2,37 2,64 3,03 2,85 2,75 2,89 2,58 2,37 2,74 3,08 3,03 2,58 2,38 2,64 2,88 2,32 2,58 2,35 2,89 3,08 2,92 2,37 2,89 2,97 2,58 2,38 2,95 2,89 2,95 2,32 2,53 2,55 2,84 2,58 2,89 2,53 2,84 3.23 2,89 2,89 2,64 2,75 2,52 2,92 2,55 2,95 3,08 2,79 3,08 2,69 2,37 2,65 2,95 2,75 2,64 2,32 2,38 3,08 2,95 3,03 2,32 2,75 2,92 2,83 2,99 2,24 2,69 3,0, 2,53 2,95 2,65 2,53 2,65 2,89 2,32 2,55 2,92 2,37 2,84 2,84 2,97 2,99 2,24 2,55 2,32 2,95 3,08 2,38 2,85 3,08 2,24 2,55 2,96 2,89 2,89 2,58 2,38 2,97 2,32 2,92 2,79 2,65 2,92 2,24 2,55 Xср.  m 2,693 9,837 0,804 Таблица 15.2. Размер бактериальных клеток. Серо-розовые колонии. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,23 1,08 1,49 1,08 1,14 1,23 1,09 1,06 0,87 0,95 0,87 1,06 1,05 1,47 1,28 0,88 1,28 1,27 1,09 1,19 1,28 1,05 1,27 0,95 0,95 0,88 1,19 0,95 1,18 0,85 1,35 1,35 1,49 0,88 1,49 1,09 1,35 1,18 1,35 1,09 1,06 1,23 1,09 1,27 0,87 1,06 1,33 0,95 1,06 1,35 0,87 1,27 1,08 1,28 0,88 1,18 1,14 1,18 0,85 1,19 1,28 0,88 1,14 1,08 0,87 1,28 1,49 1,19 1,49 1,18 1,35 1,23 1,05 1,08 0,85 1,09 0,95 1,06 1,19 1,05 1,27 1,27 1,08 1,28 1,27 1,23 1,14 1,19 0,88 1,49 0,85 1,18 1,23 1,06 1,09 0,88 1,18 0,88 1,09 1,19 0,87 1,28 0,87 1,23 1,28 1,19 1,05 0,95 0,95 1,18 1,06 0,95 0,87 1,15 1,08 1,08 1,35 0,95 1,19 1,14 1,49 1,06 0,85 1,19 1,28 1,27 1,27 1,23 1,09 0,85 1,49 1,23 1,14 1,28 1,06 1,09 1,14 1,27 0,95 1,49 1,06 0,95 0,87 1,19 0,88 0,87 1,14 1,49 1,35 1,23 Xср.  m 1,125 4,599 0,376

92 Таблица 16.1. Размер бактериальных клеток. Бордовые колонии с металлическим блеском. Среда Левина. Бациллы № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 3,08 3,02 3,27 3,27 2,92 3,39 3,03 3,27 2,92 3,08 3,39 3,03 3,03 3,32 2,97 2,92 2,45 3,38 3,32 3,38 2,74 3,39 2,92 3,08 2,53 3,39 3,38 2,45 3,08 3,03 2,53 3,24 3,08 3,03 3,38 2,53 3,18 3,39 2,74 2,92 3,08 2,97 3,38 3,03 2,45 3,32 3,08 3,38 2,53 2,92 3,38 2,97 3,27 3,32 3,38 2,97 3,02 3,34 3,32 2,97 2,97 2,74 3,32 3,02 3,03 2,54 3,02 2,53 3,39 2,54 3,03 2,38 2,45 3,39 3,27 2,92 2,87 3,08 2,53 2,92 2,87 2,38 3,27 3,08 3,37 3,32 3,38 2,53 3,08 3,27 3,02 3,39 2,92 3,08 3,08 2,45 3,08 2,97 2,92 3,03 3,14 3,18 2,97 2,92 3,14 3,18 2,54 2,92 3,02 2,45 3,02 3,38 2,74 3,32 2,54 3,03 3,27 3,08 3,03 3,27 3,02 2,54 2,74 2,45 3,39 3,08 3,02 3,08 3,03 2,97 3,03 3,08 2,38 3,39 3,38 3,38 2,74 2,92 3,08 3,08 2,45 2,45 2,97 2,45 3,02 3,03 3,08 3,38 3,08 3,27 Xср.  m 3,009 12,905 1,055 Таблица 16.2. Размер бактериальных клеток. Бордовые колонии с металлическим блеском. Среда Левина. Кокки № препарата 1 2 3 Размер клеток, мкм 1,33 1,04 0,88 1,07 0,95 1,19 1,27 1,18 1,33 0,95 1,05 1,28 1,33 1,04 1,19 1,27 1,06 1,33 1,19 0,88 0,95 1,33 1,65 1,18 0,88 1,14 1,27 1,65 1,18 1,27 1,35 1,19 0,95 1,36 1,09 1,33 1,08 1,35 1,27 1,35 0,88 0,95 1,09 1,18 1,36 1,65 1,05 1,14 1,33 1,05 0,95 1,19 1,18 1,04 1,06 1,09 1,35 1,09 1,14 0,88 1,18 1,35 1,18 1,65 0,95 1,04 1,33 1,05 1,35 1,18 1,19 1,35 1,09 1,19 1,09 1,18 1,35 1,33 1,65 1,19 0,88 1,04 1,65 1,18 1,36 1,14 1,27 1,09 1,05 1,14 1,65 1,35 1,05 1,49 1,08 1,09 1,18 1,33 1,28 1,33 1,27 1,36 1,14 1,18 1,35 1,05 1,27 1,19 1,06 1,06 0,95 1,18 1,36 1,18 1,18 1,14 1,27 1,04 1,06 1,35 1,18 1,04 1,27 1,18 1,18 1,06 1,65 1,14 1,18 1,09 1,19 1,35 1,27 0,88 1,33 1,04 1,06 1,35 1,04 1,27 1,35 1,27 1,19 1,65 1,06 0,95 1,19 1,33 1,33 0,95 Xср.  m 1,188 4,644 0,378

Рецензии:

Авторизуйтесь, чтобы добавить рецензию

- у работы пока нет рецензий -

Отзывы:

Авторизуйтесь, чтобы оставить отзыв